鐘明明，廖 一，齊寶坤,2,3，方 琳，孫禹凡，謝鳳英,2,，李 楊,2,3,

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150030；2.哈爾濱市食品產(chǎn)業(yè)研究院，黑龍江 哈爾濱 150000；3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 國(guó)家大豆工程技術(shù)研究中心，黑龍江 哈爾濱 150000）

乳液是兩種不混溶液體的混合物，而蛋白乳液是一種非均多相分散體系，其不穩(wěn)定性極大地影響食品的品質(zhì)和感官特性[1]。長(zhǎng)期以來，一直認(rèn)為大豆分離蛋白（soy protein isolate，SPI）由兩種主要的儲(chǔ)存蛋白組成，即大豆球蛋白（11S）和β-伴大豆球蛋白（7S），然而，大豆儲(chǔ)存蛋白組分中大豆親脂蛋白質(zhì)（soybean lipoprotein，SLP）含量占SPI儲(chǔ)存蛋白的30%左右，并有望作為天然乳化劑在食品工業(yè)中得到廣泛應(yīng)用。羥丙基甲基纖維素（hydroxypropyl methylcellulose，HPMC）是一種可食用性纖維素，其資源豐富、健康無毒，且具有良好的水溶性、成膜性和較強(qiáng)的表面活性，可以控制表面壓力并改善薄膜黏彈性[2]，作為良好穩(wěn)定劑用于乳液制備。

食品加工過程中乳液通常會(huì)經(jīng)歷反復(fù)的凍融循環(huán)，在冷凍-解凍的過程中會(huì)發(fā)生多種物理化學(xué)變化[3-4]，包括脂肪結(jié)晶、水分凍結(jié)、乳液冷凍濃縮、界面相變和生物大分子構(gòu)象改變等，從而影響了乳液的穩(wěn)定性[5]。目前，許多研究者利用物理、化學(xué)和酶法等改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和分子特性，從而改善蛋白乳液的凍融穩(wěn)定性。丁儉等[6]研究超聲處理后的SPI與多糖協(xié)同穩(wěn)定乳液的特性，并對(duì)所形成乳液在冷凍-解凍過程中失穩(wěn)機(jī)理進(jìn)行分析研究；Cisneros Estevez等[7]研究發(fā)現(xiàn)乳液的界面組成、加工條件等對(duì)乳液形成機(jī)制及凍融穩(wěn)定性有一定影響；王喜波等[8]利用胰蛋白酶處理得到不同水解度的SPI水解物，隨后與葡聚糖發(fā)生美拉德反應(yīng)，進(jìn)一步研究其對(duì)乳液凍融穩(wěn)定性的影響。綜上所述，目前關(guān)于乳化劑對(duì)純油體系結(jié)晶和乳液加工方式對(duì)乳液凍融穩(wěn)定性影響的研究較多，但對(duì)改性SLP與HPMC形成的乳化體系中的乳液穩(wěn)定機(jī)理與乳液結(jié)構(gòu)特性構(gòu)效關(guān)系的研究相對(duì)較少。

本實(shí)驗(yàn)以不同超聲功率處理的SLP作為乳化劑，HPMC作為分散劑制備乳液，研究超聲改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及其與纖維素交互作用對(duì)乳液凍融穩(wěn)定性的影響，通過凍融前后乳液粒徑、ζ電位和微觀結(jié)構(gòu)改變，對(duì)比分析乳液乳化性、聚結(jié)程度、出油率和濁度的差異，揭示乳液在冷凍-解凍過程中的失穩(wěn)機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

‘東農(nóng)42’大豆 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆研究所；HPMC（I型，黏度30 mPa·s）、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉 天津市東麗區(qū)天大化學(xué)試劑廠；葵花籽油市售；氯化鈉 天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所；硫酸北京新光化工試劑廠；試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

KF-250W超聲波細(xì)胞粉碎儀 寧波新芝生物科技股份有限公司；ULTRA-TURRAX UTL2000高壓均質(zhì)機(jī) 上海標(biāo)本模型有限公司；巨霸SC-15AH冷凍干燥機(jī) 上海卓易隆有限公司；LGR20-W臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 北京京立離心機(jī)有限公司；Mastersizer 2000激光粒度儀 英國(guó)馬爾文儀器有限公司；DELTAVISIONTMOMX SR激光共聚焦顯微鏡 德國(guó)徠卡公司；UV-5100型高性能紫外-可見分光光度計(jì) 上海奧析科學(xué)儀器廠；JASCO-J815圓二色性分光光度計(jì) 日本Sanwa儀器公司。

