陳斌

甘肅省紅十字血液中心，甘肅 蘭州730046

隨著醫(yī)療水平的不斷提高，臨床對血液安全的要求越來越高。為保障臨床用血安全，國家以法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等多種形式對獻血者血液ALT、HCV、HBsAg、HIV、梅毒螺旋體等進行了檢測規(guī)定［1］。但對人類Pegivirus（HPgV，之前被稱為庚型肝炎病毒GBV-C/HGV）是否納入常規(guī)化檢測至今未明確，對于經(jīng)血液傳播且在一般人群中廣泛存在但與疾病的關(guān)系還不確定的HPgV因子的控制方法仍在研究之中。本文就HPgV 與輸血安全研究進展作一綜述。

1 HPgV 的發(fā)現(xiàn)

1967 年，Deinhardt F 等將急性黃疸型肝炎患者（G.B.）的血清接種入狨猴體內(nèi)導(dǎo)致狨猴肝炎發(fā)生，將可能引起肝炎的致病因子命名為GB 病毒［2］。1995 年，美國Abbott 實驗室的Simons 與Genelabs 實驗室的Linnend 等采用分子病毒學(xué)技術(shù)分別分離出1 種可能引起人類非甲非戊型肝炎GB 病毒C（GBV-C）和庚型肝炎病毒（HGV）。1996 年，中國首次分離并報道了該病毒［3］。GBV-C 與HGV 的核苷酸及氨基酸的同源性非常接近，經(jīng)分析基因組序列發(fā)現(xiàn)他們?yōu)橥环N病毒的不同分離株，于是GBV-C 與HGV 統(tǒng)一命名為庚型肝炎病毒（hepatitis gvirus，HGV）［2，4］。2013 年，國際病毒分類委員會批準(zhǔn)在黃病毒科下設(shè)一個新屬Pegivirus genus，GBV-C/HGV 重新命名為HPgV［5-6］。

2 HPgV 基因型及分布

HPgV 為有包膜的單股正鏈RNA 病毒，屬黃病毒科Pegivirus 屬，直徑50～100nm，其含有脂質(zhì)包膜，上有包膜蛋白E1 和E2。含有一個開放讀碼框架（ORF），編碼長約2900 個氨基酸多肽，5’端為結(jié)構(gòu)區(qū)，3’端為非結(jié)構(gòu)區(qū)［7］。目前，已經(jīng)被鑒定的基因型有7 種，彼此間的差異性為11%～14%［8］，基因型1 在西非人中分離，基因型2 在美國、歐洲、南美、北非人群檢測到，基因型3 在亞洲和美洲印第安人中及造血干細(xì)胞移植患者中流行，基因型4 通常發(fā)現(xiàn)于東南亞，基因型5 在南非發(fā)現(xiàn)［9-10］，可能涉及HPgV/HIV 共感染的基因型6 病毒在印度尼西亞人中發(fā)現(xiàn)［11-12］，在中國云南地區(qū)發(fā)現(xiàn)新的基因型暫命名GBV-C7 型，其在HIV-1 感染的靜脈吸毒人群中主要流行［13］。

3 HPgV 在獻血者中的感染情況

HPgV 在世界各地人群中普遍存在，在獻血者中廣泛流行，有償獻血人群感染率明顯高于無償獻血人群［14］。發(fā)達國家HPgV-RNA 陽性率在0.5%～5%，抗-E2 陽性率為3%～14%。發(fā)展中國家HPgV-RNA 陽性率為5%～18.9%，抗-E2 陽性率為13.2%～24.2%［15，16］。我國HPgV-RNA 陽性率為2.35%～4.26%，抗-E2 陽性率為3.18%～4.71%［3］。金一鳴等［17］對蘇州地區(qū)無償獻血員HPgV 感染調(diào)查認(rèn)為，蘇州地區(qū)無償獻血員HPgV 感染率極低，無血清流行病學(xué)意義，但由于目前檢測技術(shù)的限制，仍應(yīng)采取有效措施，防止疾病的輸血傳播，確保臨床用血安全。由此表明獻血人群中有HPgV 感染者存在，應(yīng)重視HPgV 在獻血人群中的預(yù)防工作。

