江妹，岳文濤

作者單位：100026北京，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室

卵巢癌是一種嚴(yán)重威脅女性生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤，已成為全球范圍內(nèi)女性癌癥相關(guān)死亡的主要原因之一[1]。其具有惡性程度高、侵襲性強(qiáng)、病情進(jìn)展快、早期出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)。盡管近年在手術(shù)治療、化療及靶向治療方面取得了顯著的進(jìn)展，但由于大部分患者確診時(shí)處于卵巢癌晚期，治療效果不佳，患者的5年生存率僅為40%左右[2]。表觀遺傳修飾在不改變DNA序列的前提下，通過調(diào)節(jié)DNA甲基化、DNA去甲基化、組蛋白修飾及染色質(zhì)重塑等調(diào)控重要基因的表達(dá)水平?，F(xiàn)有研究表明，表觀遺傳修飾在卵巢癌的發(fā)展中發(fā)揮重要的作用[3]。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶Zeste同源蛋白2增強(qiáng)子（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）是多梳基因（polycomb group genes，PcG）蛋白家族的重要成員之一，在PcG基因家族中發(fā)揮著核心作用。研究者圍繞EZH2這一表觀遺傳修飾關(guān)鍵因子開展大量研究，發(fā)現(xiàn)其在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，其可能成為腫瘤臨床診療的新靶點(diǎn)。本文對(duì)EZH2在卵巢癌相關(guān)研究中的進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 EZH2的結(jié)構(gòu)與功能

作為轉(zhuǎn)錄抑制因子，PcG蛋白家族直接參與細(xì)胞增殖、分化、發(fā)育及干細(xì)胞自我更新過程的基因表達(dá)調(diào)控，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用。PcG蛋白構(gòu)成不同的多梳抑制復(fù)合體（polycomb repressive complex，PRC）蛋白質(zhì)復(fù)合物發(fā)揮功能，主要包括PRC1和PRC2。EZH2是PcG蛋白家族重要的成員之一[4]，是組成PRC2蛋白復(fù)合物的一個(gè)催化亞基，具有組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性。EZH2與DNA甲基轉(zhuǎn)移酶發(fā)生相互作用，參與組蛋白去乙?；高^程，可以影響組蛋白H3的27位賴氨酸（H3K27）甲基轉(zhuǎn)移酶活性。因此，PRC2復(fù)合物通過EZH2基因的SET結(jié)構(gòu)域?qū)诵◇wH3K27進(jìn)行甲基化修飾，進(jìn)而導(dǎo)致PCR1復(fù)合物在特定基因位點(diǎn)聚集從而使下游靶基因沉默，在細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期及細(xì)胞分化等重要生物學(xué)過程中發(fā)揮重要的作用[5-6]。研究表明，相對(duì)于正常組織，EZH2在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、胃癌等多種腫瘤組織中高表達(dá)，并可以明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖并參與腫瘤的轉(zhuǎn)移。EZH2的高表達(dá)與患者的不良預(yù)后密切相關(guān)[7-8]。此外，有研究發(fā)現(xiàn)EZH2蛋白的表達(dá)水平與腫瘤化療耐藥及放療的敏感性有關(guān)[9-10]。

2 EZH2在卵巢癌中的表達(dá)及功能研究

2.1 EZH2在卵巢上皮性癌中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制研究 卵巢上皮性癌（epithelial ovarian cancer，EOC）是卵巢腫瘤中最多的一種類型，其中惡性上皮性腫瘤約占卵巢惡性腫瘤的90%。Lu等[11]檢測了180例EOC組織中EZH2蛋白的表達(dá)，其中在66%的病例組織中EZH2蛋白高表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤的分期及分化程度密切相關(guān)，EZH2蛋白表達(dá)水平越高的患者預(yù)后越差。Li等[12]采用免疫組織化學(xué)（免疫組化）的方法檢測了134例EOC組織中EZH2蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)相對(duì)于46例正常卵巢組織，EZH2在EOC組織中顯著高表達(dá)。Yi等[13]檢測了組織芯片中82例EOC組織中EZH2的表達(dá)，同樣證實(shí)在EOC患者中EZH2蛋白顯著高表達(dá)，生存分析顯示相對(duì)于EZH2低表達(dá)的患者，EZH2高表達(dá)的患者總生存率及無病進(jìn)展生存率更低。因此，現(xiàn)有的研究顯示EZH2在EOC組織中高表達(dá)，EZH2蛋白表達(dá)水平越高的患者預(yù)后越差，提示EZH2在EOC的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要的作用。Lu等[14]以EOC細(xì)胞為模型，體外實(shí)驗(yàn)研究表明抑制EZH2的表達(dá)可上調(diào)細(xì)胞周期凋亡基因p16的表達(dá)，進(jìn)而抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖及遷移能力；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究亦證實(shí)EZH2的表達(dá)下調(diào)顯著抑制了卵巢腫瘤的形成。?ze?s等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在EOC細(xì)胞中蛋白激酶A將EZH2基因T372位磷酸化，進(jìn)而在體外抑制EOC細(xì)胞的增殖和遷移能力，同時(shí)降低了卵巢癌移植瘤的體內(nèi)生長。另有研究證實(shí)，在卵巢透明細(xì)胞癌中EZH2調(diào)控另一種組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶WHSC1的表達(dá)，進(jìn)而影響卵巢癌細(xì)胞的增殖及侵襲能力[16]。

