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        枇杷功能成分及生物活性研究進(jìn)展

        2020-03-31 04:30:52劉麗麗劉玉垠趙小娜魯周民
        食品科學(xué) 2020年5期
        關(guān)鍵詞:枇杷葉三萜枇杷

        劉麗麗,劉玉垠,王 杰,趙小娜,魯周民

        (西北農(nóng)林科技大學(xué)林學(xué)院,陜西 楊凌 712100)

        枇杷(Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.)又名盧桔,屬于薔薇科枇杷屬常綠小喬木,原產(chǎn)于中國。枇杷資源種類多樣、分布廣泛,在中國主要分布在福建、四川、浙江、江蘇、廣東和陜南等地[1],后經(jīng)引種在日本、巴基斯坦、以色列、西班牙、馬達(dá)加斯加、美國等地都有分布[2]。

        枇杷在人類醫(yī)療、食用方面發(fā)揮著重要的作用。枇杷果實柔軟多汁、味道甘酸,富含多種營養(yǎng)元素和功能成分[3-4]。枇杷葉是中國傳統(tǒng)中藥,據(jù)《中國藥典》記載,枇杷葉飲片能歸肺、胃經(jīng),止咳清肺、降逆止嘔;用于肺熱咳嗽、氣逆喘急、胃熱嘔逆、煩熱口渴[5]。現(xiàn)今枇杷葉已被加工成多種止咳制劑走進(jìn)人們生活,包括枇杷露、膏、沖劑、膠囊、顆粒、滴丸等[6]。研究表明枇杷葉中的三萜酸是與止咳功能相吻合的活性成分,除此之外三萜酸還有抗腫瘤等功能;枇杷果實、花和種子中的萜類、酚類、黃酮、揮發(fā)油和苦杏仁苷等活性成分,具有止咳平喘、抗氧化、抗腫瘤、保肝護(hù)腎和降血糖等作用,有潛在的開發(fā)利用價值。

        1 主要功能成分

        1.1 萜類

        萜類是廣泛存在于植物組織中的次生代謝物質(zhì),根據(jù)其含的異戊二烯單位的數(shù)目分單萜、倍半萜、二萜、三萜和多萜[7]。枇杷中主要是6 個異戊二烯單位組成的烏蘇烷型、齊墩果烷型(游離或以酯、苷的形式存在)五環(huán)三萜類和少量單萜化合物(表1),其主要分布在枇杷葉、花和果實中[8-20]?!吨袊幍洹分杏涗浀乃幱描凌巳~質(zhì)量要求為:含齊墩果酸(oleanolic acid,OA)和烏蘇酸(ursolic acid,UA)的總量不少于0.70%(以干質(zhì)量分?jǐn)?shù)計,下同)[5]。洪燕萍等[21]對11 種枇杷屬植物中主要三萜酸含量進(jìn)行測定,發(fā)現(xiàn)南亞枇杷、臺灣枇杷、櫟葉枇杷、大花枇杷、大渡河枇杷、臺灣恒春、早鐘六號和普通枇杷野生樹OA和UA總量均超過0.70%。枇杷果實中OA和UA總量在0.50%左右[11]。

        表 1 枇杷中萜類成分Table 1 Terpene compounds discovered in E. japonica

        續(xù)表1

        1.2 酚類和黃酮

        酚類是羥基直接與芳環(huán)連接的化合物,包括簡單酚類和多酚類物質(zhì)。黃酮類是酚類化合物的一種,由兩個芳香環(huán)(A和B)通過中央三碳鏈連接而成的色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物,在植物體內(nèi)常與糖結(jié)合成苷類或者以游離態(tài)存在[23]。枇杷果實、葉、花和種子中均含酚類物質(zhì)[17,24-29]。據(jù)張文娜等[30]綜述,目前枇杷中已鑒定酚酸(羥基肉桂酸和羥基苯甲酸)和黃酮類(黃酮醇、黃烷酮、黃烷醇和黃酮木脂素)等物質(zhì)50余種,以下是近幾年研究較多的枇杷酚類和黃酮物質(zhì)(圖1)。

