張時(shí)馨，彭麗桃，范 明，楊書珍，閆 等

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北 武漢 430070）

擴(kuò)展青霉是引起采后水果腐爛變質(zhì)的重要病原真菌之一，其在侵染果實(shí)的過程中會產(chǎn)生大量具有致癌致畸風(fēng)險(xiǎn)的展青霉毒素，對人們生活造成很大的安全隱患。目前，有關(guān)采后擴(kuò)展青霉防治方法的報(bào)道主要集中在以生防酵母為主的生物防治方法；以熱處理、低溫貯藏、涂膜保鮮等為主的物理防治方法以及以化學(xué)殺菌劑為主的化學(xué)防治?；瘜W(xué)防治方法操作方便、價(jià)格低廉，目前是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中控制果實(shí)采后青霉病的主要方式，其中，噻菌靈、嘧霉胺和咯菌腈等化學(xué)殺菌劑最為常用。但由于長期、大量地使用化學(xué)殺菌劑會引起抗性菌株逐漸增加。Baraldi等從商業(yè)包裝房貯存的感病梨果實(shí)中分離出41 種噻苯達(dá)唑抗性菌株和9 種敏感性菌株[1]；也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)從商業(yè)包裝箱貯存的染病蘋果中分離的擴(kuò)展青霉在0～500 μg/mL嘧霉胺處理后抗性逐漸增加[2]；Amiri等在華盛頓州蘋果包裝房中分離的擴(kuò)展青霉在不同濃度的咯菌腈處理后其敏感性也顯著降低[3]?；瘜W(xué)殺菌劑劑量增加、農(nóng)藥殘留等問題日漸突出[4]。因此，研究安全、低毒、高效的抗擴(kuò)展青霉殺菌劑對于減少采后水果的腐爛變質(zhì)和安全生產(chǎn)具有重要的意義。

新型殺菌劑開發(fā)耗時(shí)長、成本高，且藥物安全性無法保障?！袄纤幮掠谩钡目焖侔l(fā)展為解決這一難題提供了契機(jī)。與傳統(tǒng)新藥研發(fā)相比，藥物再利用具有研究成本低、風(fēng)險(xiǎn)小、效率高等優(yōu)勢。近年來，研究發(fā)現(xiàn)了許多傳統(tǒng)藥物的新功能。如作為經(jīng)典鎮(zhèn)痛劑的阿司匹林具有抗血栓的作用[5]；抗瘧疾藥物氯喹能治療由禽流感H5N1病毒等引起的A549細(xì)胞自噬性死亡[6]；洛沙坦可治療高血壓和用作糖尿病腎病的血管緊張素II受體拮抗劑，并可顯著緩解H5N1病毒引起的小鼠急性肺損傷[7]。因此，“老藥新用”在藥物開發(fā)中具有廣闊的應(yīng)用前景。

細(xì)胞膜的主要功能是維持細(xì)胞穩(wěn)定代謝的胞內(nèi)環(huán)境，調(diào)節(jié)和選擇物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。很多臨床藥物通過干擾細(xì)胞膜的功能來發(fā)揮其藥理作用。唑類藥物通過干擾細(xì)胞膜中羊毛甾醇14-α-脫甲基酶的穩(wěn)定性而選擇性地抑制麥角甾醇的產(chǎn)生，從而破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)[8-9]。特比萘芬和萘替芬等烯丙胺類藥物主要以細(xì)胞膜上的角鯊烯環(huán)氧酶為作用靶標(biāo)[4]。此外，干擾能量代謝也是許多臨床疾病治療藥物的主要作用方式。如強(qiáng)心苷、依布硒等藥物主要通過轉(zhuǎn)換心肌能量代謝方式，改善患者心肌缺血及心臟功能，達(dá)到治療作用[10-11]。胺碘酮、吩噻嗪類等藥物通過干擾能量代謝達(dá)到抗心律失常和鎮(zhèn)靜作用[12-13]。但是，目前對于以細(xì)胞膜功能和能量代謝為主要作用方式的臨床藥物在其他生物體上的作用研究較少，尤其在水果采后病原菌的應(yīng)用研究中鮮有報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)從26 種以干擾細(xì)胞膜功能和能量代謝為主要作用機(jī)制的傳統(tǒng)臨床藥物中篩選對擴(kuò)展青霉具有顯著抑菌效果的抗菌藥物，并對其抑菌特性進(jìn)行研究，以期篩選出有效控制擴(kuò)展青霉的抗菌劑，為傳統(tǒng)臨床藥物在采后水果防腐保鮮方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

