鄭猛 陳紅斌 徐深錄

【摘 要】目的：分析中藥免煎顆粒和中藥飲片中含有的有效成分含量差異。方法：將延胡索免煎顆粒和延胡索飲片作為研究對象，對兩種中藥中的延胡索乙索和總生物堿含量進(jìn)行測定，比較兩種藥物中有效成分含量的差異。結(jié)果：延胡索免煎顆粒中的總生物堿含量為5.55mg/g，延胡索含片中的總生物堿含量為5.14mg/g，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組中延胡索乙索含量比較，延胡索免煎顆粒為0.8537mg/g，延胡索中藥飲片為0.7276mg/g，組間差異明顯（P<0.05）。結(jié)論：延胡索免煎顆粒和中藥飲片中的有效成分含量相比，中藥免煎顆粒中的有效成分要高于中藥飲片。

【關(guān)鍵詞】中藥免煎顆粒;中藥飲片;延胡索;有效成分含量

【中圖分類號】R286.02【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1005-0019（2020）04--01

目前，對于中藥免煎顆粒能否替代中藥飲片，以及其中藥有效成分含量的多少等問題，成為人們熱議的話題。本研究對延胡索免煎顆粒和中藥飲片的有效成分進(jìn)行檢測，探討中藥免煎顆粒和中藥飲片中有效成分含量的差異?，F(xiàn)將具體研究內(nèi)容報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 儀器與試藥

1.1.1 儀器

本研究中使用的儀器包括Agilent-1260 高效液相色譜儀、SZ-93 自動(dòng)雙重純水蒸餾器、KQ2200DB超聲波清洗器 、PHS-3C精密PH計(jì)和BS210S型電子天平。

1.1.2 試藥

本研究中延胡索乙素對照品來自于新天域生物科技有限公司。延胡索免煎顆粒來自于沈陽飛龍藥業(yè)有限公司（批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z10930041），延胡索飲片來自于商丘市金馬藥業(yè)有限公司（批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z41021497），經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測為罌粟科植物延胡索（元胡）Corydalis yanhusuo W.T. Wang 塊莖。使用的檢測水為雙蒸水。甲醇作為色譜純。其他試劑為分析純。

1.2 方法

1.2.1 測定總生物堿含量

（1）制備供試品溶液。

使用精密電子天平稱取10g的延胡索免煎顆粒和飲片，將飲片經(jīng)3號篩制成粉末。免煎顆粒使用蒸餾水進(jìn)行溶解，選取100ml溶解液。將飲片粉末與200ml蒸餾水混合后進(jìn)行煎煮，微沸20分鐘后，再加入100ml蒸餾水二次煎煮。合并濾液，水浴濃縮，冷卻后取100ml溶液。將10%氨試液加入到兩份溶液當(dāng)中，調(diào)節(jié)pH值為10以上。再加入80ml的氯仿萃取直至生物堿反應(yīng)后停止。將萃取液合并后，加入3g的無水硫酸鈉進(jìn)行脫水，將氯仿回收至小體積后，將其放入10ml的容量瓶中，加氯仿至有效刻度。放置備用。

（2）測定含量。

吸取延胡索免煎顆粒和飲片供試品溶液各3份，共5ml。將其分別放入清潔后干燥的燒杯中，進(jìn)行低溫水浴，加熱后蒸干。在室溫下冷卻后，加入20ml濃度為0.02mol/L的硫酸滴定液。待其搖勻溶解后，使用精密pH計(jì)插入燒杯中。將0.02mol/L的氫氧化鈉滴定液滴定。當(dāng)pH計(jì)值為5.1時(shí)，停止滴定。

（3）計(jì)算方法。使用延胡素乙索作為生物堿含量的檢測標(biāo)準(zhǔn)。以0.02mol/L的硫酸滴定液等于7.1084mg的延胡索乙素（C21H25NO4）含量進(jìn)行換算。

1.2.2 延胡索乙素含量測定

（1）色譜條件。

儀器選用迪馬kromasilC18;流動(dòng)相為加乙醇一水梯度（0-10min，30%→65%甲醇;10～25min，65%→75%甲醇;25min以后，75%甲醇等度）洗脫，分析時(shí)間約為40分鐘，柱溫設(shè)置為30℃，檢測波長為294nm，進(jìn)樣量為10ul。