        從枇杷中分離出的主要酚類物質(zhì)有:綠原酸(1)、咖啡酸(2)、鄰香豆酸(3)、5-阿魏??鼘幩幔?)、阿魏酸(5)、對羥基苯甲酸(6)、3-對香豆??鼘幩幔?)、原兒茶酸(8)、沒食子酸(9)、鞣花酸(10)[25-27]。主要黃酮類化合物有:表兒茶素(11)[24]、槲皮素(12)[27]、槲皮素-3-O-半乳糖苷(13)、槲皮素-3-O-葡萄糖苷(14)、槲皮素-3-O-鼠李糖苷(15)、山柰酚-3-O-半乳糖苷(16)、山柰酚-3-O-鼠李糖苷(17)和山柰酚-3-O-葡萄糖苷(18)、蘆?。?9)、原花青素B-2(20)、辛可耐因Ib(21)[17,25]。

        圖 1 枇杷中主要黃酮和多酚化學(xué)結(jié)構(gòu)式[17,22,31]Fig. 1 Chemical structures of major polyphenols and flavonoids in E. japonica[17,22,31]

        1.3 揮發(fā)性成分

        揮發(fā)油成分主要由萜類(倍半萜和單萜)、脂肪族或芳香族化合物組成[31]。枇杷花和種子中主要含苯甲醛、苯乙醇和苯甲酸等揮發(fā)性成分(表2)。

        張麗華等[32]采用固相微萃取技術(shù)結(jié)合GC-MS分析,從枇杷花提取物中分離鑒定出49 種組分,包括酸(20.69%)、醛(16.86%)、醇(13.2%)、酯(8.18%)、萘(3.35%)和苯酚(0.95%)等,其中苯乙醇含量最高,其次為苯甲醛。不同品種、地域環(huán)境下的枇杷花香氣成分有所差異。閆永芳[33]發(fā)現(xiàn)寧海枇杷花香氣組分主要有32 種,苯甲醛相對含量最高,占20.86%,其次為二十八烷(14.94%)。Hong Yanping等[34]從香花、普通枇杷葉中共分離出109 種精油成分,植物醇含量均為最高,分別占相對含量的57.44%和17.81%。李長虹等[35]從枇杷核中分離出39 個化合物,鑒定出20 個,占揮發(fā)油總量的89.69%,其中苯甲醛(65.31%)和苯甲酸(20.42%)成分相對含量最高。

        表 2 枇杷主要揮發(fā)油成分Table 2 Major volatile oils in E. japonica

        1.4 苦杏仁苷

        苦杏仁苷是芳香族氰苷(圖2),其在苦杏仁苷酶、櫻葉酶等β-葡萄糖苷酶作用下被水解,生成野櫻皮苷和杏仁氰,后者遇熱分解生成的帶苦杏仁味的苯甲醛和氫氰酸有止咳平喘、抗炎等藥理作用[36-37]。枇杷種子、花和果皮中都含有大量苦杏仁苷[29,38-40]。林國榮等[38]以高效液相色譜法測得解放鐘枇杷核苦杏仁苷含量為2.11%。Wu Hui等[39]以同樣的方法測定了24 種枇杷核中苦杏仁苷,其質(zhì)量分?jǐn)?shù)在0.22%~1.67%。目前醫(yī)藥用苦杏仁苷主要來自薔薇科杏屬(E. Prunus)植物的種子,枇杷種子還未被大量應(yīng)用,這可能與含量低于標(biāo)準(zhǔn)3.0%有關(guān)[5]。

        圖 2 枇杷苦杏仁苷化學(xué)結(jié)構(gòu)式[22]Fig. 2 Chemical structure of amygdalin in E. japonica[22]

