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        淺議如何檢測食品中的大腸桿菌

        2020-03-19 08:46:49王澤美
        健康必讀·下旬刊 2020年2期
        關(guān)鍵詞:檢測

        王澤美

        【中圖分類號】R311.52【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-3783(2020)02-03--01

        如今,社會在飛速的發(fā)展,人們的生活水平越來越高,人們開始越來越重視日常的食品安全問題。但就目前情況來看,越來越多的食品問題開始出現(xiàn)在大眾眼前,為人們的日常生活帶來了很大的困擾。綜合食品發(fā)生的安全事故來看,主要的影響因素之一就是大腸桿菌,其屬于食品污染程度的一項(xiàng)極為重要的參考指標(biāo),那么如何才能能夠更加準(zhǔn)確、快速的將食品是否被大腸桿菌污染檢測出來已經(jīng)成為目前社會各界都在關(guān)心的問題。

        大腸桿菌指的是一種革蘭氏陰性短桿菌,其無芽孢、兩端鈍圓、能運(yùn)動,是動物以及人腸道中最鮮為人知的細(xì)菌,在所有的腸道菌中大腸桿菌約占1%。雖然大腸桿菌在正常的條件下并不會致病,而且能合成維生素K和B,但是大腸桿菌一旦進(jìn)入到人體中的膀胱、膽囊等處,就很可能會引發(fā)炎癥。在實(shí)際的檢測中,一旦在食品、水中檢測出含有大腸桿菌,即可被認(rèn)為是被糞便所污染的指標(biāo)。不僅如此,對于大腸桿菌來說,其還常被作為藥物、食物、飲水中衛(wèi)生學(xué)的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。由于食品安全信息與大腸桿菌息息相關(guān),因此在食品監(jiān)管中有效檢測大腸桿菌非常重要。那么在食品檢測中,如何對大腸桿菌進(jìn)行檢測呢?

        一、檢測食品中大腸桿菌的現(xiàn)狀

        在檢測食品中是否含有大腸桿菌時,主要的方式包括分離、生化試驗(yàn)以及增菌三種,傳統(tǒng)用于檢測食品中大腸桿菌的方式有很多,例如平板計數(shù)法、濾膜法以及多管發(fā)酵法等等[1]。雖然多管發(fā)酵法相對來說具有明顯的運(yùn)營成本低的優(yōu)勢,但具有檢測時間長的缺點(diǎn),一旦檢測時間過長還會影響結(jié)果的準(zhǔn)確程度;相對多管發(fā)酵法來說,濾膜法操作更為簡單,但如果在檢測渾濁度較高或者細(xì)菌密度較大的水樣時存在一定局限性;而平板計數(shù)法所需要的硬件設(shè)備以及成本都相對較低。綜合來看,傳統(tǒng)的三種檢測方式都存在不同程度的靈敏度低、程度較繁瑣、檢測周期較長等缺點(diǎn),越來越無法滿足如今對于食品安全檢測的需要。在如今時代的需求下,不斷探索并創(chuàng)新檢測技術(shù)非常有必要。如今檢測大腸桿菌的最新技術(shù)包括:高效液相色譜技術(shù)、氣象色譜技術(shù)、基因芯片技術(shù)以及酶聯(lián)免疫分析技術(shù)四種。

        二、關(guān)于檢測食品中大腸桿菌的新方法

        (一)采用高效液相色譜技術(shù)

        該技術(shù)主要利用的是離子配對反向?qū)游龅脑?,從而對大腸桿菌的核酸進(jìn)行分析,即通過相關(guān)技術(shù)對大腸桿菌的DNA片段進(jìn)行相關(guān)的技術(shù)分析。實(shí)際上,DNA鏈的長與短與其攜帶的磷酸基團(tuán)是成正比關(guān)系的,如此一來如果DNA鏈較長就會相對延長在柱內(nèi)停留的時間,反之亦然[2]。由于乙腈具有一定的親水性,因此如果增加其濃度就可以使其與DNA進(jìn)行分離,再通過一定的變性溫度,吸收峰就能夠在圖譜中明顯的顯示出來。高效液相色譜技術(shù)具有成本較低、靈敏度較高、準(zhǔn)確率較高的特點(diǎn),因此能夠提升食品檢測大腸桿菌的工作效率以及工作準(zhǔn)確度。

        (二)采用氣象色譜技術(shù)