2.2 EZH2在卵巢非上皮性癌中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制研究 盡管絕大多數(shù)關(guān)于EZH2的作用研究已經(jīng)在EOC中進(jìn)行，但最近的一些研究開始探討其在卵巢非上皮性癌中的作用，包括顆粒細(xì)胞癌（granulosa cell tumor，GCT）和高鈣型卵巢小細(xì)胞癌（small cell carcinoma of the ovary-hypercalcemic type，SCCOHT）。Xu等[17]檢測了30例GCT組織樣本及30例濾泡囊腫組織作為對(duì)照樣本，發(fā)現(xiàn)在GCT患者樣本中EZH2高表達(dá)以及下游相關(guān)基因啟動(dòng)子高甲基化；在30例GCT樣本中有11例樣本EZH2蛋白高表達(dá)，而在對(duì)照樣本中EZH2蛋白不表達(dá)。SCCOHT是一種罕見但惡性程度極高的腫瘤，主要影響年輕女性，90%以上SCCOHT病例中發(fā)現(xiàn)SMARCA4基因突變。Wang等[18]研究發(fā)現(xiàn)EZH2是SCCOHT的一個(gè)潛在治療靶點(diǎn)，SMARCA4的缺失可能通過表觀遺傳重排造成SCCOHT對(duì)EZH2的依賴性；該研究證實(shí)EZH2在SCCOHT腫瘤樣本及SCCOHT細(xì)胞系中過表達(dá)，體內(nèi)外研究顯示EZH2抑制劑EPZ-6438顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)SCCOHT細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯及細(xì)胞凋亡。Chan-Penebre等[19]研究同樣證實(shí)SMARCA4缺陷的SCCOHT表現(xiàn)出對(duì)PRC2的依賴性。在EZH2抑制劑Tazemetostat的Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，2例SCCOHT患者接受了8周的治療后1例患者病情穩(wěn)定，另1例患者部分緩解[20]。這些研究結(jié)果突出了在SCCOHT患者中使用EZH2抑制劑的顯著臨床益處。綜上，EZH2在卵巢癌中高表達(dá)并通過表觀遺傳調(diào)控促進(jìn)卵巢癌的發(fā)生與發(fā)展，因此EZH2可能作為卵巢癌診斷、預(yù)后及治療的新靶點(diǎn)。

3 EZH2與長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在卵巢癌中的作用

近年研究證實(shí)在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展中l(wèi)ncRNA與EZH2密切相關(guān)。lncRNA參與了許多重要的生物學(xué)過程，在細(xì)胞分化、發(fā)育及疾病發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[21]。lncRNA的異常表達(dá)已在多種類型的腫瘤中發(fā)現(xiàn)。Liu等[22]采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測58例EOC和30例正常卵巢組織中l(wèi)ncRNACACS15的表達(dá)水平，結(jié)果顯示在卵巢癌組織中CACS15表達(dá)顯著上調(diào)，其表達(dá)水平高的卵巢癌患者總生存率低于CACS15水平低的患者。該研究亦證實(shí)CACS15與EZH2之間相互作用，在卵巢癌細(xì)胞中通過基因敲除降低CACS15水平后，EZH2及H3K27me3的表達(dá)水平明顯下降。Wang等[23]發(fā)現(xiàn)LINC00702在卵巢癌組織和細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，LINC00702表達(dá)水平越高患者的預(yù)后越差；同時(shí)研究證實(shí)LINC00702通過與EZH2相互作用抑制了腫瘤抑制基因Kruppel樣轉(zhuǎn)錄因子2（KLF2）的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)卵巢癌的進(jìn)展。因此，EZH2可能與多種lncRNA相互作用，調(diào)控卵巢癌的增殖與轉(zhuǎn)移，進(jìn)而影響卵巢癌患者的預(yù)后。