擴(kuò)展青霉（Penicillium expansum）購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心。將菌種接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基上，（26±2）℃培養(yǎng)3～4 d后，繼續(xù)傳代培養(yǎng)，4 ℃冰箱保存。梨果實(shí)（Pyrus bretschneideri Rehd.）品種為‘皇冠梨’，購于湖北省武漢市洪山區(qū)獅子山街梧桐路中百超市。

聯(lián)苯芐唑（純度（下同）≥98%） 阿達(dá)瑪斯試劑有限公司；氟康唑（98%）、硝酸咪康唑（98%）、酮康唑（≥98%）、克霉唑（99%）、香芹酚（99%）、納他霉素（≥95%）、穿心蓮內(nèi)酯（98%）、5-氟胞嘧啶（99%）、蘭索拉唑（≥98%）、鹽酸異丙嗪（≥98%）、辛伐他汀（98%）、洛伐他?。?8%）、三氟拉嗪二鹽酸鹽（≥98%）、丁香酚（98%）、麝香草酚（98%）、N,N-二環(huán)己基碳二亞胺（98%）、制霉菌素（99%） 上海麥克林生化科技有限公司；奮乃靜（99%） 北京百靈威科技有限公司；新穿心蓮內(nèi)酯（≥98%）、脫水穿心蓮內(nèi)酯（≥98%）、甲硝唑（98%） 上海源葉生物科技有限公司；鹽酸氯丙嗪（≥98%）、依布硒（≥98%） 阿拉?。ㄉ虾＃┰噭┕?；泮托拉唑硫酸鹽（≥98%）、胺碘酮鹽酸鹽（≥98%） 梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

YX-280立式高壓滅菌鍋 合肥華泰醫(yī)療設(shè)備有限公司；SPX-150BIII生化培養(yǎng)箱 北京鑫潤科諾儀器儀表有限公司；EX20 Thermo Fisher顯微鏡 寧波舜玉儀器有限公司；SW-CJ-1FD超凈工作臺 蘇州凈化設(shè)備有限公司；SHZ-82A氣浴恒溫振蕩器 江蘇省金壇市宏華儀器廠；BS-210S分析天平 賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 抗菌藥物的篩選

抗菌藥物的篩選采用孢子萌發(fā)法[14]進(jìn)行。將40 μL 1×106個(gè)/mL的P. expansum孢子菌懸液接種在含有不同質(zhì)量濃度抑菌劑的PDA培養(yǎng)基上，置于26 ℃下培養(yǎng)9 h，在顯微鏡下觀察孢子萌發(fā)狀態(tài)，統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)數(shù)量，計(jì)算孢子萌發(fā)率和抑制率，以藥物質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，孢子萌發(fā)抑制率為縱坐標(biāo)，根據(jù)藥物毒力回歸方程計(jì)算藥物抑菌的半最大效應(yīng)濃度（the median effective concentration，EC50）[15]。

1.3.2 聯(lián)苯芐唑?qū)U(kuò)展青霉菌絲生長的影響

將培養(yǎng)24 h的菌餅反貼于含有聯(lián)苯芐唑的PDA培養(yǎng)基上，置于26 ℃下培養(yǎng)，并定期測定菌餅直徑[16]。以培養(yǎng)2 d時(shí)完全沒有菌絲生長的最低濃度作為最小抑菌濃度（the minimum inhibitory concentration，MIC），以培養(yǎng)4 d時(shí)肉眼看不到菌絲生長的最低濃度作為最小殺菌濃度（the minimum fungicidal concentration，MFC）[17]。

菌絲體生物量測定實(shí)驗(yàn)：稱取1.5 g于26 ℃條件下培養(yǎng)24 h的菌絲，分別加入含12.8 μg/mL聯(lián)苯芐唑藥液的馬鈴薯液體培養(yǎng)基（potato dextrose broth，PDB）和不含藥液的PDB（對照）中，于26 ℃恒溫?fù)u床中120 r/min培養(yǎng)24 h，并在0、6、12、24 h收集菌絲，生物量以菌絲干質(zhì)量表示。每個(gè)組設(shè)3 次重復(fù)。

