王軼峰 祁軍 趙小潔 張齊明 朱興業(yè) 王娟

蘭州蘭生血液制品有限公司，甘肅 蘭州730046

人血白蛋白是一種大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用的血液制品，最早從人血漿中提取得到，是經(jīng)分離純化健康人血漿后，巴氏消毒法滅活病毒制成。臨床上主要應(yīng)用于多種原因造成的低蛋白血癥、肝硬化或腎病引起的腹水或水腫、失血?jiǎng)?chuàng)傷或燒傷引起的休克以及成人呼吸窘迫綜合征等，一般采用靜脈滴注以及推注的方式［1］。對(duì)于健康人，95%鋁與血管內(nèi)轉(zhuǎn)鐵蛋白和白蛋白結(jié)合后，從腎臟排除，但在某些病理狀態(tài)下，會(huì)造成鋁在人體內(nèi)的滯留。鋁相關(guān)疾病的主要特征是由于在類骨質(zhì)礦化位鋁過度沉積造成有缺陷的礦位和骨質(zhì)軟化［1］。Al3+是一種對(duì)機(jī)體有害的金屬離子，可能具有引發(fā)骨軟化病，低血色素性貧血，老年性癡呆和慢性腎功能損害的潛在危險(xiǎn)性，引起國際血液制品界的高度重視。因此2005年版《中國藥典》首次對(duì)人血白蛋白中鋁殘留量做出了限量要求，即不得超過200μg/L，并在之后的2010版和2015版中延續(xù)了該要求［2-3］。已有不少研究者作過研究，相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道也比較多［4］，在新版《中國藥典》三部（2020版）［5］中在原有原子吸收分光光度法檢測(cè)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步通過增加電感耦合等離子體質(zhì)譜法加強(qiáng)對(duì)人血白蛋白制劑中鋁元素的分析，彌補(bǔ)原有方法的不足。并提出盡量減少環(huán)境中帶入鋁污染。為了保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠、精密，在測(cè)量過程中需要注意實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的影響。控制實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)測(cè)量過程造成的影響，有利于保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠、精密。由于鋁大量存在于周圍環(huán)境中，所以應(yīng)保持干凈無塵、凈化的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，盡可能降低實(shí)驗(yàn)環(huán)境對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。本文考察實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)人血白蛋白鋁殘留量檢測(cè)結(jié)果的影響，為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料 人血白蛋白鋁殘留量參考品為蘭州蘭生血液制品有限公司自行制備，批號(hào)20170516，聚四氟乙烯材質(zhì)離心管分裝，-20℃凍存；PE AA 900T原子吸收光譜儀購自美國珀金埃爾默公司；鋁單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)院。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 原子吸收分光光度法。按照原子吸收分光光度法測(cè)定，選擇鋁燈并打開（測(cè)定波長自動(dòng)設(shè)定為309.3nm，狹縫0.7nm），預(yù)熱大約30分鐘。在此期間，檢查石墨管，石墨管應(yīng)完好、無破損、內(nèi)壁無麻點(diǎn)。若不符合，更換新的石墨管。檢查完畢，調(diào)整進(jìn)樣針的位置。選擇優(yōu)化好的干燥、灰化、原子化和清除等爐溫控制程序，爐溫控制程序根據(jù)儀器性能調(diào)整為表1。分別量取適量空白對(duì)照溶液，供試品溶液和標(biāo)準(zhǔn)鋁加供試品的混合溶液于進(jìn)樣杯，取20μL測(cè)定，讀數(shù)。

表1 PE900T工作爐溫控制程序

1.2.2 計(jì)算公式 供試品鋁含量（μg/L）=20×（S0-B）×12.5/（S-S0），B為空白對(duì)照溶液的讀數(shù)；S0為供試品溶液的讀數(shù)；S為標(biāo)準(zhǔn)鋁加供試品的混合溶液的讀數(shù)；20為標(biāo)準(zhǔn)鋁加供試品混合溶液中標(biāo)準(zhǔn)鋁的含量（μg/L）；12.5為供試品稀釋倍數(shù)。

1.3 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境改造 原子吸收光譜儀實(shí)驗(yàn)室改造前窗框?yàn)橥评郊雍袼茕撾p層保溫材質(zhì)，為開放環(huán)境，窗口可開啟，日常情況下能滿足防噪音，保暖和基本的防塵的要求，排風(fēng)系統(tǒng)使用無調(diào)節(jié)功能的大功率電機(jī)，試驗(yàn)中外界空氣持續(xù)沿窗縫門縫吸入室內(nèi)循環(huán)后，再通過排風(fēng)扇排出室外，房間氣流壓力為負(fù)壓狀態(tài)；原子吸收光譜儀實(shí)驗(yàn)室改造后窗戶為封閉不可開啟，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)接入初效通風(fēng)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)中房間氣流壓力為正壓。

1.4 考察方法 分別對(duì)實(shí)驗(yàn)室改造前和后同一批號(hào)的人血白蛋白鋁殘留量參考品分別檢定20次，分析改造前后的檢測(cè)結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPPSS統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)Mean±SD表示，兩組數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)室改造前后鋁殘留量檢測(cè)結(jié)果 改造前后鋁殘留量記錄如表2。

表2 實(shí)驗(yàn)室改造前后鋁殘留量檢測(cè)結(jié)果記錄表（μg/L）

圖1 實(shí)驗(yàn)室改造前后20份人血白蛋白樣品鋁殘留量對(duì)比圖

2.2 實(shí)驗(yàn)室改造前后鋁殘留量檢測(cè)結(jié)果分析 實(shí)驗(yàn)室改造后鋁殘留量低于改造前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)（P<0.01）。見表3。

表3 實(shí)驗(yàn)室改造前后鋁殘留量比較（Mean±SD，n=20）

3 討論

鋁元素作為地殼中含量最豐富的金屬元素，廣泛分布于自然界土壤，塵埃顆粒中，在普通開放原子吸收光譜儀試驗(yàn)室環(huán)境中，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中大量塵埃粒子對(duì)人血白蛋白鋁殘留量檢測(cè)結(jié)果有顯著性影響。本文通過對(duì)原子吸收光譜儀實(shí)驗(yàn)室改造前后鋁殘留量的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比分析，實(shí)驗(yàn)室改造前鋁殘留量平均值為54.60μg/L，實(shí)驗(yàn)室改造后鋁殘留量平均值為39.21μg/L，結(jié)果顯示，改造后鋁殘留量明顯低于改造前（P<0.05）。因此控制原子吸收光譜儀試驗(yàn)室或電感耦合等離子體質(zhì)譜儀實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性具有重要意義。

本研究只探討原子吸收分光光度計(jì)所在的實(shí)驗(yàn)室改造前后檢測(cè)的同一批質(zhì)控品的鋁殘留量情況，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾波動(dòng)范圍符合法規(guī)對(duì)方法學(xué)的要求，對(duì)所檢測(cè)樣品的結(jié)果的誤差均在可控范圍內(nèi)。對(duì)于實(shí)驗(yàn)過程中其他影響因素，比如石墨管的型號(hào)和批次間差異等其他影響因素對(duì)鋁殘留量檢測(cè)數(shù)據(jù)的影響還有待進(jìn)一步研究。