4 HPgV 的血源性傳播途徑

HPgV 血源性傳播途徑主要通過血液、母嬰及性接觸等途徑傳播。Alter 等［18］1997 年調(diào)查了1972～1995年357 例受血者，其中9.8%輸血患者HPgV-RNA 陽性。國內(nèi)1998 年報告輸血感染HPgV 的研究顯示5.1%的輸血患者感染HPgV［19］。靜脈吸毒者中HPgV-RNA 的陽性率為33%［20］，HPgV-RNA 陽性的慢性乙型肝炎患者中75%為靜脈注射毒品成癮者。接受注射治療的患者比例（16.5%）明顯高于未接受注射治療的患者（9.4%）［8］。母嬰垂直傳播HPgV 主要是在生產(chǎn)過程中感染，但剖宮產(chǎn)嬰兒感染率明顯下降［21］。國內(nèi)報道HPgV在血液透析患者中的感染率為0～14.3%［22-23］，國外報道為19%～31%［24-25］，明顯高于一般人群。HPgV 可能通過血液外其他體液傳播。在血清中含有HPgV-RNA 個體的唾液和精液中可測得HPgV-RNA。

5 HPgV 感染的實驗室檢測

RT-PCR 檢測標(biāo)本中的HPgV 基因片段是目前檢測HPgV 感染最常用的方法。目前已用真核系統(tǒng)表達了HPgV 包膜蛋白E2，并建立了檢測E2 抗體的ELISA 法。

5.1 RT-PCR 檢測病毒-RNA RT-PCR 把HPgVRNA 病毒逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA 為模板進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物通過凝膠電泳即可判讀結(jié)果。RT-PCR可檢測HPgV 病毒血癥患者血清或血漿及體液中HPgV-RNA，引物為5’非編碼區(qū)，NS5 和NS3 編碼區(qū)。該方法是目前診斷HPgV 感染最準(zhǔn)確的方法。

5.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測抗體 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）是將HPgV 的非結(jié)構(gòu)區(qū)和結(jié)構(gòu)區(qū)的高度抗原性的合成肽制成固相抗原吸附劑來捕獲血清中的HPgV 抗體。一般HPgV 感染者在感染3 周后可檢出抗體，血清抗-E2 抗體產(chǎn)生后病毒即被清除，故認(rèn)為抗-E2 是宿主成功清除HPgV 感染的標(biāo)志物，對其的檢測意義明顯［2，5］。ELISA 簡單、快速、特異、價廉，適用于臨床診斷以及獻血員和健康人群的篩查。

6 HPgV 感染對受血者的影響

關(guān)于HPgV 的致病性目前尚不明確。有些學(xué)者認(rèn)為，HPgV 能單獨感染人類，是可以致病的，也有研究者認(rèn)為HPgV 不是嗜肝病毒，無明顯致病性，甚至認(rèn)為它是一種“保護性病毒”［26］。研究顯示，HPgV 感染者在非甲-非戊型肝炎患者中比例并不高且血清轉(zhuǎn)氨酶大多正常。

6.1 HPgV 單獨感染 HPgV 單獨感染多表現(xiàn)為急性肝炎，其臨床特性與轉(zhuǎn)氨酶水平正常或低的亞臨床特性和無黃疸肝炎相似。有國內(nèi)學(xué)者在對HPgV 感染者的回顧性研究中發(fā)現(xiàn)，HPgV 存在持續(xù)性感染，單純HPgV 感染以急性肝炎為主，而重疊感染以慢性肝炎、肝硬化為主［27］。

6.2 HPgV 與HBV、HCV、HIV 重疊感染 HPgV 與HBV和/或HCV 重疊感染的致病性一直存在爭議，對重疊感染的病毒之間的相互作用機制尚不清楚。一些臨床研究顯示，HPgV 與HBV 或HCV 混合感染的患者較單一HBV 或HCV 感染者在病情的臨床癥狀和肝功能損傷方面無加重，HPgV 與HCV 共感染不惡化慢性丙肝的臨床進程，也不降低HCV 對抗病毒治療的反應(yīng)［2］。研究證實HPgV 與HIV 重疊感染，HPgV 的AIDS 患者可以延緩HIV 感染的病程，延長HIV 感染者的存活期，HGV 導(dǎo)致較低的HIV 病毒載量和較高數(shù)量的CD4+T細(xì)胞，抗病毒治療有效性明顯增加［28-30］。