1.3.3 聯(lián)苯芐唑?qū)U(kuò)展青霉的抑菌穩(wěn)定性研究

在研究pH值對聯(lián)苯芐唑抑菌穩(wěn)定性的影響時(shí)，用1 mol/L NaOH和HCl溶液將pH值調(diào)節(jié)至3.5、4.5、5.5、6.5、7.5的PDA與1.6 μg/mL聯(lián)苯芐唑藥液混合；在研究溫度對聯(lián)苯芐唑抑菌穩(wěn)定性的影響時(shí)，將1.6 μg/mL聯(lián)苯芐唑藥液在4、25、50、75、100 ℃水浴處理30 min；在研究無機(jī)離子對聯(lián)苯芐唑抑菌穩(wěn)定性的影響時(shí)，將0.5 mol/L的NaCl、MgCl2、KCl、CaCl2、ZnCl2、FeCl3與1.6 μg/mL聯(lián)苯芐唑的PDA混合；在研究紫外線照射對聯(lián)苯芐唑抑菌穩(wěn)定性的影響時(shí)，將1.6 μg/mL的聯(lián)苯芐唑藥液在紫外強(qiáng)度為1 200 lx的紫外燈下20 cm處分別照射1、2、3、4 h[18-19]。上述5 種處理中，以不做處理的1.6 μg/mL的聯(lián)苯芐唑?yàn)閷φ眨?jīng)過不同處理的聯(lián)苯芐唑溶液與已滅菌的PDA培養(yǎng)基混合均勻，待培養(yǎng)基凝固后，按照菌餅法[16]將于26 ℃下培養(yǎng)24 h的菌餅反貼于含藥培養(yǎng)基上，置于26 ℃下培養(yǎng)，并定期測定菌餅直徑。在測定無機(jī)離子對聯(lián)苯芐唑抑菌穩(wěn)定性時(shí)，在第4天測定菌餅直徑。每個(gè)處理設(shè)3 次重復(fù)。

1.3.4 聯(lián)苯芐唑處理對‘皇冠梨’果實(shí)青霉病的防治效果

挑選無病蟲害、無機(jī)械傷且大小、色澤、成熟度等外觀品質(zhì)一致的‘皇冠梨’果實(shí)，用體積分?jǐn)?shù)為0.2%的次氯酸鈉溶液浸泡2 min，蒸餾水洗凈后于超凈工作臺中晾干。在果實(shí)腰部對果皮均勻造成0.3 cm×0.3 cm的傷口并接種15 μL 128 μg/mL的聯(lián)苯芐唑藥液和5 μL 1×105個(gè)/mL P. expansum孢子懸浮液后放于保鮮盒內(nèi)并用保鮮袋封口，于室溫下存放。5 個(gè)果實(shí)為一組，每組重復(fù)3 次，以接種等體積蒸餾水作對照（CK），分別在第1、3、5、7天觀察并記錄病斑直徑。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

利用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 20軟件進(jìn)行單因素方差分析，應(yīng)用最小顯著性差異（least significant difference，LSD）法檢驗(yàn)差異顯著性（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 擴(kuò)展青霉抗菌物質(zhì)的篩選

表 1 不同抗菌藥物對P. expansum孢子萌發(fā)的抑制活性Table 1 Inhibitory activity of drugs against spore germination of P. expansum