1.3 方法

1.3.1 SLP的提取

SLP的分離參考Samoto等[9]的方法并作修改。大豆磨粉，過60 目篩，正己烷脫脂制備低變性大豆脫脂粉，70 ℃干熱處理2 h，此時(shí)氮溶指數(shù)降至75%。稱取50 g干熱處理后的脫脂豆粉加入400 mL蒸餾水，用NaOH調(diào)節(jié)pH值至8.0，在20 ℃下攪抖1 h后3 000×g離心10 min，收集上清液并加入10 mmol/L Na2SO3，然后用H2SO4調(diào)節(jié)pH值至5.8，3 000×g離心10 min，用H2SO4調(diào)節(jié)上清液pH值至5.0，并在55 ℃下攪抖15 min，然后加入50 mmol/L NaCl溶液并用NaOH調(diào)節(jié)pH值至5.5，3 000×g離心10 min，沉淀即為SLP。

1.3.2 SLP超聲處理

將一定量SLP溶解在10 mmol/L pH 7.4的磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）中，配制質(zhì)量濃度為1 g/100 mL的SLP溶液，將SLP溶液在不同超聲功率（0、200、300、400、500 W）下處理5 min，處理完成后在室溫下攪抖2 h備用。

1.3.3 SLP-HPMC乳液的制備

將不同超聲功率處理的SLP溶液（1 g/100 mL）加入到等量HPMC溶液（0.2 g/100 mL）中，邊滴加邊磁力攪抖，形成復(fù)合物后，攪抖30 min，再加入5 g/100 mL葵花籽油，先于1 000 r/min條件下粗均質(zhì)3 min，再在100 MPa下高壓均質(zhì)，制得不同超聲功率處理的SLP-HPMC乳液，記為SLP（0/200/300/400/500）-HPMC，4 ℃條件下貯藏備用[10]。

1.3.4 循環(huán)凍融處理

將不同超聲功率處理的SLP-HPMC乳液立即轉(zhuǎn)移到50 mL的具塞塑料管中，在-20 ℃冷凍貯存22 h后，在室溫下解凍2 h，取部分樣品進(jìn)行后續(xù)分析。按上述步驟循環(huán)操作2 次。

1.3.5 粒徑和ζ電位分析

用10 mmol/L pH 7.4 PBS將各SLP-HPMC乳液稀釋至0.1 g/100 mL，裝入比色杯（PCS8501），使用激光粒度儀測(cè)定乳液粒徑分布和ζ電位。SLP（分散相）折射率為1.450，10 mmol/L pH 7.4 PBS（連續(xù)相）折射率為1.331[11]。實(shí)驗(yàn)均在25 ℃下進(jìn)行。

1.3.6 乳化活性和乳化穩(wěn)定性測(cè)定

參考Li Chen等[12]的方法測(cè)定乳化活性指數(shù)（emulsification activity index，EAI）和乳化穩(wěn)定性指數(shù)（emulsification stability index，ESI）。乳液制備完成后，分別于0、10 min從底部取樣50 μL，經(jīng)十二烷基硫酸鈉（sodium dodecyl sulfate，SDS）稀釋200 倍，充分混合后在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以SDS作空白對(duì)照。EAI和ESI分別按式（1）、（2）計(jì)算。

式中：ρ為SLP-HPMC乳液形成前的SLP質(zhì)量濃度5 mg/mL；L為比色杯厚度1 cm；φ為葵花籽油體積分?jǐn)?shù)0.25%；n為稀釋倍數(shù)200；常數(shù)T＝2.303；A0、A10分別為0、10 min時(shí)乳液的吸光度；Δt為10 min。