6.3 HPgV 與肝損傷 最初，HPgV 因引起肝炎被發(fā)現(xiàn)，但HPgV 的嗜肝性目前仍然存在爭議，大多數(shù)學(xué)者的觀點是HPgV 非嗜肝性病毒，而是嗜淋巴細(xì)胞病毒［31，32］。Tucker 等［33］綜述的14 項HPgV 嗜肝性研究中，僅有一項數(shù)據(jù)顯示HPgV 存在肝復(fù)制，13 項認(rèn)為HPgV 不是嗜肝性病毒。許家璋等［34］研究認(rèn)為HPgV 是一種嗜肝性病毒，感染后可導(dǎo)致實驗動物血清ALT 和AST 的系列變化和肝臟組織學(xué)損傷，有致病性。林彩文等［35］研究認(rèn)為無論是急性肝炎、慢性肝炎還是重型肝炎，重疊感染HPgV，既不加重肝臟的損害，也不影響疾病的病程與預(yù)后。由此可見，HPgV 的致病性仍不確定。

6.4 HPgV 感染與原發(fā)性肝癌的關(guān)系 HPgV 在原發(fā)性肝癌發(fā)病中的作用尚未明確。Yuan 等［36］對144 名肝細(xì)胞癌（HCC）患者和252 名對照者的研究發(fā)現(xiàn)，感染HPgV 的患者發(fā)生HCC 的風(fēng)險高5.4 倍。葛向華等［37］對原發(fā)性肝癌的病因進行了回顧性研究，表明中國肝癌誘發(fā)因素仍以HBV 為主，其次為HCV，而HPgV 在肝癌發(fā)病中的意義甚微。

6.5 HPgV 感染與其他疾病關(guān)系 小樣本量研究表明，HPgV 感染能誘發(fā)非霍奇金淋巴瘤，與再生障礙性貧血、慢性腎功能衰竭等慢性疾病發(fā)生有關(guān)［5，38］。

7 HPgV 感染的預(yù)防措施

7.1 HPgV 感染預(yù)防存在的問題 目前，HPgV 感染預(yù)防還沒有系統(tǒng)的策略。主要原因：首先，我國缺乏對HPgV 感染的流行病學(xué)調(diào)查。其次，盡管輸血傳播HPgV已經(jīng)得到普遍認(rèn)可，但由于對HPgV 的致病性存在質(zhì)疑，世界衛(wèi)生組織（WHO）、美國食品藥品管理局（FDA）、歐洲質(zhì)量理事會（EDQM）均未推薦獻血者篩查HPgV，我國也沒有在獻血者中篩查HPgV。再次，對HPgV 的致病機制，臨床缺乏系統(tǒng)性研究，對致病性沒有確定的結(jié)論。

7.2 HPgV 感染的預(yù)防措施 ①普及HPgV 科學(xué)知識。開展預(yù)防和控制血液途徑傳播HPgV 的教育，通過獻血者教育進行自我排除和自動延期獻血以降低輸血傳播HPgV 的風(fēng)險。②依法管理醫(yī)療機構(gòu)和采供血機構(gòu)，嚴(yán)格崗位資質(zhì)。加強采血和血液制品的無菌技術(shù)操作，嚴(yán)格按照技術(shù)規(guī)程操作。③嚴(yán)格篩選獻血者。從固定、自愿無償獻血者中采集血液，輸血傳播疾病發(fā)生的程度取決于獻血人群中感染人數(shù)的比例和篩選工作的效能，防止輸血傳播疾病的首要方法是建立完整的篩選系統(tǒng)和選擇低危的獻血人群。加強獻血前的征詢，使曾經(jīng)接受過輸血或血制品的人員盡量延遲獻血，開展血液HPgV 的篩查工作［39］。④對血液制品進行病毒滅活。對血液制品進行病毒滅活是保證輸血安全的有效手段，是預(yù)防HPgV 經(jīng)血制品傳播的最直接途徑，目前在人類還無法消除病毒感染的“窗口期”的情況下，對血制品進行病毒滅活，可以最大程度地防止HPgV 經(jīng)血制品傳播，確保輸血安全。⑤加強臨床用血的管理。減少不必要的輸血，科學(xué)合理用血，倡導(dǎo)自體輸血。⑥加強醫(yī)院內(nèi)部器官移植、血液透析等部門感染控制。嚴(yán)格執(zhí)行國家標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格做好病區(qū)及各種物品的消毒，包括空氣消毒，地面和物體表面消毒、各種器械用品及透析機消毒。醫(yī)護人員要從思想上重視消毒工作，嚴(yán)格醫(yī)務(wù)人員的規(guī)范操作，嚴(yán)格檢查，互相監(jiān)督，確保污染不擴散。