本實(shí)驗(yàn)通過孢子萌發(fā)法對26 種傳統(tǒng)臨床藥物對擴(kuò)展青霉的抑菌活性進(jìn)行了評價(jià)，結(jié)果如表1所示。26 種傳統(tǒng)臨床藥物對擴(kuò)展青霉孢子萌發(fā)均表現(xiàn)出不同程度的抑制作用，但不同藥物之間的抑菌活性具有較大差異。其中硝酸咪康唑、克霉唑、酮康唑、聯(lián)苯芐唑、納他霉素、5-氟胞嘧啶、依布硒6 種藥物對擴(kuò)展青霉表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑菌效果，EC50均小于2 μg/mL，其中硝酸咪康唑和聯(lián)苯芐唑的EC50分別為0.02 μg/mL和0.04 μg/mL。而甲硝唑、洛伐他汀對擴(kuò)展青霉的抑制效果相對較弱，EC50大于100 μg/mL。此外，從結(jié)果可以看出，所試藥物的抑菌活性與藥物的種類相關(guān)，咪唑類藥物抑菌效果最強(qiáng)，平均EC50達(dá)到0.094 μg/mL。其次為吩噻嗪和酚類藥物，平均EC50分別為23.108 μg/mL和36.667 μg/mL，而內(nèi)酯類藥物的平均EC50是酚類藥物的3 倍，抑菌效果較差。本研究還發(fā)現(xiàn)，依布硒、納他霉素和5-氟胞嘧啶具有較強(qiáng)的抑菌效果，其中5-氟胞嘧啶EC50達(dá)到0.084 μg/mL，也是具有殺菌潛力的藥物之一。

在8 種唑類藥物中，咪唑類藥物硝酸咪康唑、克霉唑、酮康唑、聯(lián)苯芐唑的抑菌效果最強(qiáng)，其次是三唑類的氟康唑，再次是苯并咪唑和硝基咪唑。4 種吩噻嗪類藥物也表現(xiàn)出不同抑菌活性，奮乃靜的EC50為4.998 μg/mL，遠(yuǎn)高于其他3 種藥物。內(nèi)酯類藥物中，辛伐他汀的EC50為12.182 μg/mL，抑菌活性高于其他4 種內(nèi)酯類藥物，而洛伐他汀對擴(kuò)展青霉則無明顯抑菌效果。在3 種酚類化合物中，雖然香芹酚和麝香草酚作為同分異構(gòu)體，但兩者的抑菌活性卻有較大差異，麝香草酚的EC50是香芹酚的2 倍。

2.2 聯(lián)苯芐唑?qū)U(kuò)展青霉菌絲生長的影響

圖 1 聯(lián)苯芐唑?qū). expansum菌絲生長的影響Fig. 1 Effect of bifonazole on the growth of P. expansum mycelium

由于聯(lián)苯芐唑具有價(jià)格低廉、對擴(kuò)展青霉抑制效果顯著的優(yōu)點(diǎn)；因此，本實(shí)驗(yàn)對聯(lián)苯芐唑的抑菌特性進(jìn)行了深入研究。如圖1A所示，聯(lián)苯芐唑能顯著抑制在固體PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)的擴(kuò)展青霉菌絲體的生長，且具有明顯的濃度效應(yīng)，其MIC和MFC分別為6.4 μg/mL和12.8 μg/mL。同時(shí)，聯(lián)苯芐唑處理顯著降低了液體PDB培養(yǎng)基中培養(yǎng)的菌絲體生物量。對照組菌絲體生物量隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長均勻增加，而處理組菌絲體生物量增長緩慢，聯(lián)苯芐唑處理12 h后均顯著低于對照組（P＜0.05）（圖1B）。因此，聯(lián)苯芐唑處理對擴(kuò)展青霉菌絲體的生長具有顯著的抑制作用。

2.3 聯(lián)苯芐唑?qū)U(kuò)展青霉的抑菌穩(wěn)定性的影響

圖 2 pH值（A）、溫度（B）、金屬離子（C）、紫外照射時(shí)間（D）對聯(lián)苯芐唑的抑菌穩(wěn)定性的影響Fig. 2 Effects of pH (A), temperature (B), metal ions (C) and UV irradiation time (D) on bacteriostatic stability of bifonazole