        2 影響功能性成分含量的因素

        2.1 三萜酸含量的動態(tài)變化

        OA、UA、CA和MA含量隨器官、物候等變化。4 種三萜酸主要存在于葉部且會隨著葉的發(fā)育進(jìn)程積累增加;它們在葉、花、和果肉間質(zhì)量分?jǐn)?shù)不同,從高到低排序為落葉(23.2 mg/g)>成熟葉(21.7 mg/g)>嫩葉(17.5 mg/g)>果肉(7.36 mg/g)>花(6.40 mg/g)[11];季節(jié)變化也會對4 種三萜酸含量造成影響,OA、UA和CA含量隨月份的變化較小;MA含量變化較大,最高在11月,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.997%,8月份最低,為0.114%[41]。4 種三萜酸在同一生長階段枇杷葉中,UA含量最高、OA最低[42]。枇杷果實和花中的三萜酸含量在不同品種和發(fā)育階段表現(xiàn)出差異。周春華[29]研究24 種枇杷果皮中的OA和UA,發(fā)現(xiàn)含量范圍分別在0.59~1.68 mg/g md和2.82~8.20 mg/g md;不同發(fā)育階段的花和果實中OA和UA的變化規(guī)律在不同品種間不同。

        2.2 黃酮和酚類含量的動態(tài)變化

        枇杷葉不同部位、不同時期花的黃酮含量存在差異。葉尖黃酮含量最高,其次是葉中、全葉和葉柄,依次為(5.79±0.03)、(5.08±0.08)、(5.04±0.12)mg/g和(4.97±0.35)mg/g[43]。葉片不同發(fā)育階段總黃酮含量不同,生長葉總黃酮含量高于落葉;葉片總黃酮得率受不同溶劑影響,水提取物中總黃酮含量高于乙醇提取物[44]。枇杷花從花蕾到盛開的整個過程(花蕾期、露白期、初放期和盛開期)黃酮和總酚含量總體上呈先上升后下降的趨勢,其中露白期黃酮和總酚含量最高,分別是(13.39±0.45)mg/g和(76.06±1.18)mg/g[45];隨著枇杷花發(fā)育階段(早、中、晚期)不同,綠原酸和異槲皮苷含量先增加后降低,槲皮苷含量呈現(xiàn)上升趨勢[33]。

        不同品種間酚類物質(zhì)含量以及不同提取溶劑和處理方式的提取效果存在差異。閆永芳[33]發(fā)現(xiàn)寧海白枇杷花的總酚、綠原酸和異槲皮苷的含量明顯高于紅枇杷花。周春華[29]發(fā)現(xiàn)大葉楊墩、軟條白沙、大紅袍、寶珠和夾腳5 個品種花的總酚含量差異顯著(P<0.05),大葉楊墩含量最高,為9.15 mg/g,夾腳含量最低,為6.73 mg/g;以8 種有機(jī)溶劑對枇杷花類黃酮和總酚進(jìn)行提取,表明甲醇和乙醇提取效率較高。陳翔等[40]發(fā)現(xiàn)50 ℃烘干處理可以較好的保留花中槲皮素等含量。

        2.3 苦杏仁苷含量的動態(tài)變化

        枇杷苦杏仁苷含量因發(fā)育階段、品種特性、組織器官和處理方式而不同。Wu Hui等[39]發(fā)現(xiàn)中枇杷種子苦杏仁苷含量隨著種子發(fā)育至果實成熟過程先上升后下降;比較24 個品種苦杏仁苷含量,發(fā)現(xiàn)早鐘枇杷含量最高(1.67%),大紅袍最低,為0.22%。大紅袍枇杷果實中種仁苦杏仁苷含量最高,種皮和果皮次之,果實中含量最低;軟條白沙枇杷花的花瓣、萼片,雌雄蕊和穗梗中苦杏仁苷含量差異顯著(P<0.05),其中含量最高的是花瓣(0.37%)[29]。-20 ℃貯藏的鮮枇杷核在緩慢解凍(25 ℃)和快速解凍(100 ℃)條件下苦杏仁苷含量分別降為貯藏前的13.94%和72.27%;流通蒸氣法滅酶長期貯藏的種子苦杏仁苷含量保持穩(wěn)定[46]。陳翔等[40]發(fā)現(xiàn),白枇杷在盛花期苦杏仁苷含量最高,晚花期較低;加工處理時以烘箱50 ℃干燥法可以保留較高的苦杏仁苷含量。

