申修賢 黃純楊 于曉飛 商勝華 王秀琴 王小彥 劉明宏 楊茂發(fā)

摘? 要：為篩選出對食蚜癭蚊安全的生物農(nóng)藥，選用5種常用的生物農(nóng)藥對煙蚜及食蚜癭蚊幼蟲（噴霧法）和食蚜癭蚊成蟲（藥膜法）進行了毒力測定和安全性評估。結(jié)果表明，無論處理24 h還是48 h，對煙蚜毒力較高的是甲維鹽和苦參堿，LC₅₀分別為2.166和3.695 mg/L（24 h），1.567和2.874 mg/L（48 h）;對食蚜癭蚊幼蟲的毒力較高的是魚藤酮，LC₅₀為18.137 mg/L（24 h）、13.771 mg/L（48 h），對成蟲的毒力較高的是多殺菌素，LC₅₀為7.249 mg/L（24 h）、4.125 mg/L（48 h）。因此5種生物農(nóng)藥中苦參堿、甲維鹽、蘇云金桿菌對煙蚜和食蚜癭蚊的選擇性較高，適宜在田間與食蚜癭蚊聯(lián)合應用防控煙蚜。

關鍵詞：煙蚜;食蚜癭蚊;生物農(nóng)藥;毒力測定;安全性評價

Safety Evaluation and Toxicity Determination of 5 Biopesticides toMyzus persicae（Sulzer） andAphidoletes aphidimyza?（Rondani）

SHEN Xiuxian¹， HUANG Chunyang²， YU Xiaofei³， SHANG Shenghua⁴，

WANG Xiuqin¹， WANG Xiaoyan²， LIU Minghong^2*， YANG Maofa^1，3*

（1. Institute of Entomology of Guizhou University， Provincial Key Laboratory for Agricultural Pest Management of the Mountainous Regions， Guiyang 550025， China; 2. Guizhou Tobacco Company， Zunyi Branch Company， Zunyi， Guizhou 563000， China; 3. College of Tobacco Science of Guizhou University， Guiyang 550025， China; 4. Guizhou Academy of Tobacco Sciences， Guiyang 550081， China）

Abstract： To screen for biopesticides safe toAphidoletes aphidimyza（Rondani） in tobacco fields， the toxicities of five kinds of biopesticides againstMyzus persicae， as well as three instars larvae （spray method） and adults ofA. aphidimyza?were evaluated. The results showed that the highest toxicity onM. persicaewas from emamectin benzoate and matrine both at 24 h and 48 h after treatment， with LC₅₀2.166 and 3.695 mg/L （24 h）， 1.567 and 2.874 mg/L （48 h）， respectively. The highest toxicity on larva ofA. aphidimyzawas from rotenone， with LC₅₀18.137 mg/L （24 h） and 13.771 mg/L （48 h）. The highest toxicity on adults ofA. aphidimyzawas from spinosad， with LC₅₀7.249 mg/L （24 h） and 4.125 mg/L （48 h）. Therefore， matrine， emamectin benzoate andBacillus thuringgiensisin the five biological pesticides have higher selectivity toM. persicaeandA. aphidimyza， so they are suitable for the combined application of biopesticides andA. aphidimyza?in the field to controlM. persicae.

Keywords：Myzus persicae（Sulzer）;Aphidoletes aphidimyza（Rondani）; biopesticides; toxicity; safety evaluation

煙蚜Myzus persicae（Sulzer），屬半翅目，蚜科，又名桃蚜、桃赤蚜，是一種重要的刺吸類害蟲，其寄主范圍廣，可以危害茄科、十字花科、豆科等50多科400多種植物^[1]，煙蚜以群集方式刺吸植物汁液，不但造成植物的營養(yǎng)缺乏與組織破壞，嚴重時可使植物死亡^[2]，而且煙蚜及其分泌物還會導致多種植物病毒，嚴重為害農(nóng)作物^[3-4]，每年桃蚜為害帶來的經(jīng)濟損失為10%～15%，嚴重時達50%～80%^[5]。