4 EZH2與染色質(zhì)重塑分子富含AT結(jié)合域1A(AT-rich interaction domain 1A，ARID1A)在卵巢癌中的作用

ARID1A是染色質(zhì)重塑復(fù)合物SWI/SNF的非催化亞基之一，在多種類型的惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)ARID1A的突變，其中在卵巢透明細(xì)胞癌（ovarian clear cell carcinoma，OCCC）和子宮內(nèi)膜癌中的突變頻率最高[24]。Wiegand等[25]在46%的OCCC和30%的卵巢子宮內(nèi)膜癌中發(fā)現(xiàn)ARID1A突變。近年研究發(fā)現(xiàn)，EZH2和ARID1A在靶基因調(diào)控中的相互拮抗作用使靶向EZH2的治療成為潛在的治療策略，在ARID1A突變型腫瘤細(xì)胞中抑制EZH2的表達(dá)可顯著促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的死亡[26-28]。Fukumoto等[29]研究發(fā)現(xiàn)在ARID1A缺失的OCCC細(xì)胞中組蛋白脫乙酰基酶2（histone deacetylases 2，HDAC2）和 EZH2相互作用。HDAC2可作為EZH2的共阻遏物，以抑制EZH2/ARID1A目標(biāo)腫瘤抑制基因（如PIK3IP1）的表達(dá)，從而抑制細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。在ARID1A突變的卵巢癌細(xì)胞中，HDAC2抑制劑與EZH2抑制劑均可顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。因此，同時(shí)抑制HDAC2和EZH2活性有利于防止對(duì)單獨(dú)HDAC2或EZH2的抑制產(chǎn)生耐藥性。

5 EZH2在卵巢癌耐藥中的作用

近年雖然在手術(shù)治療、化療及靶向治療方面取得了顯著的進(jìn)展，但卵巢癌仍是婦科腫瘤中死亡率最高的癌癥。目前，卵巢癌的一線化療方案為鉑類藥物聯(lián)合紫杉醇。雖然患者在初次治療后效果比較明顯，但是約80%的患者在2年內(nèi)復(fù)發(fā)。術(shù)后復(fù)發(fā)和多藥耐藥性的產(chǎn)生仍是卵巢癌治療失敗的主要原因[30]。因此，探討卵巢癌耐藥發(fā)生的機(jī)制并開發(fā)新的藥物克服多藥耐藥以提高卵巢癌患者的預(yù)后至關(guān)重要。研究表明，EZH2蛋白的表達(dá)水平與腫瘤的化療耐藥及對(duì)放療的敏感性密切相關(guān)[31]。?ze?s等[32]研究發(fā)現(xiàn)lncRNA HOX轉(zhuǎn)錄本反義RNA（HOX transcript antisense RNA，HOTAIR）在順鉑耐藥的EOC細(xì)胞株中高表達(dá)，并證實(shí)HOTAIR與EZH2相互作用；利用多肽核酸阻斷它們之間的相互作用可增強(qiáng)耐藥細(xì)胞株對(duì)順鉑的藥物敏感性，并降低腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。Sun等[33]利用免疫組化的方法檢測了84例卵巢癌患者EZH2蛋白的表達(dá)水平，結(jié)果表明EZH2水平較高的患者對(duì)順鉑的反應(yīng)較差；同時(shí)在順鉑耐藥細(xì)胞模型構(gòu)建的過程中發(fā)現(xiàn)EZH2蛋白表達(dá)水平逐漸增加；抑制EZH2的表達(dá)水平顯著提高了耐藥細(xì)胞對(duì)順鉑的攝取量，進(jìn)而增強(qiáng)了耐藥細(xì)胞株對(duì)順鉑的藥物敏感性。因此，抑制EZH2的表達(dá)在預(yù)防卵巢癌患者耐藥促進(jìn)臨床療效上具有重要的作用。

6 結(jié)語

綜上所述，EZH2作為表觀遺傳修飾因子與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)?，F(xiàn)有的研究已表明EZH2在卵巢癌中高表達(dá)，其表達(dá)水平與患者的預(yù)后及對(duì)化療的敏感性有關(guān)。因此，EZH2可能是卵巢癌臨床診療的新靶點(diǎn)。雖然研究顯示基于EZH2的治療可能成為臨床治療的潛在靶點(diǎn)，但目前尚無臨床可用的靶向藥。靶向EZH2的藥物仍處在臨床前或臨床試驗(yàn)研究階段，需開發(fā)特異性強(qiáng)、毒副作用小的抑制劑作用于EZH2蛋白高表達(dá)的卵巢癌，這對(duì)卵巢癌的診療具有很好的應(yīng)用前景。