        枇杷中三萜酸、黃酮、酚類物質(zhì)和苦杏仁苷含量因部位、發(fā)育程度、品種特性、加工處理方法等的不同而有所差異,對其變化規(guī)律研究有利于選擇最佳的采集利用時期。

        3 生物活性研究

        3.1 止咳平喘作用

        枇杷葉在臨床上主要用于止咳,其中起主要作用的是三萜類物質(zhì)。實驗中常以枸櫞酸噴霧、辣椒素、濃氨水法和組胺、乙酰膽堿法和SO2法等建立小鼠、豚鼠咳嗽模型,以酚紅排泌法建立生痰模型和小鼠耳腫脹法研究枇杷葉、花和種子提取物的止咳平喘祛痰活性。

        鞠建華等[8]研究枇杷葉乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇萃取物的鎮(zhèn)咳作用,發(fā)現(xiàn)當(dāng)UA劑量為240 mg/kg mb,總?cè)扑釀┝糠謩e為400、200 mg/kg mb時可以顯著縮短咳嗽潛伏期(P<0.05),減少咳嗽次數(shù)(P<0.05,P<0.01);枇杷葉醇提取物中烏蘇酸、2-羥基齊墩果酸和總?cè)扑釋Χ妆揭鸬男∈蠖[脹顯示很強(qiáng)的抗炎活性。張娜等[47]研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉水提取物有止咳活性的劑量為0.8~3.2 g/kg mb。陳曉芳[48]以辣椒素刺激C-纖維釋放P物質(zhì)、格列苯脲阻斷ATPK離子通道研究枇杷花醇提取物(flower of Eriobotrya japonica,F(xiàn)EJ)的止咳機(jī)制,發(fā)現(xiàn)FEJ中、高劑量組(1.5、3.0 g/kg mb)可以極顯著減少P物質(zhì)生成(P<0.01),但格列苯脲抑制不會對FEJ的鎮(zhèn)咳作用造成影響;止咳制劑機(jī)制可能是FEJ減少C-纖維P物質(zhì)表達(dá)而非激動鉀離子通道達(dá)到鎮(zhèn)咳效果。林國榮等[37]發(fā)現(xiàn)醇提枇杷核苦杏仁苷在100~150 mg/kg mb(相當(dāng)于生藥量2~3 g)時與對照清肺糖漿表現(xiàn)相似的止咳效果;100 mg/kg mb劑量的核提取液對抗小鼠耳腫脹的效果優(yōu)于150 mg/kg mb阿司匹林,枇杷核苦杏仁苷提取液有很好的止咳抗炎作用。

        因加工方法及提取溶劑不同、枇杷葉提取物的化痰平喘作用也存在差異,蜜炙枇杷葉的止咳化痰平喘總體效果明顯優(yōu)于生枇杷葉,水提物優(yōu)于醇提物[49]。枇杷落葉和生長葉的水、乙醇提取物的止咳平喘化痰作用也有差異,生長葉水提取物化痰作用較高、可能與高黃酮含量有關(guān)聯(lián);落葉乙醇提取物中較高的止咳作用可能與三萜酸含量較高有關(guān)[43]。

        3.2 抗炎作用

        三萜酸對關(guān)節(jié)炎、慢性支氣管炎和呼吸系統(tǒng)疾病有明顯的抑制。Zhang Jingxiao等[50]以系統(tǒng)藥理學(xué)方法探究枇杷葉的抗炎活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)枇杷葉含有11 種抗炎成分,它們主要將前列腺素合成酶(prostaglandin G/H synthase 2,COX2)、花生四烯酸鹽-脂氧合酶(arachidonate 5-lipoxygenase,ALOX5)、過氧化酶增殖因子活化受體(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)和轉(zhuǎn)錄因子p65(transcription factor p65,RELA)作為靶點,通過參與絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號通路、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎途徑和NF-κB信號通路調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)控制炎癥的發(fā)生。

