潘璐，劉艷秋，陸清，周吉會(huì)

（江西省婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心，南昌330006）

14q31.2q32.33 微重復(fù)綜合征屬于罕見(jiàn)的染色體微重復(fù)綜合征，該重復(fù)片段22.95Mb，因此可表現(xiàn)為染色體的常見(jiàn)臨床表型，如智力障礙、先天畸形、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩及異常面容等,我們 診斷1 例，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 臨床資料

孕婦,30 歲，G2P1A1，曾生育一正常男孩，本次妊娠因孕24+2 周在江西省婦幼保健院行常規(guī)四維超聲篩查提示胎兒羊水指數(shù)251cm、 臍動(dòng)脈一根、球拍狀胎盤(pán)。 夫妻非近親婚配，體格及智力發(fā)育正常。 此次自然受孕，孕期無(wú)毒物及藥物等不良接觸史。 夫妻倆來(lái)我科優(yōu)生遺傳門診進(jìn)行遺傳咨詢，建議產(chǎn)前診斷進(jìn)行遺傳學(xué)分析，孕28 周時(shí)在簽署知情同意書(shū)后行介入性產(chǎn)前診斷-臍帶血穿刺術(shù)， 抽取臍帶血3ml 行胎兒染色體核型分析及胎兒染色體微陣列檢測(cè) （均由本院產(chǎn)前診斷中心實(shí)驗(yàn)室完成）。常規(guī)方法制備染色體G 顯帶標(biāo)本行染色體核型分析，核型結(jié)果為46，XN（圖1），并采用Affymetrix Cytoscan 750K （美國(guó)Affymetrix 公司） 芯片， 其包含約75 萬(wàn)個(gè)探針位點(diǎn)。 按照Affymetrix 公司提供的標(biāo)準(zhǔn)化流程對(duì)胎兒臍血DNA 進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)酶切、連接、PCR 擴(kuò)增、片段化、標(biāo)記、芯片雜交、洗染、包埋等處理，由Affymetrix@Chromosome Analysis Suite 2.0(ChAS 2.0)軟件對(duì)芯片進(jìn)行數(shù)據(jù)掃描和分析， 檢索UCSC、DECIPHER、DGV、ISCA 及OMIM 等數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)芯片實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行進(jìn)一步的比對(duì)及致病性分析。 芯片分析結(jié)果提示胎兒14 號(hào)染色體q31.2q32.33 存在22.95Mb 的重復(fù)（圖2），在當(dāng)前收錄的數(shù)據(jù)庫(kù)DGV 未覆蓋，包含126 個(gè)OMIM 基因，變異分類屬于致病性變異，胎兒父母行染色體微陣列檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)該致病性變異。 臨床遺傳咨詢充分告知孕婦及其家屬的可能預(yù)后，孕婦最終選擇終止妊娠。

圖1 胎兒G 顯帶染色體核型分析

圖2 胎兒染色體微陣列分析結(jié)果框內(nèi)為14q31.2q32.33 重復(fù)區(qū)域

2 討論

14q31.2q32.33 微重復(fù)綜合征屬于罕見(jiàn)的染色體微重復(fù)綜合征，該重復(fù)片段22.95Mb，因此可表現(xiàn)為染色體的常見(jiàn)臨床表型，如智力障礙、先天畸形、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩及異常面容等。 本例胎兒彩超表型為羊水過(guò)多、單臍動(dòng)脈，羊水過(guò)多目前原因比較復(fù)雜，但與染色體異常、胎兒畸形如消化道畸形、額面部畸形、神經(jīng)管缺陷有關(guān)系，另外羊水過(guò)多與妊娠期糖尿病有關(guān)，但該孕婦行OGTT 試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)血糖異常。 正常胎兒臍帶含有2 條臍動(dòng)脈和1 條臍靜脈，單臍動(dòng)脈是指臍帶結(jié)構(gòu)發(fā)生變異，只存在1條臍動(dòng)脈，在約65%的受累胎兒中，單臍動(dòng)脈是一個(gè)單獨(dú)存在的表現(xiàn)， 其余受累胎兒會(huì)伴發(fā)結(jié)構(gòu)性和/或染色體異常、子宮內(nèi)生長(zhǎng)受限，結(jié)構(gòu)性異常通常累及多個(gè)器官[1,2]，最常受累的為心臟、胃腸道及中樞神經(jīng)系統(tǒng)[3,4]。

