陽麗紅，王宏海，周小敏，馬永鈞，王 杰，沈 清,,*

（1.浙江工商大學(xué)海洋食品研究院，浙江 杭州 310012；2.浙江省水產(chǎn)品加工技術(shù)研究聯(lián)合重點實驗室，浙江 杭州 310012；3.浙江興業(yè)集團有限公司，浙江 舟山 316101）

金槍魚（Thunnus albacares），又稱吞拿魚，是一種重要的世界經(jīng)濟魚類，具有高蛋白和低脂肪的特點。金槍魚營養(yǎng)豐富，氨基酸組成接近人體氨基酸需要量模式，且富含n-3多不飽和脂肪酸、礦物質(zhì)元素和多種維生素等營養(yǎng)成分[1-2]。金槍魚骨作為金槍魚生魚片和魚罐頭加工業(yè)的主要副產(chǎn)物之一，通常與內(nèi)臟等其他下腳料一起被廢棄，經(jīng)濟效益低下[3-4]。魚骨中鈣含量十分豐富，高達20%～30%，可以作為一種天然的優(yōu)質(zhì)鈣源[5]。魚骨中鈣磷比例符合人體需求，對魚骨中鈣的加工利用，不僅可以滿足人們的生理需要，還體現(xiàn)了對食品多樣化的需求。魚骨回收后可簡單制成魚骨粉飼料[6]，或作為添加輔料加入到魚糜制品改善凝膠特性[7]，作為鈣強化劑加入雞精和玉米粥等[8]強化蛋白質(zhì)吸收，也可經(jīng)深加工制成補鈣制劑，如活性鈣[9-10]、多肽螯合鈣[11-12]、檸檬酸-蘋果酸活性鈣等[13]，可大大提高利用價值，創(chuàng)造可觀的經(jīng)濟效益。

骨鈣粉粒徑越小，其孔隙率和比表面積就越大，表面吸附力、溶解性和分散性等性質(zhì)就越好[14-15]。常規(guī)制備微型骨粉的方法主要為機械粉碎法，其具有環(huán)境友好、效率高、成本低、操作簡便等優(yōu)點，具體包括高能球磨、高速氣流粉碎等技術(shù)手段。范露等[16]以鰱魚骨頭為原料，利用干法球磨法制得了平均粒徑為9.3 μm的超微魚骨粉，李少博等[17]利用響應(yīng)面法優(yōu)化了干法球磨法工藝，并制備得到平均粒徑為502 nm的納米級兔骨粉。

微波作為一種電磁輻射能，其熱效應(yīng)在工業(yè)上的應(yīng)用也得到了迅速的發(fā)展[18]。通過向物質(zhì)內(nèi)部輻射微波電磁場，推動其偶極子運動，使之相互碰撞、摩擦而生熱，使物質(zhì)在熱應(yīng)力作用下產(chǎn)生裂紋，可以改善物質(zhì)的易磨性，起到輔助粉碎效果。微波在食品科學(xué)與工程領(lǐng)域顯示出較大的發(fā)展?jié)摿?，劉揚帆[19]利用微波熱解制備出顆粒尺寸約為50 nm的納米ZrO2粉體，其比傳統(tǒng)方法制備的粉體粒徑更小，耗時更短，分散性更好且無明顯團聚現(xiàn)象。王曉雙等[20]利用微波法制備紫薯生全粉并對其加工特性進行了研究，結(jié)果表明微波輔助可提高紫薯生全粉的持水性、持油性及凝膠特性。然而，目前采用微波加熱輔助制備魚骨粉微粒的相關(guān)研究鮮見報道。本實驗以金槍魚加工副產(chǎn)物魚骨為原料，采用響應(yīng)面分析法對微波條件進行優(yōu)化，探討不同樣品質(zhì)量、微波功率、微波時間對魚骨粉的影響，結(jié)合表征方法和動物實驗進行分析，對最佳微波條件下金槍魚骨粉進行生物利用度評價，旨在闡明微波對魚骨粉制備的影響及其生物功能性，為金槍魚加工副產(chǎn)物的資源化利用提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

金槍魚骨 浙江興業(yè)集團有限公司；C57BL/6小鼠48 只 浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院；胰蛋白酶（250 U/mg）、中性蛋白酶（200 U/mg） 國藥集團化學(xué)試劑有限公司；超純水（電阻率18.2 MΩgcm）由Milli-Q純水系統(tǒng)制得；其他化學(xué)試劑均購于國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