        葛金芳等[51-52]以氣管注入脂多糖聯(lián)合尾靜脈注射卡介苗建立慢性支氣管炎動物模型,研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉三萜酸(triterpene acids of loquat leaf,TAL)可明顯減少支氣管腔內(nèi)的分泌物和黏膜上皮細(xì)胞脫落,并抑制支氣管黏膜上皮細(xì)胞增生,使支氣管內(nèi)徑增大通氣量增大;TAL灌胃給藥對大鼠腹腔毛細(xì)血管滲出、肉芽腫和原發(fā)性、繼發(fā)性佐劑性關(guān)節(jié)炎等炎癥病變有明顯的抑制作用。Takuma等[53]用5-氟尿嘧啶(5 fluorouracil,5-FU)給藥制備倉鼠黏膜炎模型實驗枇杷種子提取物(E. japonica seed extract,ESE)抗炎作用,發(fā)現(xiàn)ESE可能通過預(yù)防和控制黏膜炎部位細(xì)菌感染和使用抗癌藥物后體內(nèi)過度氧化應(yīng)激,促進(jìn)化療引起的黏膜炎的愈合。Yang Yaru等[54]發(fā)現(xiàn)TAL對博萊霉素A5誘導(dǎo)大鼠肺纖維化有減緩作用,其機(jī)制可能與TAL能抑制肺巨噬細(xì)胞中腫瘤壞死因子-α(tumour necrosis,TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)的表達(dá)有關(guān)。

        3.3 抗氧化作用

        枇杷黃酮提取物有抗油脂氧化活性。蔣企洲等[55]研究枇杷葉黃酮對芝麻油和豬油的抗氧化性能,結(jié)果顯示10%枇杷葉黃酮提取物可以降低貯藏過程中芝麻油和豬油的過氧化值,其中對芝麻油抗氧化效果和0.05%叔丁基對苯二酚(tert-butyl hydroquinone,TBHQ)相近;枇杷葉黃酮與抗壞血酸有協(xié)同作用,可以顯著抵抗豬油氧化。Delfanian等[56]以TBHQ為對照,過氧化值、游離脂肪酸值、共軛二烯和三烯值為指標(biāo),研究枇杷果皮多酚提取物在大豆油煎炸(24 h、180 ℃)和貯藏過程中的抗氧化作用(60 d、25 ℃),發(fā)現(xiàn)煎炸過程中400 mg/kg枇杷果皮多酚提取物的抗氧化活性高于TBHQ和其他處理,但貯藏過程中抗氧化活性稍低于TBHQ,枇杷果皮多酚是潛在的天然植物油抗氧化劑。

        枇杷黃酮和酚類等提取物有清除體內(nèi)外自由基的能力。林素英等[24]研究發(fā)現(xiàn)枇杷果實酚類物質(zhì)對1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基有清除作用,其中綠原酸、新綠原酸和隱綠原酸與抗氧化能力呈正相關(guān)。王建超[57]比較枇杷葉多酚純樣、茶多酚和抗壞血酸對DPPH自由基、2,2’-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基、羥自由基、亞硝基自由基的清除能力,發(fā)現(xiàn)枇杷葉多酚抗氧化性高于茶多酚、與抗壞血酸相當(dāng)。許麗旋[58]發(fā)現(xiàn)枇杷葉黃酮質(zhì)量濃度為0.05~4.00 g/L時能減少小鼠肝線粒體及肝勻漿丙二醛(malondialdehyde,MDA)的生成,抑制H2O2誘導(dǎo)的小鼠紅細(xì)胞溶血。枇杷核總黃酮提取液對羥自由基的清除率最高可達(dá)55%[28]。李長虹等[35]研究發(fā)現(xiàn)25%枇杷核揮發(fā)油的抗氧化性高于2.00 mg/mL的VC。