14q31.2q32.33 微重復(fù)片段包含多個(gè)基因，有學(xué)者研究了其中的部分基因與疾病的關(guān)系， 取得很大進(jìn)展。位于14q31.2q32.33 的Galc 基因與鼻咽癌發(fā)生有相關(guān)性，它是一種管家基因[5]，Galc 轉(zhuǎn)錄后出核膜，在細(xì)胞質(zhì)中翻譯成GALC，又稱為半乳糖（基）神經(jīng)酰胺酶。 研究發(fā)現(xiàn)，GALC 具有抑制凋亡抑制作用， 其在細(xì)胞內(nèi)蓄積可以促使細(xì)胞粘附減少，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移并延長(zhǎng)壽命， 進(jìn)而導(dǎo)致鼻咽癌形成， 因此14q31.2q32.33的微重復(fù)，導(dǎo)致單倍計(jì)量增加，罹患鼻咽癌的風(fēng)險(xiǎn)增加。 位于14q31.3 的SPATA7 基因，包含12 個(gè)外顯子，編碼一個(gè)由599 個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)。 研究顯示SPATA7 基因在人體組織中廣泛表達(dá)，尤其是在視網(wǎng)膜、睪丸中高表達(dá)[6]，因此該基因功能改變導(dǎo)致視網(wǎng)膜的相關(guān)疾病如先天性的黑曚（LAC），2009 年Rui Chen 報(bào)道SPATA7 是LAC 致病基因家族的一個(gè)成員，SPATA7 突變可導(dǎo)致LCA 和視網(wǎng)膜色素變性（RP）兩種不同的視網(wǎng)膜病變[7]，其主要臨床表型特點(diǎn)為早期發(fā)生嚴(yán)重的視網(wǎng)膜萎縮和視功[6]。 另外針對(duì)睪丸組織生精細(xì)胞中SPATA7 蛋白的研究提示SPATA7 可能在細(xì)胞減數(shù)分裂前期參與核染色質(zhì)的準(zhǔn)備[8]，因此SPATA7 基因的過(guò)度表達(dá)可導(dǎo)致生殖功能異常。 Carlucci 等研究發(fā)現(xiàn)位于14q32.2 的PTPN21 基因在膀胱癌組織中過(guò)表達(dá)， 并且參與膀胱癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移過(guò)程，PTPN21 的表達(dá)水平與膀胱癌的分級(jí)和侵襲潛能成正相關(guān)[9]。 另一項(xiàng)PTPN21 基因高表達(dá)的報(bào)道是在胃非霍奇金B(yǎng) 細(xì)胞淋巴瘤研究中， 該研究發(fā)現(xiàn)PTPN21 基因增強(qiáng)STAT5 活性的作用[10]。 因此當(dāng)PTPN21 基因重復(fù)或者過(guò)度表達(dá)引起磷酸酶活性的增強(qiáng)， 可能會(huì)增加膀胱癌及非霍奇金B(yǎng) 細(xì)胞淋巴瘤患病風(fēng)險(xiǎn)。

染色體微陣列分析技術(shù)是一種全新的分子核型分析技術(shù)，能夠檢出100kb 以下的CNVs（拷貝數(shù)變異），除了能檢出非整倍體異常，還能檢測(cè)染色體核型分析無(wú)法發(fā)現(xiàn)的低水平CNVs、雜合性缺失等拷貝數(shù)正常的染色體異常， 進(jìn)一步檢測(cè)出染色體微缺失或者微重復(fù)所涉及的基因、 發(fā)生位置及片段大小[11,12]。研究指出，通過(guò)染色體微陣列分析技術(shù)檢測(cè)，先天性多發(fā)畸形、認(rèn)知障礙性疾病、孤獨(dú)癥患兒的病因檢出率提高15%-20%[13]。 該技術(shù)已經(jīng)成為臨床上行產(chǎn)前診斷的一線檢測(cè)方法[14]，特別是針對(duì)胎兒彩超異常、 超聲發(fā)現(xiàn)有軟指標(biāo)異常時(shí)。 常規(guī)G 顯帶技術(shù)檢出的異常率為15%-40%，對(duì)于染色體微缺失、 微重復(fù)漏診率高達(dá)60%-85%[15]。那么染色體微陣列分析技術(shù)（CMA）就是一個(gè)很好的完善和補(bǔ)充， 它可以在整個(gè)基因組水平上進(jìn)行拷貝數(shù)分析，具有高分辨率、高通量、高敏感性、快速準(zhǔn)確、易于自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。 隨著彩超醫(yī)生技術(shù)水平地不斷提升， 越來(lái)越多的胎兒異常在宮內(nèi)被發(fā)現(xiàn)， 關(guān)于染色體微陣列技術(shù)在超聲檢查提示異常胎兒的應(yīng)用越來(lái)越多， 極大提高了超聲檢查提示異常胎兒中檢測(cè)染色體微缺失或者微重復(fù)綜合征水平[16]。因此染色體微陣列分析技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的地位顯得越來(lái)越重要， 由此避免了因染色體異常導(dǎo)致的嚴(yán)重缺陷的胎兒出生， 避免了給家庭帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)及心理負(fù)擔(dān)， 這也是出生缺陷防控策略的二級(jí)預(yù)防措施。 該胎兒在14 號(hào)染色體q31.2q32.33 存在22.95Mb 重復(fù)， 其父母染色體微陣列檢測(cè)未見(jiàn)異常，為新發(fā)突變，因此若該夫婦再生育，患染色體異常風(fēng)險(xiǎn)不增加，但仍建議行產(chǎn)前診斷。