1.3.7 乳液微觀結(jié)構(gòu)觀察

參考Hayashi等[13]的方法采用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察乳液微觀結(jié)構(gòu)，評(píng)價(jià)乳液的凍融穩(wěn)定性。分別取1 mL新制和經(jīng)過循環(huán)凍融處理的不同超聲功率處理乳液，加入40 μL尼羅紅混合均勻，染色30 min，取一滴染色后的乳液樣品于帶凹槽的載玻片上，蓋上蓋玻片，甘油密封。在488 nm激發(fā)波長(zhǎng)處進(jìn)行激光共聚焦掃描，油鏡觀察。采集圖像分辨率為1 024×1 024。實(shí)驗(yàn)需避免玻片上污染物對(duì)圖像的影響。

1.3.8 濁度測(cè)定

將SLP-HPMC乳液用PBS溶液稀釋40 倍，以PBS為空白對(duì)照，用紫外-分光光度計(jì)于600 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，濁度按式（3）計(jì)算。

式中：n為稀釋倍數(shù)40；I為光程0.01 m。

1.3.9 聚結(jié)程度測(cè)定

聚結(jié)是乳液中油滴分子之間經(jīng)過接觸合并形成大油滴的過程。利用激光粒度儀測(cè)定粒徑，聚結(jié)度按式（4）計(jì)算。

式中：D[4,3]f為凍融后乳液的體積平均粒徑/nm；D[4,3]i為初始乳液的體積平均粒徑/nm。

1.3.10 出油率的測(cè)定

參考Palanuwech等[14]的方法并略加改動(dòng)。稱取0.015 g蘇丹Ⅲ試劑加入到1 000 g大豆油中，室溫?cái)嚩?2 h得到蘇丹Ⅲ油溶液。準(zhǔn)確稱取4 g蘇丹Ⅲ油溶液和16 g待測(cè)乳液于50 mL離心管中，振蕩混勻后16 000×g、4 ℃離心20 min，收集上層油液于508 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，同時(shí)以大豆油作空白。出油率按式（5）計(jì)算。

式中：m0為蘇丹Ⅲ油溶液質(zhì)量/g；m1為乳液質(zhì)量/g；A為離心前后蘇丹Ⅲ油溶液吸光度的比值；ω為乳液中油相的質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%。

1.3.11 圓二色光譜分析

參考Itoh等[15]的方法并做改動(dòng)。使用圓二色光譜儀在190～260 nm、298 K范圍內(nèi)對(duì)不同超聲功率處理的SLP溶液進(jìn)行掃描，參數(shù)設(shè)定：路徑長(zhǎng)度1mm；掃描速率100 nm/min；光譜分辨率0.1 nm；響應(yīng)時(shí)間1 s；步長(zhǎng)1 nm。通過CDPro軟件包計(jì)算SLP二級(jí)結(jié)構(gòu)相對(duì)含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0分析軟件和Origin 8.0軟件進(jìn)行處理，采用方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析（P＜0.05）。所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次，結(jié)果取平均值或平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 循環(huán)凍融對(duì)超聲改性SLP-HPMC乳液粒徑和ζ電位的影響

圖 1 循環(huán)凍融前后超聲改性SLP-HPMC乳液平均粒徑（A）和ζ電位（B）Fig. 1 Average particle size (A) and ζ potential (B) of sonicated SLP-HPMC emulsion before and after freeze-thaw cycles

通常蛋白乳液液滴的平均粒徑越小，乳液越穩(wěn)定[16]。由圖1A可知，在凍融循環(huán)前不同功率超聲改性SLP-HPMC乳液平均粒徑均接近600 nm，經(jīng)過1 次凍融循環(huán)后各乳液平均粒徑均增加1 倍以上，超聲功率為400 W時(shí)SLP-HPMC乳液平均粒徑最小，為（1 250.0±23.2）nm。經(jīng)過2 次凍融后，SLP（0）-HPMC乳液的平均粒徑大幅增大，不同功率超聲改性SLP-HPMC乳液平均粒徑也不同程度地有所增加，其中超聲功率400 W時(shí)增幅最小，說明此時(shí)乳液相對(duì)穩(wěn)定。