微波爐 廣東美的微波電器制造有限公司；粉碎機天津市泰斯特儀器有限公司；PHSJ-4a型pH計 上海雷磁儀器廠；SUPRA 55 Sapphire場發(fā)射掃描電子顯微鏡（scanning electron microscope，SEM） 德國卡爾蔡司公司；Mastersizer 3600激光粒度儀 英國馬爾文公司。

1.3 方法

1.3.1 基本營養(yǎng)成分

水分參照GB 5009.3ü2016《食品中水分的測定》中的直接干燥法進行測定；粗蛋白質(zhì)參照GB 5009.5ü2016《食品中蛋白質(zhì)的測定》中的凱氏定氮法測定；脂肪參照GB 5009.6ü2016《食品中脂肪的測定》中的索氏抽提法測定；灰分參照GB 5009.4ü2016《食品中灰分的測定》中的灼燒稱重法進行測定。

1.3.2 礦物質(zhì)元素分析

魚骨粉中的鈣、銅、鎂和鋅含量參照GB/T 13885ü 2017《飼料中鈣、銅、鐵、鎂、錳、鉀、鈉和鋅含量的測定》用原子吸收光譜法測定；磷含量參照GB 5009.87ü2016《食品中磷的測定》中的分光光度法進行測定；鎘含量參照GB/T 13082ü1991《飼料中鎘的測定方法》中的原子吸收光譜法測定；鉛含量參照GB/T 13080ü2018《飼料中鉛的測定》中的原子吸收光譜法測定。

1.3.3 微波條件單因素試驗

采用單因素輪換法，依次考察魚骨樣品質(zhì)量（60、80、100、120、140 g）、微波功率（400、600 、800、1 000、1 200 W）、微波時間（30、60、90、120、150 min）3因素對金槍魚骨粉粒徑的影響。魚骨粉的粒度采用激光粒度分布儀測定，魚骨粉的平均粒徑采用中位粒徑（D50）表示，平行實驗3 次，確定最佳微波條件。

1.3.4 響應(yīng)面優(yōu)化試驗

在單因素試驗分析的基礎(chǔ)上，采用3因素3水平Box-Behnken響應(yīng)面試驗設(shè)計法，以樣品質(zhì)量（A）、微波功率（B）和微波時間（C）為考察因素，并以魚骨粉的粒徑為評價指標，優(yōu)化微波加熱的工藝條件。

1.3.5 金槍魚骨粉的制備

稱取定量的金槍魚骨沸水浴燙漂3 min后用自來水沖洗去除表面雜質(zhì)，高壓120 ℃蒸煮魚骨20 min。按料液比1∶1（g/mL）將魚骨與蒸餾水混合，將pH值調(diào)至7.5，加質(zhì)量分數(shù)0.5%胰蛋白酶與0.5%中性蛋白酶（以魚骨質(zhì)量計）在55 ℃酶解1 h，得到潔凈鱈魚骨后煮沸10 min滅酶。滅酶后的魚骨進行直接干燥處理或進行微波加熱處理，再用粉碎機粉碎。

1.3.6 金槍魚骨鈣粉特性檢測

1.3.6.1 粒徑分析

采用激光粒度分布儀測定，結(jié)果采用Mastersizer 3000軟件分析。魚骨粉的平均粒徑采用中位粒徑（D50）表示。

1.3.6.2 SEM表征

魚骨粉均勻地鋪撒到固定在鋁制樣品臺的絕緣膠上，在真空狀態(tài)下用離子濺射儀噴金，使其表面帶電，用SEM在加速電壓為10 kV的條件下觀察魚骨粉的表面形貌。

1.3.7 生物利用度

1.3.7.1 動物實驗

依據(jù)GB 14924ü2001《實驗動物大鼠小鼠配合飼料》，配制不同含鈣源飼料喂養(yǎng)小鼠。48 只健康小鼠隨機分成4 組，每組8 只，雌雄各半。單只飼養(yǎng)在聚乙烯塑料盒內(nèi)，每日投放飼料6.5 g，自由進食，飲用去離子水。實驗期28 d，逐日記錄進食量，實驗期后3 d進行代謝實驗，收集糞尿，測定飼料鈣、糞鈣和尿鈣，計算鈣的表觀吸收率及儲留率。剝離小鼠股骨，剔除肌肉和筋膜后稱質(zhì)量，游標卡尺測其長度和寬度，同時測定骨鈣含量。

