馬亞松 李敏 賈玉捷 孫燕 楊宏碩(華北制藥河北華民藥業(yè)有限責(zé)任公司，河北 石家莊 050000)

0 引言

頭孢哌酮為第三代頭孢菌素類抗生素，能夠抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成而起到殺菌作用，他唑巴坦對(duì)β—內(nèi)酰胺酶有抑制作用，二者發(fā)揮協(xié)同抗菌作用。適用于上呼吸道、下呼吸道、泌尿系統(tǒng)等中、重度感染。在用于治療由對(duì)頭孢哌酮單藥敏感菌與對(duì)頭孢哌酮單藥耐藥、對(duì)本品敏感的產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌引起的混合感染時(shí)，不需要加用其它抗生素。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀(HP1100)；METTLER電子天平(AB104)；酸度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器公司PHS-3C)；澄明度檢測儀(天津大學(xué)YB-2)。

1.2 藥品和試劑

注射用頭孢哌酮鈉他唑巴坦鈉(4:1)2.0g(自制，批號(hào)EV7 130101)；頭孢哌酮對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所以下簡稱中檢所，批號(hào)130420-200304)；他唑巴坦對(duì)照品(中檢所，批號(hào)130511-200402)頭孢哌酮雜質(zhì)C(中檢所，批號(hào)130617-201001)；頭孢哌酮S異構(gòu)體(中檢所，批號(hào)130412-200902)；7-氨基頭孢烷酸(中檢所，批號(hào)130538-200902)；他唑巴坦復(fù)合物A(GOK022，批號(hào)：1643394)。

2 方法和結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

色譜條件與系統(tǒng)適用性：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑：以甲醇0.0025mol/L四丁基氫氧化銨溶液(34:66，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0)為流動(dòng)相；柱溫40℃；檢測波長220nm。取頭孢哌酮對(duì)照品、他唑巴坦對(duì)照品、頭孢哌酮雜質(zhì)A及頭他哌酮S異構(gòu)體適量(先以乙腈溶解)，再加流動(dòng)相稀釋成每1mL中各約含0.1mg的混合溶液，取10μl注入液相色譜儀，按頭孢哌酮雜質(zhì)A、他唑巴坦、頭孢哌酮和頭孢哌酮S異構(gòu)體的順序出峰，理論板數(shù)按他唑巴坦峰計(jì)算應(yīng)不低于3500，各峰間的分離度均應(yīng)符合規(guī)定。

含量測定：取約60mg樣品，精密稱定，置100mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；取頭孢哌酮對(duì)照品與他唑巴坦對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1mL中含頭孢哌酮0.5mg和他唑巴坦0.12mg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算出供試品中C25H27N9O8S2和C10H12N4O5S的含量。

有關(guān)物質(zhì)測定：取本品，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1mL中約含頭孢哌酮0.5mg與他唑巴坦0.125mg的溶液，作為供試品溶液(配制后立即測定)；精密量取1mL，置100mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液；另精密稱取頭孢哌酮雜質(zhì)A和頭孢哌酮雜質(zhì)C對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1mL中分別約含10μg的頭孢哌酮雜質(zhì)A和5μg的頭孢哌酮雜質(zhì)C的混合溶液，作為雜質(zhì)對(duì)照品溶液(出峰順序依次為頭孢哌酮雜質(zhì)A和頭孢哌酮雜質(zhì)C)。照含量測定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為頭孢哌酮滿量程的15%～20%；再精密量取供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至頭孢哌酮峰保留時(shí)間的2.5倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，扣除流動(dòng)相峰，含頭孢哌酮雜質(zhì)A和頭孢哌酮雜質(zhì)C按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，分別不得過2.0%和1.0%，其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液兩個(gè)主峰面積和的1.5倍(1.5%)，其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液兩個(gè)主峰面積和的2倍(2.0%)，供試品溶液色譜圖中任何小于對(duì)照溶液兩個(gè)主峰面積和0.05倍的峰可忽略不計(jì)。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

取本品8瓶，其中4瓶每瓶用5%葡萄糖溶液250ml溶解，另4瓶每瓶用0.9%氯化鈉注射液250ml溶解，每種溶劑的第一瓶都是在溶解后，立刻搖勻，精密量取2ml，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解稀釋至刻度，經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過，按有關(guān)物質(zhì)色譜項(xiàng)進(jìn)樣分析，第二、第三和第四瓶在溶解后室溫放置0.5h、1.0h和1.5h后，按第一瓶的方法測定，試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 供試品在不同溶液中的有關(guān)物質(zhì)考察結(jié)果

取本品8瓶，除去標(biāo)簽，外壁用乙醇擦凈，置干燥器干燥1～2h，除去鋁蓋，編號(hào)，內(nèi)容物用葡萄糖溶液或氯化鈉溶液轉(zhuǎn)移至250mL量瓶中，分別再用同種溶劑溶解并稀釋至刻度，再精密量取7mL，至25mL量瓶中，用相應(yīng)溶劑稀釋至刻度，經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾后進(jìn)樣分析，第二、第三和第四瓶在溶解后室溫放0.5h、1.0h和1.5h后，按第一瓶的方法測定，計(jì)算含量及RSD，結(jié)果見表2。

表2 供試品在不同溶液中的含量考察結(jié)果

取本品20瓶，每5瓶為一份，每瓶分別用上述溶液4mL溶解，合并同種溶劑的溶解液，約每隔0.5h測定1次pH值，連續(xù)測定4次，樣品溶液pH值變化情況見表3。

表3 供試品在不同溶液中的pH考察結(jié)果

取本品40瓶，每20瓶為1份，每瓶分別用上述兩種溶液25mL溶解，合并同種溶劑溶解液，約每隔0.5h照光阻法測定1次不溶性微粒，連續(xù)測定5次，樣品溶液不溶性微粒變化情況見表4。

表4 供試品在不同溶液中的不溶性微粒考察結(jié)果

3 結(jié)果討論

(1)本品在葡萄糖注射液和氯化鈉注射液中的穩(wěn)定性一致，檢出的雜質(zhì)總量接近，在1.5h內(nèi)較穩(wěn)定。

(2)本品在兩種注射液中溶解后的含量基本一致，且在1.5h內(nèi)不隨放置時(shí)間的增加而變化。

(3)本品在兩種注射液中pH值有差異，且隨放置時(shí)間的延長有下降趨勢。

(4)本品不溶性微粒數(shù)目在兩種溶液中有差異，且隨著放置時(shí)間的延長在葡葡糖注射液中的微粒個(gè)數(shù)有明顯變化，而氯化鈉溶液中所測得的微粒數(shù)基本穩(wěn)定。

4 結(jié)論

本品用氯化鈉注射液和葡萄糖注射液配制用于臨床差異不大，但在上述溶液中放置的時(shí)間越長，產(chǎn)生的雜質(zhì)和pH值有明顯的變化，因此在上市產(chǎn)品說明書中強(qiáng)調(diào)了滴注時(shí)間應(yīng)為30～60min，這也是為了保證注射本品時(shí)的安全性。