乳液表面電荷密度能有效反映乳滴之間的靜電相互作用。由圖1B可知，在pH 7.4 PBS中SLP（0）-HPMC乳液原始ζ電位為-11.29 mV，隨著超聲功率的增加，ζ電位絕對(duì)值呈先升高后降低趨勢(shì)。經(jīng)循環(huán)凍融后所有乳液的ζ電位絕對(duì)值均有所下降。SLP（400）-HPMC乳液原始ζ電位為-17 mV，表面電荷密度最大，結(jié)合乳液的粒徑分布和微觀結(jié)構(gòu)分析結(jié)果，表明超聲功率為400 W時(shí)乳液的凍融穩(wěn)定性最好。經(jīng)過2 次凍融后，乳液表面電荷進(jìn)一步降低，這是由于不同功率超聲處理使蛋白的柔性區(qū)域和二級(jí)結(jié)構(gòu)構(gòu)象發(fā)生改變[17]，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)構(gòu)象變化影響其與多糖分子的結(jié)合，造成乳液表面所帶電荷的不同。此外，加入的多糖（HPMC）可以吸附到蛋白層形成界面絡(luò)合物，有效地避免界面復(fù)合物降解，從而增強(qiáng)乳液的穩(wěn)定性[18]。Thanasukarn等[19]研究認(rèn)為，在凍融處理過程中乳液蛋白分子會(huì)從油滴表面解吸出來，降低蛋白的乳化效率，同時(shí)表面電荷的減少導(dǎo)致乳液冷凍處理后油滴之間斥力減弱發(fā)生聚結(jié)。

2.2 循環(huán)凍融對(duì)超聲改性SLP-HPMC乳液ESI和EAI的影響

圖 2 凍融循環(huán)前后超聲改性SLP-HPMC乳液ESI（A）和EAI（B）Fig. 2 ESI (A) and EAI (B) of sonicated SLP-HPMC emulsion before and after freeze-thaw cycles

乳化特性是衡量蛋白吸附至油-水界面能力的指標(biāo)，包括EAI和ESI[19]。EAI表示蛋白穩(wěn)定的油-水界面層上其所占據(jù)的單位質(zhì)量，ESI用于衡量乳液抵抗混亂的能力[20]。由圖2可知，與SLP（0）-HPMC乳液相比，經(jīng)0～400 W超聲處理后，乳液EAI與ESI均增大，這可能是由于超聲處理增強(qiáng)了SLP的溶解性，超聲處理后SLP結(jié)構(gòu)打開，溶解性增大的同時(shí)疏水基團(tuán)暴露，使其與HPMC之間相互作用加強(qiáng)[21]。此外，吸附至油-水界面上的SLP與HPMC形成了雙分子層保護(hù)屏障，阻止了脂肪液滴的絮凝和聚沉[22]。

經(jīng)凍融循環(huán)后EAI出現(xiàn)明顯降低，SLP（400）-HPMC乳液經(jīng)兩次凍融循環(huán)后，其EAI由580.35 m2/g降低至86.55 m2/g。這可能是由于凍融過程破壞了SLP和HPMC之間的作用力，影響了SLP-HPMC構(gòu)建的雙分子層導(dǎo)致乳液EAI急劇下降。乳液經(jīng)凍融后ESI變化無明顯規(guī)律，SLP（400）-HPMC和SLP（500）-HPMC乳液在第1次凍融處理后ESI明顯升高，但經(jīng)過第2次凍融又明顯降低，說明經(jīng)過1 次凍融循環(huán)部分乳液能保持相對(duì)較好的穩(wěn)定性，而經(jīng)過2 次凍融循環(huán)后乳液會(huì)出現(xiàn)不同程度的分層現(xiàn)象。