        將大腸桿菌先進(jìn)行相關(guān)的衍生化處理之后,將處理后的大腸桿菌作為氣相色譜儀,詳盡的判斷其化學(xué)組份基礎(chǔ),由此完成對大腸桿菌進(jìn)行研究和判斷,其為氣相色譜法的基本原理和測量思路。氣相色譜法的優(yōu)勢在于:能夠?qū)κ称分写竽c桿菌的污染程度進(jìn)行相應(yīng)的檢測,主要是通過食品密封系統(tǒng)頂部的微生物作為該技術(shù)運(yùn)作的基本原理,由于微生物的發(fā)揮和代謝會產(chǎn)生二氧化碳,因此將其作為鑒定和分析的基礎(chǔ)。與傳統(tǒng)的三種檢測技術(shù)相比,氣相色譜法具有顯著的靈敏度較高而且檢測速度較快的優(yōu)勢。

        (三)采用基因芯片技術(shù)

        該技術(shù)也叫做DNA微陣列,除了能夠用于對大腸桿菌進(jìn)行檢測之外,也能夠檢測其他不同環(huán)境下的各種微生物。該技術(shù)的基本原理為:通過PCR將樣品的DNA進(jìn)行擴(kuò)增,之后再對其配置熒光標(biāo)記探針,將探針在支持物表面上進(jìn)行固化,再將芯片上的寡核苷酸點(diǎn)與所培養(yǎng)出的二維DNA探針陣列進(jìn)行雜交,通過對雜交信號進(jìn)行檢測來確定所檢測樣品中是否存在檢測的特定微生物。該過程所檢測出的結(jié)果也就是判斷檢測樣品中大腸桿菌數(shù)量的依據(jù)[3]?;蛐酒夹g(shù)具有非常顯著的敏感性高、操作簡單快捷、技術(shù)自動化以及特異性強(qiáng)大等優(yōu)勢,但同時也存在一定的局限性,由于其所需的設(shè)備以及儀器費(fèi)用較高,所以所需的運(yùn)營成本較高,此外在檢測時在基因進(jìn)行擴(kuò)增的過程中還容易受到污染,因此會影響最終的檢測結(jié)果。再者,由于該技術(shù)對于操作人員的專業(yè)要求很高,因此需要操作的技術(shù)人員具有較高素質(zhì)和較高的技術(shù)水平。

        (四)酶聯(lián)免疫分析技術(shù)

        該技術(shù)是將抗原或抗體與某種固相載體的表面進(jìn)行結(jié)合后來進(jìn)行測定,但前提為在不破壞抗體或抗原的免疫活性的基礎(chǔ)上。所檢測的樣品需要根據(jù)固定的程序使其與固相載體表面的抗體、抗原相結(jié)合,通過產(chǎn)生一系列的化學(xué)反應(yīng),即可生成復(fù)合物的抗原或抗體。在整個化學(xué)反應(yīng)完全結(jié)束之后,需要使用清洗劑將反應(yīng)液以外的其他物質(zhì)進(jìn)行徹底清除,最后在其中加入適量的酶反應(yīng)底物,這時由于酶的催化作用會在固相載體上產(chǎn)生一些變色的產(chǎn)物,最后即可根據(jù)該有色物的量,來確定被檢測的樣品中檢測物的含量。通過加入酶的方式能夠有效提高催化效率,從而有效提升檢測的效率和靈敏度。

        總結(jié):

        總之,隨著如今科學(xué)的進(jìn)步和社會的不斷發(fā)展,人們越來越重視日常生活質(zhì)量水平。為了能夠保證日常食品的安全性,需要選擇更加高效且準(zhǔn)確的測量方式對食品 進(jìn)行檢測和監(jiān)管。作為常見的微生物之一,大腸桿菌也是一個非常重要的載體,因此在如今的食品安全檢測中,對大腸桿菌的檢測效率和檢測質(zhì)量的要求也就越來越高。只有不斷的創(chuàng)新并探索相關(guān)的檢測技術(shù),才能夠有效解決食品安全問題,更好的服務(wù)于大眾。

        參考文獻(xiàn):

        江禮華,王國勝,丁寧, 等.食品微生物能力驗(yàn)證試驗(yàn)中大腸桿菌O157∶H7的檢測[J].現(xiàn)代測量與實(shí)驗(yàn)室管理,2017,25(6):38-39,21.

        付夢玉,吳云,林麗萍, 等.非預(yù)增菌可視化快速檢測食品中腸毒素大腸桿菌K88的研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2017,39(3):587-593.

        陳娟,史輝,余博旸, 等.成都市武侯區(qū)動物性食品源大腸桿菌耐藥表型的檢測與分析[J].西南民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2016,42(3):268-273.

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