1.3.7.2 飼料配方

A組飼料為基礎(chǔ)飼料配方，具體如下：玉米淀粉50%、酪蛋白18%、麥麩10%、蔗糖8%、大豆油4%、纖維素1%、礦物元素混合物0.4%、賴氨酸0.3%、酒石酸氫膽堿0.2%、維生素混合物0.1%，水分適量。GB 14924ü 2001標準中規(guī)定小鼠飼料中鈣含量為1.0%～1.8%，故設(shè)定標準對照組飼料鈣含量為1.6%，低劑量對照組為0.3%。B組飼料為基礎(chǔ)飼料配方+1.6%普通金槍魚骨鈣粉。C組飼料為基礎(chǔ)飼料配方+1.6%微波金槍魚骨鈣粉。D組飼料為基礎(chǔ)飼料配方+1.6%碳酸鈣。

1.3.7.3 鈣含量和吸收率、儲留率的測定

飼料、糞便、尿液和股骨中鈣含量的測定均采用GB/T 5009.92ü2016《食品中鈣的測定》方法。計算鈣的表觀吸收率及儲留率如式（1）、（2）所示：

式中：X1為代謝期間小鼠鈣攝入量；X2為糞便中鈣含量；X3為尿液中鈣含量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

每個樣品平行測定3 次，統(tǒng)計值以fs形式表示，采用SPSS V17.0進行差異顯著性分析，使用Design-Expert 8.05進行響應(yīng)面試驗設(shè)計與分析，并用Microsoft Word、Origin 7.5及Excel進行圖表繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 基本成分

金槍魚骨中基本成分見表1。金槍魚骨中水分質(zhì)量分數(shù)最高，達到了61.3%。粗蛋白質(zhì)含量豐富，占總質(zhì)量的16.1%，顯著高于鰱魚（8.9%）等其他魚類骨質(zhì)[21]；脂質(zhì)含量較低，僅為1.12%。此外，金槍魚骨中灰分含量也較高，表明鈣、磷等礦物質(zhì)元素較多。因此，利用金槍魚的魚骨資源開發(fā)骨鈣粉具備較好的原料基礎(chǔ)。

表1 金槍魚骨基本成分的質(zhì)量分數(shù)Table 1 Nutrient composition of tuna bone%

2.2 微波加熱工藝優(yōu)化單因素試驗結(jié)果

2.2.1 樣品質(zhì)量對金槍魚骨粉粒徑的影響

圖1 樣品質(zhì)量對金槍魚骨粉粒徑的影響Fig. 1 Effect of sample amount on the particle size of fi shbone powder

由圖1可見，樣品質(zhì)量在60～140 g范圍內(nèi)，金槍魚骨粉粒徑隨著樣品質(zhì)量的增加先降低后升高，在樣品質(zhì)量為120 g時，魚骨粉粒徑值最低。當樣品質(zhì)量較小時，粉碎機刀片對金槍魚骨樣品擊打不均勻。相反，在保持微波場強一定下，過量魚骨樣品導(dǎo)致平均微波輻照量稀釋，進而影響魚骨粉粒徑。

2.2.2 微波功率對金槍魚骨粉粒徑的影響

由圖2可見，微波功率在400～1 200 W范圍內(nèi)，金槍魚骨粉粒徑呈現(xiàn)先減小后增大的趨勢，在微波功率為800 W時，魚骨粉粒徑最低。根據(jù)微波干燥原理，魚骨中的水分子吸收微波能量，分子間的碰撞和摩擦產(chǎn)生了大量熱量，使魚骨粉內(nèi)部水分迅速蒸發(fā)[22]。同時微波向金槍魚骨粉內(nèi)部輻射電磁場，使魚骨粉在熱應(yīng)力作用下產(chǎn)生裂紋，改善了魚骨粉的易磨性，起到了輔助粉碎的效果。隨著微波功率的增加，魚骨粉纖維結(jié)構(gòu)明顯，魚骨粉的分散性得到了提高，有利于形成小尺寸的微米顆粒。功率超過800 W時，可能是因為功率過高發(fā)生了焦糊現(xiàn)象，魚骨粉的易磨性降低，不利于形成粒徑小的顆粒。

圖2 微波功率對金槍魚骨粉粒徑的影響Fig. 2 Effect of microwave power on the particle size of fi shbone powder

2.2.3 微波時間對金槍魚骨粉粒徑的影響

圖3 微波時間對金槍魚骨粉粒徑的影響Fig. 3 Effect of microwave irradiation time on the particle size of fi shbone powder