2.3 超聲改性SLP-HPMC乳液的激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果

由圖3可知，激光共聚焦掃描顯微鏡圖像中呈紅色熒光的核心和呈綠色熒光的外圍邊界[23-24]證明界面層有SLP-HPMC復(fù)合體系存在。未經(jīng)凍融循環(huán)時(shí)，SLP（0）-HPMC乳液的粒徑最大，乳液的穩(wěn)定性較差。SLP經(jīng)超聲處理后，SLP（200）-HPMC乳液粒徑分布較均勻，但粒徑較大，而SLP（300）-HPMC和SLP（500）-HPMC乳液出現(xiàn)明顯的聚集現(xiàn)象，僅SLP（400）-HPMC乳液分散均勻且粒徑較小，乳液最穩(wěn)定。經(jīng)1 次凍融循環(huán)后，SLP（0）-HPMC乳液的凍融穩(wěn)定性最差，出現(xiàn)明顯的水-油分離現(xiàn)象，同樣，SLP（200）-HPMC和SLP（300）-HPMC乳液也出現(xiàn)大塊聚集和水-油分離的現(xiàn)象。第2次凍融后SLP（0）-HPMC乳液乳滴出現(xiàn)成片聚集，這是由于未經(jīng)超聲處理的SLP與HPMC復(fù)合后其蛋白乳化性較差，乳液界面膜不穩(wěn)定，冷凍時(shí)形成的冰晶極易刺穿界面膜，融化時(shí)油滴之間發(fā)生聚集[25]。隨著超聲功率的增大，這種不穩(wěn)定現(xiàn)象逐漸減弱，較大功率下超聲處理的SLP形成的乳液與HPMC復(fù)合，乳液顆粒呈球形，且粒徑相對(duì)較小。SLP（400）-HPMC凍融后也發(fā)生了乳滴的部分絮凝和聚集，但粒徑增加較小。SLP（500）-HPMC乳液粒徑雖然最小，但水-油分離現(xiàn)象嚴(yán)重，已經(jīng)不再是O/W乳液。因此，超聲功率400 W時(shí)，制備的超聲改性SLP-HPMC乳液穩(wěn)定性最好。

圖 3 凍融循環(huán)前后超聲改性SLP-HPMC乳液的激光共聚焦顯微鏡圖Fig. 3 Confocal laser scanning microscopic images of sonicated SLP-HPMC emulsion before and after freeze-thaw cycles

2.4 循環(huán)凍融對(duì)超聲改性SLP-HPMC乳液乳液濁度、聚結(jié)度和出油率的影響

圖 4 循環(huán)凍融前后超聲改性SLP-HPMC乳液的濁度（A）、聚結(jié)度（B）、出油率（C）和實(shí)際外觀圖片（D）Fig. 4 Turbidity (A), aggregation degree (B), oil release rate (C) and appearance (D) of sonicated SLP-HPMC emulsion before and after freeze-thaw cycles

濁度與乳液的分散程度相關(guān)，能進(jìn)一步反映乳液的穩(wěn)定性。由圖4A可知，不同超聲功率改性SLP-HPMC初始乳液濁度類似，其中SLP（0）-HPMC乳液初始濁度為12 780.43±30.28，乳液均勻、無分層現(xiàn)象。經(jīng)凍融循環(huán)后，部分乳液乳滴裂解，油相受疏水作用驅(qū)動(dòng)重新絮凝沉降，乳液出現(xiàn)分層現(xiàn)象（圖4D），濁度明顯下降，經(jīng)2 次凍融循環(huán)后SLP（400）-HPMC乳液濁度降低至2 744.61±18.72。結(jié)果表明，凍融循環(huán)對(duì)乳液濁度影響較明顯，通過簡(jiǎn)單的混勻攪抖難以使乳液恢復(fù)其穩(wěn)定性。

經(jīng)過凍融循環(huán)后，乳液界面膜變得不穩(wěn)定，油滴之間容易聚結(jié)。乳液的凍融循環(huán)次數(shù)越多，其聚結(jié)程度越大。由于超聲處理能夠?qū)⒋蠓肿淤|(zhì)量蛋白變成分子質(zhì)量相對(duì)較小的蛋白從而改變其柔性和空間結(jié)構(gòu)[26]，更易與多糖結(jié)合形成致密的界面膜，從而有效抑制油滴聚集。由圖4B可知，經(jīng)凍融循環(huán)后，超聲改性SLP-HPMC乳液聚結(jié)度明顯低于SLP（0）-HPMC乳液。隨著超聲功率的增大，聚結(jié)度呈現(xiàn)先減小后增大的趨勢(shì)，經(jīng)過2 次凍融循環(huán)，SLP（400）-HPMC乳液聚結(jié)度仍保持最小，這可能是因?yàn)檫m度的超聲處理能暴露蛋白的疏水基團(tuán)，使其更易吸附在油滴表面抵抗冷凍對(duì)乳液穩(wěn)定性的破壞，從而增加乳液的凍融穩(wěn)定性。