        抗氧化性強(qiáng)弱受提取溶劑和方法的影響。Delfanian[56]采用DPPH法、β-胡蘿卜素/亞油酸體系法和rancimat法,比較浸提法、超聲輔助法和超臨界CO2提取法對枇杷果皮提取物抗氧化性的影響,發(fā)現(xiàn)當(dāng)劑量為400 mg/kg時,枇杷果皮抗氧化活性為浸提法>超聲輔助>超臨界CO2提取物。乙醇、水、乙醇-水(體積比1∶1)3 種溶劑對枇杷果肉、果皮中提取物及其抗氧化性的影響不同,以乙醇-水(體積比1∶1)法獲得的提取率和抗氧化活性均較高,果皮的抗氧化性高于果肉,可能與果皮中酚類物質(zhì)含量較高有關(guān)[59]。

        3.4 抗菌免疫作用

        枇杷三萜類、揮發(fā)性成分有抗菌、抗過敏活性。Tan Hui等[60]研究了枇杷葉中18 種三萜酸對皮膚痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acnes)的抑制作用,其中12 種三萜酸對P. acnes表現(xiàn)抑制作用,其中以烏蘇酸、山楂酸、科羅索酸和薔薇酸的抑制作用最強(qiáng),4 種三萜酸的最小抑制(生長)濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)均為50 μg/mL,最低殺菌(殺死)濃度分別為100、150、100、50 μg/mL。肖新生等[61]采用濾紙片法,研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉水提取物、乙醇提取物、正己烷提取物對食品中常見污染菌大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)均有抑制作用,其中乙醇提取物抑菌效果最好,最低抑菌濃度分別為大腸桿菌100 μg/mL,金黃色葡萄球菌10 μg/mL,枯草芽孢桿菌1 000 μg/mL。Hong Yanping[34]發(fā)現(xiàn)香花、普通枇杷葉精油提取物對白色念珠菌(Canidia albicans)和木霉菌(Trichoderma spp.)有抑制作用。

        Tan Hui等[60]以β-氨基己糖苷酶釋放量為指標(biāo)建立大鼠嗜堿性粒細(xì)胞系(rat basophilic leukemia,RBL-2H3)過敏性疾病模型,研究枇杷葉三萜酸提取物抗過敏性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)烏蘇酸(1 μg/mL(質(zhì)量濃度,后同)、72.5%(抑制率,后同))、3-表科羅索酸(9 μg/mL、54.4%)、和薔薇酸(12 μg/mL、74.5%)可以顯著抑制β-氨基己糖苷酶釋放,有很好的抗過敏活性。Onogawa等[62]探明枇杷種子醇提取物(E. japonica seed extract,ESE)含有抗組胺劑,能通過抑制豚鼠肥大細(xì)胞釋放組胺而緩解I型過敏即時反應(yīng)引發(fā)的背部血管擴(kuò)張、通透性增加等過敏性癥狀;建立豚鼠過敏性鼻炎實驗?zāi)P?,發(fā)現(xiàn)ESE能減少豚鼠打噴嚏和抓鼻子的頻率,增加鼻腔黏液的分泌。