生物農(nóng)藥和天敵昆蟲是防控煙蚜的重要措施。

利用白僵菌、青霉菌、蘇云金桿菌、阿維菌素等微生物源生物農(nóng)藥對煙蚜有很好防治效果^[6-10]，利用苦參堿、魚藤酮、印楝素、百部-川楝-苦參堿等植物源生物農(nóng)藥對煙蚜也有很好的控制作用^[11-18]。利用天敵昆蟲防治煙蚜同樣具有很好的控制效果^[19-22]，其中食蚜癭蚊Aphidoletes aphidimyza（Rondani）作為蚜蟲的捕食性天敵，其幼蟲能取食80多種蚜蟲^[23-25]，尤其對煙蚜有很好的控制作用，1頭幼蟲一生可捕食28頭小桃蚜^[26]，1頭3齡幼蟲對煙蚜最大日捕食量為10頭^[27]。在蔬菜溫室、拱棚、大棚內(nèi)以1∶20的益害比釋放食蚜癭蚊成蟲，10 d后單株煙蚜量減退80%以上^[25]。在煙田以1：15的益害比釋放2次食蚜癭蚊蛹，可以達到64%的防治效果^[28]。與其他天敵相比，食蚜癭蚊具有獨特優(yōu)點：繁殖、搜索和分散能力強;對蚜蟲不但有取食作用，而且還有殺傷作用;適宜大批量繁殖，易于貯存和運輸，便于生產(chǎn)應用等^[29-30]。

由于任何防控措施均有各自的優(yōu)點和不足，聯(lián)合防控在害蟲的防治實踐中就越來越受到重視，特別是生物農(nóng)藥與天敵昆蟲的聯(lián)合防控。但若長期不正當使用生物農(nóng)藥會降低天敵昆蟲的防治效果^[14-16]。因此本文選用常用的5種生物農(nóng)藥，測定其對煙蚜以及煙蚜的捕食性天敵食蚜癭蚊的毒力，評價其對食蚜癭蚊的安全性，以期為煙田利用食蚜癭蚊和生物農(nóng)藥聯(lián)合防控煙蚜的提供技術指導。

1? 材料與方法

1.1? 試驗材料

1.1.1? 供試昆蟲 ?在遵義市鳳岡縣煙草天敵昆蟲繁育中心，于人工氣候室中，飼養(yǎng)食蚜癭蚊、煙蚜3代以上，備用。

1.1.2? 人工氣候室? 溫度（24±0.5） ℃、光周期L∶D=16 h∶8 h、相對濕度65%±5%。

1.1.3 ?供試藥劑? 70%甲維鹽、98%魚藤、50000 Iu/mg蘇云金桿菌（中山凱中有限公司），98%苦參堿、99%多殺菌素（江蘇長青農(nóng)化股份有限公司），丙酮（分析純，汕頭市西隴化工有限公司）。

用適量的丙酮（1 g/L）將各生物農(nóng)藥原藥配成以下相應的5個濃度梯度（表1），按照該生物農(nóng)藥對煙草害蟲的田間推薦使用量計算而得。

1.2? 試驗方法

1.2.1?? 生物農(nóng)藥對煙蚜的毒力測定 ?采用噴霧法

進行測定。挑選體型一致的3～4齡無翅煙蚜，分別將不同濃度梯度的藥劑噴灑于帶蚜煙葉的正反兩面，靜置1 min;接入事先放入新鮮煙草葉片（60 mm×60 mm）的布丁盒中，煙葉下方放置濕潤的吸水紙用于保濕。每盒煙蚜蟲數(shù)為25頭，4次重復。以清水噴霧的煙蚜處理為對照，蓋上帶孔的蓋子（用昆蟲1號針均勻扎9個孔）。置于人工氣候室，分別于24 h和48 h后統(tǒng)計煙蚜的死亡數(shù)，在視頻顯微鏡下觀察，以小毛筆輕觸無任何部位活動作為死亡標準。

1.2.2? 生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊3齡幼蟲的毒力測定 ?采用噴霧法進行測定。對帶有食蚜癭蚊幼蟲的煙苗分別噴施不同濃度藥液，然后挑選體型一致的浸藥食蚜癭蚊3齡幼蟲，按照每盒25頭的標準，分別放入布丁盒內(nèi)，蓋上帶孔的蓋子（用昆蟲1號針均勻扎9個孔）。以噴施清水的相同數(shù)量食蚜癭蚊幼蟲為對照。每處理4次重復。置于人工氣候室，分別于24 h和48 h后統(tǒng)計食蚜癭蚊幼蟲的死亡數(shù)，在視頻顯微鏡下觀察，以小毛筆輕觸無任何部位活動作為死亡標準。

1.2.3?? 生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊成蟲的毒力測定 ?采用藥膜法進行測定。用小型滴管吸取足量的藥劑注入玻璃試管中，搖勻后倒出多余的藥劑，待藥劑充分形成藥膜后，挑選同一天羽化的體型一致的食蚜癭蚊成蟲10頭放入其中，每處理重復5次;空白對照為清水。并用少量10%蜂蜜水濕潤脫脂棉團封好管口，然后置于人工氣候室。分別于24 h和48 h后統(tǒng)計食蚜癭蚊成蟲的死亡數(shù)，日光照射下輕敲試管不動即判定食蚜癭蚊死亡。