由圖4C可知，SLP（0）-HPMC乳液經(jīng)2 次凍融循環(huán)后出油率由（0.3±0.2）%升高至（8.5±0.07）%，結(jié)合聚結(jié)度數(shù)據(jù)說明，此時(shí)乳液的界面膜不穩(wěn)定，在凍融過程中易發(fā)生破裂。超聲改性SLP-HPMC乳液也發(fā)生不同程度地聚集，但游離油釋放量少于SLP（0）-HPMC乳液，而且隨著超聲功率的增大，超聲改性SLP-HPMC乳液中游離油釋放量先降低后升高，這與激光共聚焦掃描觀察與粒徑分析結(jié)果一致。游離油的產(chǎn)生是由于乳液在凍融處理的過程中降低了水相中自由水的含量，乳滴不穩(wěn)定而相互靠近發(fā)生聚結(jié)，造成油脂釋放。

2.5 超聲功率對(duì)SLP二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響

圖 5 不同超聲功率下SLP的圓二色光譜圖Fig. 5 Circular dichroism spectra of SLP treated at different ultrasonic powers

表 1 不同超聲功率下SLP二級(jí)結(jié)構(gòu)的相對(duì)含量變化Table 1 Relative contents of secondary structures in SLP treated at different ultrasonic powers

圓二色光譜是一種快速、準(zhǔn)確、靈敏測(cè)定的蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)技術(shù)，可以在水溶性蛋白溶液中直接測(cè)定并計(jì)算出蛋白各類型二級(jí)結(jié)構(gòu)的相對(duì)含量[27]。不同超聲功率下SLP的圓二色光譜見圖5。由表1可知，經(jīng)不同功率超聲處理后，SLP中各二級(jí)結(jié)構(gòu)相對(duì)含量均發(fā)生明顯變化，400、500 W處理時(shí)SLP α-螺旋相對(duì)含量降低，β-折疊相對(duì)含量升高，這與前人研究結(jié)果一致，原因可能是超聲作用影響了α-螺旋結(jié)構(gòu)中的疏水性氨基酸區(qū)域，從而使蛋白分子展開改變其空間構(gòu)象[28-30]。但當(dāng)高強(qiáng)度（500 W）超聲波作用于SLP后，蛋白質(zhì)發(fā)生不溶性聚集，與HPMC間的相互作用減弱，因此α-螺旋結(jié)構(gòu)又有一定程度地增加。蛋白的結(jié)構(gòu)與其功能高度相關(guān)[28]，二級(jí)結(jié)構(gòu)的改變使得SLP-HPMC復(fù)合物更具有均勻性和柔性的特點(diǎn)，使其在油-水界面上吸附更完全，這與本實(shí)驗(yàn)中EAI分析結(jié)果一致。超聲功率為400 W時(shí)，SLP中β-折疊相對(duì)含量最高，更易于HPMC結(jié)合親水性氨基酸區(qū)域，從而形成穩(wěn)定復(fù)合物，結(jié)合物吸附在油層表面再構(gòu)成穩(wěn)定乳液，從而提高了乳液的凍融穩(wěn)定性。

3 結(jié) 論

不同超聲功率處理SLP不但可以增強(qiáng)SLP-HPMC乳液的EAI和ESI，還可以顯著提高乳液的凍融穩(wěn)定性。不同功率的超聲改性SLP-HPMC乳液具有不同的凍融穩(wěn)定性，SLP（400）-HPMC乳液經(jīng)2 次凍融循環(huán)后乳滴聚結(jié)程度和出油率最小，穩(wěn)定性較好，甚至2 次凍融循環(huán)后仍然可以觀察到明顯的O/W乳液結(jié)構(gòu)。超聲處理改變了SLP二級(jí)結(jié)構(gòu)的相對(duì)含量和柔性區(qū)間，400 W超聲處理SLP中β-折疊和β-轉(zhuǎn)角相對(duì)含量最大，β-折疊和β-轉(zhuǎn)角的松散結(jié)構(gòu)使蛋白柔性增加，結(jié)構(gòu)更易發(fā)生改變和伸展，進(jìn)而影響乳液界面復(fù)合物的穩(wěn)定性，說明乳液凍融穩(wěn)定性與乳液界面層厚度和蛋白結(jié)構(gòu)特性有關(guān)。