由圖3可知，微波時間在30～150 min范圍內(nèi)，金槍魚骨粉粒徑隨著微波時間的延長先減小后增大，在微波時間為90 min時，魚骨粉粒徑達到最低。隨著微波輻射時間的增加，魚骨的分解率增加，魚骨粉的粒徑逐漸減小，大小均勻。微波熱處理時間大于90 min時，魚骨粉的粒徑增大。微波時間對魚骨粉粒徑的影響機理可能與高強混凝土高溫爆裂機理類似，即由于加熱時間過長，魚骨粉顆粒升溫趨于一致，熱應(yīng)力被分散釋放，有利于裂紋擴展的水分被蒸發(fā)導(dǎo)致魚骨粉的易磨性降低[23]。

2.3 礦物元素分析

金槍魚骨富含多種礦物元素，將普通魚骨粉和微波魚骨粉進行原子吸收光譜檢測，結(jié)果見表2。經(jīng)過微波處理后，金槍魚骨粉中的鈣、磷含量有所提高，鈣元素從183.5 mg/g增加到192.3 mg/g，磷的含量從144.1 mg/g增加到149.8 mg/g，鎂、鋅和銅的含量也有所增加。由此推測，微波處理通過降低魚骨粉的粒徑促進其與生物酶之間的水解反應(yīng)，進而減少蛋白質(zhì)、骨膠原等雜質(zhì)，提高礦物元素的相對含量。

表2 微波處理金槍魚骨粉與普通金槍魚骨粉礦物質(zhì)成分對比Table 2 Comparison of mineral components between microwave processed tuna bone fl our and common tuna bone fl our mg/g

2.4 響應(yīng)面優(yōu)化微波條件2.4.1 響應(yīng)面試驗設(shè)計

在單因素試驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，選取樣品質(zhì)量、微波功率、微波時間為變量因素，采用Design-Expert 8.0.6軟件中的Box-Behnken試驗設(shè)計原理進行優(yōu)化設(shè)計[24]。每個變量因子均設(shè)有3 個水平，每個水平間設(shè)置為等距。響應(yīng)面試驗設(shè)置為允許條件下最少的組合，即17 個試驗；響應(yīng)值即魚骨粉粒徑。試驗因素水平設(shè)計及結(jié)果見表3。

表3 響應(yīng)面試驗設(shè)計與結(jié)果Table 3 Box-Behnken design with experimental results for response surface analysis

2.4.2 回歸方程和顯著性

利用Design-Expert 8.06軟件對試驗結(jié)果進行多元回歸擬合，得到二次多項回歸模型方程y=16.61-1.25A+1.17B+0.24C-55.03AB-27.35AC-27.61BC+46.39A2+48.45B2+62.52C2。對該模型進行方差分析，結(jié)果如表4所示，回歸方程模型P值為0.000 1，表明該方程擬合度較好。失擬項P值為0.081 6，表明失擬項不顯著，方程與實際擬合中非正常誤差所占比例小，模型不失擬，選擇合理。該模型的相關(guān)系數(shù)R2為0.999 7，表明魚骨粉粒徑的實驗值與預(yù)測值間有很好的一致性。綜上該模型擬合程度較好，誤差較小，因此可用此模型對微波處理制備金槍魚骨粉的工藝條件進行分析和預(yù)測。根據(jù)回歸方程一次項系數(shù)絕對值的大小，可知影響金槍魚骨粉粒徑效果的主次因素為A（樣品質(zhì)量）＞B（微波功率）＞C（微波時間）[25]。模型的一次項A、B、C對結(jié)果影響均不顯著（P＞0.05）；二次項A2、B2、C2對結(jié)果影響均極顯著（P＜0.01）；交叉項AB、AC、BC對結(jié)果影響均極顯著（P＜0.01）。

表4 回歸方程參數(shù)方差分析Table 4 Analysis of variance of quadratic polynomial regression equation

2.4.3 微波加熱工藝優(yōu)化響應(yīng)面分析

為了進一步研究3 個因素之間的交互作用以及確定最優(yōu)點，通過Design-Expert軟件繪制響應(yīng)面圖。由圖4可見，微波功率、樣品質(zhì)量和微波時間的交互作用對金槍魚骨粉微波加熱效果的影響均出現(xiàn)拋物面型關(guān)系，且所得到的響應(yīng)面圖都開口向上，即都存在一個極小值點，其中微波功率和樣品質(zhì)量、微波時間和樣品質(zhì)量、微波時間和微波功率的交互作用等高線均呈橢圓形，對結(jié)果影響顯著（P＜0.05）。