1.3? 數(shù)據(jù)分析

1.3.1 ?毒力回歸方程? 試驗數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010統(tǒng)計，使用SPSS 24.0軟件擬合毒力回歸方程，計算5種生物農(nóng)藥對煙蚜及食蚜癭蚊的LC₅₀值。煙葉生產(chǎn)中常用苦參堿來防治煙蚜，故以苦參堿對食蚜癭蚊的LC₅₀值為參考標準，相對毒力指數(shù)為1。

相對毒力指數(shù)=測試藥劑LC₅₀/苦參堿LC₅₀值。

1.3.2 ?安全性評價? 以各種生物農(nóng)藥的田間推薦使用有效濃度與食蚜癭蚊致死中濃度LC₅₀相比，求得安全系數(shù)^[31]，安全系數(shù)（t）=天敵的LC₅₀/田間推薦使用有效濃度。t≤0.05為極高風險性生物農(nóng)藥;0.05<t≤0.5為高風險性生物農(nóng)藥;0.5<t≤5為中等風險性生物農(nóng)藥;t>5為低風險性生物農(nóng)藥。

以毒性選擇指數(shù)評價各生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊的安全性^[32]。毒性選擇指數(shù)（STR）為生物農(nóng)藥對天敵的致死中濃度（LC₅₀）與對害蟲的致死中濃度（LC₅₀）的比值，即：毒性選擇指數(shù)（STR）=天敵的LC₅₀/害蟲的LC₅₀。毒性選擇指數(shù)的值STR≤1時，則表明該生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊的毒性比煙蚜更高，屬于非選擇性農(nóng)藥;毒性選擇指數(shù)的值STR>1時，則表明該生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊的毒性比煙蚜更低，屬于選擇性農(nóng)藥。

2? 結(jié)? 果

2.1 ?5種生物農(nóng)藥對煙蚜的毒力

5種生物農(nóng)藥對煙蚜的毒力測定結(jié)果如表2所示。當浸藥24 h時，對煙蚜毒力大小次序為：甲維鹽>苦參堿>蘇云金桿菌>多殺菌素>魚藤酮，其中甲維鹽對煙蚜的毒力最高，LC₅₀為2.166 mg/L，魚藤酮對煙蚜的毒力最低，LC₅₀為21.541 mg/L，其相對毒力指數(shù)是甲維鹽的9.947倍。48 h時，對煙蚜毒力大小次序與24 h相同，其中甲維鹽對煙蚜的毒力最高，LC₅₀為1.567 mg/L，魚藤酮對煙蚜的毒力最低，LC₅₀為15.131 mg/L。較24 h相比，甲維鹽毒力上升了27.65%，魚藤酮毒力上升了29.76%。5種生物農(nóng)藥隨著時間的延長對煙蚜的毒力都有一定程度的增強。

2.2? 5種生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊幼蟲的毒力

結(jié)果如表3所示。當浸藥24 h時，所選藥劑對食蚜癭蚊幼蟲的毒力大小次序為：魚藤酮>多殺菌素>苦參堿>蘇云金桿菌>甲維鹽，敏感性水平依次減弱。其中魚藤酮對食蚜癭蚊幼蟲的毒力最高，LC₅₀為18.137 mg/L，相對毒力指數(shù)最小為0.900;甲維鹽對食蚜癭蚊幼蟲的相對毒力指數(shù)最大為1.093，對應的LC₅₀為22.014 mg/L。48 h時，對食蚜癭蚊幼蟲毒力大小次序：多殺菌素>魚藤酮>苦參堿>蘇云金桿菌>甲維鹽。其中多殺菌素對食蚜癭蚊幼蟲的毒力超過了魚藤酮，即多殺菌素對食蚜癭蚊幼蟲的毒力最高，LC₅₀為13.606 mg/L，甲維鹽對食蚜癭蚊幼蟲的毒力最低，LC₅₀為15.975 mg/L。隨著時間的增加，食蚜癭蚊幼蟲對5種生物農(nóng)藥的敏感性均增加。

2.3? 5種生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊成蟲的毒力測定

如表4所示。處理時間不同，食蚜癭蚊成蟲對生物農(nóng)藥的敏感性不相同。處理24 h時，食蚜癭蚊成蟲對5種生物農(nóng)藥的敏感性依次為：多殺菌素>魚藤酮>甲維鹽>蘇云金桿菌>苦參堿。毒性最大的為多殺菌素，其LC₅₀為7.249 mg/L。最低的是苦參堿，LC₅₀為14.408 mg/L。處理 48 h 時，甲維鹽對食蚜癭蚊成蟲的毒力超過了魚藤酮，較24 h相比，甲維鹽毒力上升了49.32%。隨著時間的增加，5種生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊成蟲的毒性均有增加。