        3.5 保肝護(hù)腎作用

        枇杷提取物對乙醇、病毒等所致肝腎損傷有保護(hù)作用。Wu Shaokang等[63]證明枇杷花黃酮提取物能通過降低丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、甘油三酯、丙二醛和肝臟指數(shù),減少乙醇代謝對肝臟細(xì)胞的損害;通過促進(jìn)脂肪型甘油三酯脂肪酶和血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)mRNA的表達(dá)最終減輕肝細(xì)胞脂肪變性程度,對小鼠急性酒精性肝損傷有保護(hù)作用。何玉琴等[64]以尿素氮和肌酐為主要指標(biāo)研究枇杷葉提取物對雞傳染性支氣管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)人工感染雞肝腎功能的影響,實驗表明與陽性對照相比,枇杷葉提取物均能降低尿素氮和肌酐等生化指標(biāo)含量,以質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.8%效果最佳(P<0.05);0.8%和1.0%枇杷葉提取物能極顯著增強(qiáng)血清IBV抗體水平(P<0.01),抑制IBV對雞肝腎功能的破壞。以二甲基亞硝胺和CCl4建模,發(fā)現(xiàn)枇杷核提取物能改善二甲基亞硝胺和CCl4造成的大鼠肝損害,但對CCl4類型改善稍弱;進(jìn)一步以不同時間給予不同劑量CCl4建立大鼠肝損害模型,發(fā)現(xiàn)建模8 周時枇杷核提取物對肌酐中的視黃醛類、TGF-β以及羥脯氨酸量呈改善狀況,肝纖維化減弱,與對照組無明顯差異[65]。

        3.6 抗腫瘤作用

        枇杷中的烏蘇烷型、齊墩果烷型三萜和部分黃酮化合物對淋巴瘤、乳腺癌細(xì)胞、胰腺癌細(xì)胞和白血病細(xì)胞有抑制作用。Ito等[66]通過體外實驗和小鼠皮膚致癌測試證明,從枇杷葉中分離出的玫瑰苷和原花青素B-2對淋巴瘤早期抗原細(xì)胞抑制作用強(qiáng)于(-)-表沒食子兒茶素沒食子酸酯。Kim等[67]發(fā)現(xiàn)枇杷葉、種子醇提取物可以通過抑制黏附蛋白的表達(dá)或活性、誘導(dǎo)組織重構(gòu)、細(xì)胞外基質(zhì)基底膜降解、血管生成和腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)酶(基質(zhì)金屬蛋白酶)的活性來控制人類乳腺癌細(xì)胞系(MDA-MB-231)的增殖。Lu Qingyi等[68]以13C追蹤、流平衡分析,研究了枇杷葉提取物(loquat leaf extract,LLE)對人胰腺癌細(xì)胞(MIA PaCa-2)代謝的影響,發(fā)現(xiàn)LLE對MIA PaCa-2細(xì)胞活性呈劑量依賴性抑制,以質(zhì)量濃度200 μg/mL效果較好;抑制機(jī)制可能為LLE通過改變腫瘤細(xì)胞氧化/非氧化戊糖和丙酮酸脫氫酶/異檸檬酸脫氫酶通量比抑制腫瘤細(xì)胞的核糖和脂肪酸的新合成。

        研究證明三萜酸能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡。李琪[69]發(fā)現(xiàn)齊墩果酸、烏蘇酸和2α-羥基齊墩果酸對白血病細(xì)胞K562(人慢性白血病細(xì)胞)有抑制效果,其中烏蘇酸質(zhì)量濃度為20 μg/mL時對癌細(xì)胞生長抑制率達(dá)91.96%。Uto等[70]發(fā)現(xiàn)枇杷葉三萜酸提取物(UA、OA、CA、MA),尤其是CA能有效誘導(dǎo)HL-60(白血病原髓細(xì)胞)細(xì)胞凋亡,凋亡機(jī)制除線粒體通路外還涉及死亡受體通路,具體為CA能誘導(dǎo)凋亡蛋白酶Caspase-8和Caspase-9的活化,Caspase-8的活化通過誘導(dǎo)tBid介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bax活化而觸發(fā)線粒體功能障礙。Zar等[71]研究枇杷葉茶提取物(loquat tea extract,LTE)可以通過線粒體功能障礙途徑抑制人早幼粒白血?。℉L-60)細(xì)胞擴(kuò)散并誘導(dǎo)其凋亡,LTE對HL-60細(xì)胞的抑制表現(xiàn)為劑量依賴性抑制,且24 h半抑制濃度為40 μg/mL。