圖4a響應(yīng)面坡度較陡，等高線成橢圓形，說明樣品質(zhì)量和微波功率均對金槍魚骨粉粒徑影響顯著，兩因素交互作用顯著（P＜0.05）。固定微波時間為90 min，隨著樣品質(zhì)量和微波功率的增加，魚骨粉粒徑呈現(xiàn)先減少后增大的趨勢，樣品質(zhì)量軸向等高線更為密集，說明樣品質(zhì)量對魚骨粉粒徑的影響比較顯著，響應(yīng)面圖開口向上，表明在實驗所選范圍內(nèi)存在極小值，在微波功率800 W、樣品質(zhì)量120 g附近值時為最佳水平范圍。由圖4b可知，在微波時間60～120 min、樣品質(zhì)量100～140 g范圍內(nèi)，魚骨粉粒徑先減少后增大，在微波時間90 min、樣品質(zhì)量120 g附近值為對金槍魚骨粉粒徑有重要影響，且等高線呈橢圓形，說明兩因素之間交互作用顯著（P＜0.05）。如圖4c所示，響應(yīng)面坡度較陡，等高線成橢圓形，說明微波時間和微波功率均對金槍魚骨粉粒徑影響顯著，兩因素交互作用顯著。固定樣品質(zhì)量為120 g，隨著微波時間和微波功率的增加，魚骨粉粒徑呈現(xiàn)先減少后增大的趨勢，微波功率軸向等高線更為密集，說明微波功率對魚骨粉粒徑的影響比較顯著，結(jié)合表3，得出結(jié)論：金槍魚骨粉粒徑對微波功率的變化比時間的變化敏感，兩因素具有一定的交互作用，且交互作用顯著（P＜0.05）。響應(yīng)面圖開口向上，表明在實驗所選范圍內(nèi)存在極小值，在微波功率800 W、時間90 min附近值為最佳水平。

經(jīng)過響應(yīng)面優(yōu)化，根據(jù)所建立的數(shù)學(xué)模型進行參數(shù)最優(yōu)分析，得到預(yù)測最佳工藝條件為樣品質(zhì)量120.15 g、微波功率798.37 W、微波時間89.94 min，此時魚骨粉粒徑可達到16.602 μm?？紤]到實際操作條件，將工藝條件修正為樣品質(zhì)量120 g、微波功率800 W、微波時間90 min，此條件下魚骨粉粒徑為16.627 μm，與預(yù)測值接近。

圖4 樣品質(zhì)量、微波功率和微波時間的交互作用對金槍魚骨粉粒徑影響的響應(yīng)面圖和等高線圖Fig. 4 Response surface and contour plots showing the interactive effects of sample amount, microwave powder and irradiation time on the particle size of fi shbone fl our

2.5 粒徑分析

圖5 微波金槍魚骨粉和普通魚骨粉的粒徑分布圖Fig. 5 Particle size distribution of microwave processed and common fi shbone powder

魚骨粉的粒徑是決定其特性的關(guān)鍵因素，降低粒徑可顯著提高魚骨粉的生物利用率[26-27]。如圖5所示，直接干燥處理的粗魚骨粉的平均粒徑為285.169 μm，其粒度分布范圍較廣，分散性差，顆粒團聚嚴重，與SEM的觀察結(jié)果一致，最佳微波條件處理后的魚骨粉平均粒徑為16.627 μm，分散性較好。微波加熱降低了魚骨粉的顆粒大小，且粒度分布范圍變窄，更加均勻，體現(xiàn)了微波在材料領(lǐng)域輔助粉碎的作用。

2.6 SEM表征

從圖6可以看出，微波處理后的魚骨粉的表面結(jié)構(gòu)與原魚骨粉呈現(xiàn)明顯不同。其中粗魚骨粉（圖6A）表面和整體形態(tài)比較完整，僅有部分表面發(fā)生破裂，經(jīng)微波加熱處理后魚骨粉（圖6B）整體形態(tài)不再保持完整性，成為疏松的海綿狀結(jié)構(gòu)，并且在魚骨粉疏松的表面出現(xiàn)微孔。這與Boutinguiza等[28]報道的采用600 ℃高溫預(yù)處理和干法球磨方法制備的納米魚骨粉的平均粒徑和外觀形貌相似。這說明在微波加熱過程中，骨粉顆粒在熱應(yīng)力的作用下產(chǎn)生了縫隙，起到了促進粉碎效果。