2.4? 5種生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊幼蟲和成蟲的安全性評價

從5種生物農(nóng)藥有效田間濃度對食蚜癭蚊的安全系數(shù)來看（表5、6），蘇云金桿菌和甲維鹽對食蚜癭蚊幼蟲安全性最高，安全系數(shù)分別為2.766～4.149和7.862～10.483（24 h）、2.215～3.190和5.705～7.607（48 h）;對癭蚊成蟲安全性較高的是甲維鹽、苦參堿，分別為1.470～2.450和4.099～5.466（24 h）、1.118～1.864和2.078～2.270（48 h）。從5種生物農(nóng)藥有效田間濃度對食蚜癭蚊的毒性選擇指數(shù)來看（表5、6），苦參堿、甲維鹽對食蚜癭蚊幼蟲選擇性毒力指數(shù)較高，分別為5.452、10.163（24 h）和5.412、10.195（48 h）;24 h時，苦參堿、甲維鹽對食蚜癭蚊成蟲的選擇性毒力指數(shù)較高，分別為3.889、5.299（24 h）;48 h時，對食蚜癭蚊成蟲的選擇性毒力指數(shù)較高的是苦參堿、蘇云金桿菌，分別為3.814、2.272（48 h）。

結(jié)合安全系數(shù)和毒性選擇指數(shù)的結(jié)果表明，甲維鹽、苦參堿、蘇云金桿菌對食蚜癭蚊安全。

3? 討? 論

苦參堿和魚藤酮屬于植物源生物農(nóng)藥，主要用于防治蚜蟲和鱗翅目害蟲^[33-34]。多殺菌素、甲維鹽和蘇云金桿菌屬于農(nóng)用抗生素類生物農(nóng)藥，主要用于防治鱗翅目害蟲^[35]。煙田主要以煙蚜、小地老虎、煙青蟲和斜紋夜蛾等為主要害蟲^[36]，當噴施低毒、高效的生物農(nóng)藥防治煙田主要害蟲時，是否會對煙蚜的天敵食蚜癭蚊造成影響，目前少有報道。本試驗結(jié)果表明，苦參堿、魚藤酮、多殺菌素、甲維鹽、蘇云金桿菌5種生物農(nóng)藥對食蚜癭蚊的幼蟲和成蟲LC₅₀差異明顯，24 h時，魚藤酮對食蚜癭蚊幼蟲的殺傷力最大，相對毒力指數(shù)為0.900，這與尹園園等^[37]研究結(jié)果一致;多殺菌素對成蟲的毒性最大。有研究報道多殺菌素對小菜蛾的天敵菜蛾絨繭蜂有很強的毒性^[38]。蘇云金桿菌對煙蚜的防治效果不好，而報道蘇云金桿菌對小菜蛾有很好的防治^[39]，這可能是不同類型的動物解毒機制不同，從而導致結(jié)果不同。但是無論是防治煙蚜還是防治小菜蛾，蘇云金桿菌對天敵昆蟲都是相對安全的，本研究結(jié)果也是。

由安全性系數(shù)可知，苦參堿、蘇云金桿菌安全系數(shù)為5>t>0.5是中等風險，甲維鹽的安全系數(shù)>5是低等風險，對食蚜癭蚊影響較小。有研究報道苦參堿對蚜蟲有很好的防治效果，對天敵昆蟲也很安全^{[20-21，37]}。也有研究報道甲維鹽對花椒棉蚜有很好的防治效果^[40]，對異色瓢蟲的幼蟲、巴氏新小綏螨相對安全^[41]。伍紹龍等^[42]研究發(fā)現(xiàn)，甲維鹽對煙青蟲和斜紋夜蛾有很好的防治效果，但是對天敵蜘蛛、草蛉、隱翅蟲有抑制作用。與本研究結(jié)果不同，這可能是不同天敵對藥劑的敏感性不同。

本研究表明，5種生物農(nóng)藥對煙蚜毒力差異不同，無論24 h還是48 h，甲維鹽和苦參堿對煙蚜的毒力相對較高，食蚜癭蚊成蟲對多殺菌素最敏感，幼蟲對魚藤酮最敏感。本試驗只考慮了食蚜癭蚊成蟲或高齡幼蟲，生物農(nóng)藥對其卵、蛹、低齡幼蟲的毒性大小以及后代種群的影響還需進一步研究。

4? 結(jié)? 論

通過測定5種生物農(nóng)藥對煙蚜和食蚜癭蚊的毒力，評價了它們對食蚜癭蚊的安全性。結(jié)果表明，苦參堿、甲維鹽和蘇云金桿菌對食蚜癭蚊幼蟲和成蟲安全系數(shù)較高，屬于中等至低風險，且對煙蚜和食蚜癭蚊的選擇性較高，在田間可與食蚜癭蚊聯(lián)合應用防控煙蚜。

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