為了研究影響聯(lián)苯芐唑?qū)U(kuò)展青霉抑菌穩(wěn)定性的因素，本實(shí)驗(yàn)測定了在不同pH值、溫度、離子和紫外照射下聯(lián)苯芐唑?qū)U(kuò)展青霉抑菌活性的影響，結(jié)果如圖2所示。pH 6.5～8.5時(shí)，聯(lián)苯芐唑處理組菌餅直徑與對照組無顯著性差異（P＞0.05），pH 3.5～5.5時(shí)，菌餅直徑顯著高于對照組（P＜0.05）。表明聯(lián)苯芐唑在中性及弱堿性條件下穩(wěn)定，對酸敏感。在25、50、75 ℃時(shí)，聯(lián)苯芐唑處理組與對照組菌餅直徑無顯著性差異（P＞0.05），在4 ℃時(shí)，處理組菌餅直徑顯著低于對照組（P＜0.05），表明低溫能增強(qiáng)聯(lián)苯芐唑的抑菌活性；而在100 ℃時(shí)，處理組菌餅直徑顯著高于對照組（P＜0.05），表明高溫下聯(lián)苯芐唑熱穩(wěn)定性較低。在Zn2+、Fe3+的作用下，聯(lián)苯芐唑處理組菌餅直徑分別減小了32.52%和48.15%，表明Zn2+、Fe3+能增強(qiáng)聯(lián)苯芐唑的抑菌活性，而K+、Mg2+、Na+、Ca2+處理組與對照組無顯著性差異（P＞0.05）。同時(shí)，紫外照射1 h后，各處理組菌餅直徑均顯著高于對照組（P＜0.05），表明聯(lián)苯芐唑?qū)ψ贤庹丈涿舾小?/p>

2.4 聯(lián)苯芐唑處理對‘皇冠梨’果實(shí)青霉病的防治效果

圖 3 聯(lián)苯芐唑處理對‘皇冠梨’果實(shí)青霉病的防治效果Fig. 3 Inhibitory effect of bifonazole on blue mold caused by Penicillium expansum on ‘Huangguan’ pear fruit

本實(shí)驗(yàn)采用人工接種的方法研究了聯(lián)苯芐唑?qū)Α使诶妗麑?shí)青霉病的防治效果。如圖3A所示，隨著貯藏時(shí)間的延長，對照組和聯(lián)苯芐唑處理組梨果實(shí)病斑直徑均逐漸增大，處理組果實(shí)病斑直徑前3 d變化緩慢，3 d以后才有所增加，同時(shí)在整個(gè)貯藏過程中，處理組果實(shí)的病斑直徑顯著低于對照組（P＜0.05）。接種后第3天時(shí)，對照組果實(shí)病斑直徑為9.73 mm，是處理組的2.92 倍，第5天和第7天分別是處理組的1.68 倍和1.40 倍。從防治效果看，處理后第3天，對照組果實(shí)開始發(fā)生腐爛，傷口處先變軟，隨后病斑直徑迅速增大；而處理組果實(shí)腐爛程度明顯低于對照組（圖3B）。因此，聯(lián)苯芐唑處理對‘皇冠梨’果實(shí)青霉病具有明顯的防治效果。

3 討 論

在美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的新藥中，70%～80%是具有新用途的已批準(zhǔn)藥物，即“老藥新用”[20]。許多臨床藥物的有效性與安全性在長期的臨床實(shí)驗(yàn)中已被證實(shí)，其作用方式、藥理作用也更詳盡，在此基礎(chǔ)上研發(fā)新用途，“老藥新用”顯然更具優(yōu)勢，也為新藥開發(fā)提供了捷徑。本實(shí)驗(yàn)從26 種以干擾細(xì)胞膜功能和能量代謝的傳統(tǒng)藥物中篩選抗擴(kuò)展青霉活性物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)以細(xì)胞膜為主要作用靶標(biāo)的那他霉素、咪唑類等藥物對擴(kuò)展青霉具有強(qiáng)烈的抑菌作用；同時(shí)，依布硒、胺碘酮、吩噻嗪類等干擾能量代謝的藥物也具有較強(qiáng)的抑菌活性。因此，從以細(xì)胞膜為靶標(biāo)和干擾能量代謝為主要作用機(jī)制的傳統(tǒng)藥物篩選水果采后殺菌劑是可行的。