        3.7 降血糖作用

        枇杷葉、果實和種子提取物有降血糖功能。Tommasi等[9]以糖尿病小鼠和正常小鼠進(jìn)行實驗,首次發(fā)現(xiàn)了倍半萜苷的降血糖作用,并指出烏蘇烷型三萜酸3β,6α,19α-trihydroxy-urs-12-en-28-oic acid和2α,3βdihydroxy-urs-12-en-28-oic acid 2 種物質(zhì)可以顯著抑制糖尿病小鼠血糖并能降低正常小鼠血液中糖含量。

        Shih等[72]探究了枇杷提取物(cell suspension culture of Eriobotrya japonica,TA)對高脂喂養(yǎng)小鼠的糖尿病和高血脂癥狀的調(diào)節(jié)作用機(jī)理,發(fā)現(xiàn)TA可以增加肝臟和脂肪組織中AMPK-α(Thr172)磷酸化蛋白的含量,有效預(yù)防高脂喂養(yǎng)引發(fā)的血糖、瘦素和胰島素水平的增加。調(diào)節(jié)機(jī)理可能是通過抑制催化甘油三酯合成的?;o酶A和二?;视王;D(zhuǎn)移酶2的表達(dá),而表現(xiàn)出降血脂作用;通過磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶下調(diào),改善胰島素致敏和TA(1.0 g/kg劑量)降低肝臟和脂肪11-β-羥基類固醇脫氫酶的表達(dá),減少肝葡萄糖產(chǎn)生,最終表現(xiàn)抗糖尿病特性。Shafi等[73]以四氧嘧啶建模,評價枇杷果實醇提物抗糖尿病和降血脂作用,發(fā)現(xiàn)200 mg/kg mb給藥10 d能顯著降低小鼠血糖血脂水平,其機(jī)制可能為果實醇提物刺激β細(xì)胞分泌胰島素或增強(qiáng)組織對糖的吸收。

        4 結(jié) 語

        枇杷有很好的食用和醫(yī)療保健作用,包括治咳嗽、清肺祛痰、抗氧化、抗菌、抗炎、抗腫瘤、保肝護(hù)腎;各功能成分含量隨枇杷部位、品種特性、物候特征、加工處理方式而呈現(xiàn)一定的規(guī)律性,對其成分、功能及其變化規(guī)律的研究有利于枇杷藥品制劑、食品和保健品開發(fā)。

        一直以來枇杷因果實美味營養(yǎng)、止咳抗炎作用明顯而受到廣泛歡迎。近年來對枇杷功能成分的研究取得了一定的成果,但是從整體上來看,枇杷功能成分的利用的研究還不夠深入,還有一些方面需要進(jìn)一步深入研究,比如:1)枇杷三萜酸含量豐富有止咳抗腫瘤的作用,而目前在臨床上枇杷主要用來止咳,其多種抗癌功效并未得到有效發(fā)揮,因此對枇杷葉抗腫瘤藥劑研發(fā)具有廣泛前景;2)枇杷果實味美,但枇杷果實成熟期短、不耐貯藏,對可應(yīng)用于生產(chǎn)的枇杷保鮮貯藏還有待深入研究;另外,目前市場上枇杷加工產(chǎn)品較少、還沒有形成產(chǎn)業(yè)化,所以還需要對果實加工進(jìn)行深入有效的研究。枇杷黃酮和揮發(fā)性成分天然、低毒,可作為美容產(chǎn)品、食品的添加劑、香料和精油進(jìn)行開發(fā);3)枇杷種子苦杏仁苷含量高,有祛痰止咳、抗氧化等功效。2015年中國的枇杷產(chǎn)量已達(dá)52.1萬 t[74],按照種子約占果實總質(zhì)量的12%~25%[3]計算,有極其可觀的種子副產(chǎn)物,也為苦杏仁苷的提取以及應(yīng)用提供了大量的原料,可進(jìn)行枇杷核苦杏仁苷提取并開發(fā)醫(yī)藥制劑。

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