圖6 普通魚骨粉（A）和微波金槍魚骨粉（B）的SEM圖Fig. 6 SEM micrographs of common (A) and microwave processed (B)fi shbone fl our

2.7 微波魚骨鈣粉的生物利用度

采用相同成分和含量、僅鈣劑來源不同的人工合成飼料飼喂小鼠，喂養(yǎng)28 d，不同來源的鈣劑對小鼠鈣代謝的結(jié)果見表5。鈣制劑在小腸和腎中的吸收機制包括主動和被動兩種運輸方式，鈣元素在進入小腸中一部分被吸收利用[29]。因此，鈣吸收率、鈣儲留率能反映鈣在小鼠體內(nèi)表觀的情況。由表5可看出，低鈣對照A組的鈣吸收率、儲留率均顯著高于其他組（P＜0.05），但實際吸收量較其他組低，說明吸收率與小鼠所需要的鈣量有關(guān)，由于缺鈣小鼠對鈣的吸收效果增加，這與張文靜等[30]的研究結(jié)果一致。喂養(yǎng)普通金槍魚骨粉的B組和微波魚骨粉的C組在吸收率、儲留率上顯著高于喂養(yǎng)碳酸鈣的D組（P＜0.05），這表明魚骨粉中的有機鈣比以碳酸鈣為代表的無機鈣吸收率高，同時微波魚骨粉C組中的鈣吸收率和鈣儲留率又顯著高于普通魚骨粉B組（P＜0.05），這表明微波金槍魚骨鈣粉生物效價高于碳酸鈣和普通魚骨粉。

表5 小鼠鈣代謝測定結(jié)果Table 5 Calcium metabolism profiles of mice after consuming fi shbone fl ours

鈣離子經(jīng)小腸吸收后，主要在骨組織中形成羥基磷灰石晶體，構(gòu)成骨骼的基本結(jié)構(gòu)[31]。骨骼生長的重要指標是股骨的長勢，可通過股重、股長、股鈣等看出。由表6可看出，喂養(yǎng)微波魚骨粉的C組無論是左側(cè)股骨長度、質(zhì)量、鈣含量或者股骨指數(shù)和強度上其平均值均高于喂養(yǎng)普通魚骨粉的B組和喂養(yǎng)碳酸鈣的D組，以及低鈣對照組A組的股骨數(shù)據(jù)。通過顯著性分析，攝入魚骨粉的小鼠其鈣含量高于碳酸鈣D組和低鈣對照A組（P＜0.05），表明魚骨粉中的鈣具有良好的沉積作用，有利于骨密度的增加，缺鈣可導(dǎo)致小鼠骨鈣化不良，3 種鈣源都可以預(yù)防這些缺陷。喂食微波魚骨粉C組的小鼠的鈣含量和股骨強度的平均值高于普通魚骨粉B組，但統(tǒng)計學(xué)差異并不顯著（P＞0.05），可能由于在鈣缺乏時身體的生長受到限制；而在充足鈣源下這一限制被消除，所以在實驗組中骨鈣增長的差異不大[32]。

表6 小鼠攝入不同鈣制劑對股骨的影響Table 6 Effects of different calcium preparations on femur parameters in mice

3 結(jié) 論

金槍魚骨作為金槍魚生魚片和魚罐頭加工業(yè)的主要副產(chǎn)物之一，通常與內(nèi)臟等其他下腳料一起被廢棄。本研究利用微波輔助法優(yōu)化樣品質(zhì)量、微波功率和時間等魚骨粉制備條件，通過單因素和響應(yīng)面試驗得到的最優(yōu)條件下魚骨粉的平均粒度為16.627 μm。經(jīng)表征觀察到經(jīng)微波處理后魚骨粉的表面形成的微孔和疏松結(jié)構(gòu)。實驗表明，攝食微波魚骨粉組小鼠鈣吸收率和鈣儲留率高于其他組，生物利用率優(yōu)于相同鈣含量的普通魚骨粉以及碳酸鈣。綜上所述，金槍魚骨是一種優(yōu)良的天然鈣源，通過微波技術(shù)制備的魚骨鈣粉可作為良好的膳食鈣補充劑添加到食品中，本研究可為魚骨類廢棄物的綜合利用提供理論依據(jù)和參考。