唑類藥物作為臨床上常用的廣譜抗真菌劑，對白色念珠菌、光滑念珠菌、熱帶假絲酵母等許多病原菌表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抗真菌活性[21]。在本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，咪唑類藥物對擴(kuò)展青霉的抑菌活性最強(qiáng)，是用于果蔬保鮮最有吸引力的抗菌藥物種類。其對擴(kuò)展青霉的抑菌效果顯著高于三唑類藥物氟康唑。Nenoff等研究了幾種常見的頭皮分離菌株對唑類抗真菌藥物的體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)幾種頭皮分離菌株的藥物敏感性為聯(lián)苯芐唑＞咪康唑＞氟康唑[22]。在本實(shí)驗(yàn)的4 種咪唑類藥物中，咪康唑和聯(lián)苯芐唑的抑菌效果強(qiáng)于克霉唑和酮康唑，表明前兩種藥物的應(yīng)用潛力更大。其次，吩噻嗪類藥物作為臨床抗精神病類藥物對擴(kuò)展青霉也具有抑菌效果，其中奮乃靜的抑菌效果明顯高于其他3 種藥物，是“老藥新用”中有潛力的藥物。據(jù)報(bào)道，奮乃靜和三氟拉嗪對結(jié)核桿菌、熱帶假絲酵母菌、金黃色葡萄球菌也具有很強(qiáng)的抑制作用[23]。也有研究表明，一些四環(huán)吩噻嗪和五環(huán)吩噻嗪類化合物因吩噻環(huán)的數(shù)量不同也表現(xiàn)出不同的抗菌活性[24]。此外，納他霉素、依布硒和5-氟胞嘧啶對擴(kuò)展青霉也具有較強(qiáng)的抑菌活性。張小華等發(fā)現(xiàn)納他霉素對黃曲霉、黑曲霉、絲孢酵母等11 種腐敗菌均具有顯著的抑菌活性[25]。Thangamani等的研究結(jié)果也表明，依布硒不僅能抑制腸球菌生長，還顯示出對金黃色葡萄球菌細(xì)胞內(nèi)抗性的清除作用[26]。因此，從老藥中篩選有效控制擴(kuò)展青霉的抗菌活性物質(zhì)具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

聯(lián)苯芐唑是一種高效、安全且耐受良好的咪唑類抗真菌藥物，具有廣譜的抗真菌活性，可抑制皮膚真菌、酵母菌、霉菌的生長[27-28]，對少數(shù)細(xì)菌也具有抑菌活性，且抑菌活性強(qiáng)于克霉唑和咪康唑[29]。此外，在臨床癬菌感染治療中，聯(lián)苯芐唑的治療效果顯著優(yōu)于克霉唑、益康唑、咪康唑等抗真菌藥物，且具有較高的安全性[30]。在動物實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，對家貓身上涂抹聯(lián)苯芐唑30 h后，體內(nèi)血液中聯(lián)苯芐唑的質(zhì)量濃度依然可以達(dá)到140 ng/mL，具有良好的治療效果，而在組織細(xì)胞中的儲存量極少，且毒副反應(yīng)較小，提高了用藥安全性[31]。也有研究報(bào)道，聯(lián)苯芐唑不僅作用于真菌細(xì)胞膜14-α-脫甲基酶，還作用于羥甲基麩氨酸輔酶A還原酶，這種對真菌細(xì)胞膜的特異性雙重抑菌作用與其他藥物相比也具有更高的安全性[32]，但在果蔬采后病原菌的應(yīng)用中卻鮮見報(bào)道。在本實(shí)驗(yàn)中，通過對聯(lián)苯芐唑抑菌特性進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)苯芐唑能夠顯著抑制果實(shí)采后重要病原真菌擴(kuò)展青霉菌絲體的生長，且在溫度25、50、75 ℃，含K+、Mg2+、Na+、Ca2+的環(huán)境及中性、弱堿性條件下抑菌活性穩(wěn)定。在‘皇冠梨’果實(shí)的體外接種實(shí)驗(yàn)結(jié)果中也表明聯(lián)苯芐唑處理對‘皇冠梨’果實(shí)青霉病具有明顯的防治效果。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)從26 種傳統(tǒng)藥物中篩選出了硝酸咪康唑、克霉唑、聯(lián)苯芐唑、酮康唑、5-氟胞嘧啶、納他霉素、依布硒等對擴(kuò)展青霉具顯著抑菌效果的藥物，為新型殺菌劑的研究和“老藥新用”提供了參考。此外，聯(lián)苯芐唑具有穩(wěn)定的抑菌效果，對‘皇冠梨’果實(shí)青霉病的顯著抑制效果也表明其在果蔬采后病害控制中存在的應(yīng)用價(jià)值，該研究為聯(lián)苯芐唑在水果采后病害防治中的進(jìn)一步研究提供了參考。