（2）配制對照品溶液。

將經(jīng)過干燥后的延胡索乙素對照品適量稱取后，放入50ml容量瓶中。使用乙醇溶液進(jìn)行稀釋和溶解，得到濃度為40.74μg/ml的延胡索乙素對照品溶液。

（3）配制供試品溶液。

稱取0.5g的延胡索免煎顆粒和飲片粉末，分別放入25ml的容量瓶中。將甲醇加入后進(jìn)行定容。進(jìn)行20分鐘的超聲后，冷卻至室溫，將甲醇補(bǔ)足超聲前的重量。使用0.22um的微孔濾膜過濾溶液。

（4）線性關(guān)系考察。

量取1ul、2ul、4ul、6ul和8ul的對照品溶液，使用液相色譜儀進(jìn)行測定。將溶液濃度作為橫坐標(biāo)，將對應(yīng)的峰面積作為縱坐標(biāo)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。通過對檢測到的數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸分析后，得出Y=4.88x106×2.76×104，R=0.9997。根據(jù)分析結(jié)果，可以得出，延胡索乙素范圍在8.148-40.74ug時(shí)，線性關(guān)系良好。

（5）儀器精密度實(shí)驗(yàn)。

選用同一份對照品溶液，吸取10ul后，進(jìn)行5次重復(fù)進(jìn)樣實(shí)驗(yàn)。對峰面積進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，峰面積RSD（n=5）為0.49%。這表明儀器精密度較好。

（6）重復(fù)檢測實(shí)驗(yàn)

對同一批的樣品進(jìn)行5分取樣，制備供試品溶液。并根據(jù)（1）項(xiàng)中的色譜條件對延胡索乙素的峰面積進(jìn)行測定。經(jīng)過對檢測結(jié)果進(jìn)行計(jì)算和分析后得出，樣品溶液含量為0.47mg/g，RSD（n=5）為1.28%。

（7）穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

選用制備好的供試品溶液，立即進(jìn)樣，在即刻、2小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)時(shí)間段對延胡索乙素峰面積積分值進(jìn)行測定。從結(jié)果可知，供試品溶液24小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定，RSD=1.38%，說明延胡索乙素在24小時(shí)內(nèi)的穩(wěn)定性比較強(qiáng)。

（8）加樣回收率實(shí)驗(yàn)

對已知含量的樣品稱取6份，在6份樣品中分別加入定量的延胡索乙素對照品溶液。制備供試品溶液后，對溶液中的含量進(jìn)行測定。

（9）測定樣品含量

利用上述供試品溶液制備方法，分別制備三份延胡索免煎顆粒和飲片樣品溶液，對延胡索免煎顆粒和飲片中的延胡索乙素含量進(jìn)行測定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將本組研究數(shù)據(jù)錄入SPSS 22.0軟件，進(jìn)行分析處理后，將數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一計(jì)算。使用（）、t值以及百分率和卡方進(jìn)行組間對比計(jì)算。當(dāng)P<0.05，組間比較存在差異。

2 結(jié)果

2.1 延胡索免煎顆粒和飲片樣品中延胡索乙素含量測定結(jié)果，見表1。

2.2 延胡索中延胡索乙素回收率，見表2。

2.3 兩組有效成分含量比較，延胡索免煎顆粒中的延胡索乙素含量和總生物堿含量都比延胡索飲片中的含量高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

中醫(yī)中藥學(xué)的不斷發(fā)展，各種中藥制品在臨床上取得了顯著的療效。中藥飲片以其副作用少，服用方便等特點(diǎn)，在臨床上的到廣泛的應(yīng)用[1]。中藥免煎顆粒是在中藥飲片基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型中藥制備方法。由于其服用方便，使用劑量準(zhǔn)確的特點(diǎn)，深受患者和臨床醫(yī)師的青睞[2]。中藥飲片和免煎顆粒是中醫(yī)藥學(xué)的一大進(jìn)步，這類中藥的制作方法，將傳統(tǒng)中藥必須進(jìn)行長時(shí)間的熬制，以及制作工藝比較粗糙，服用和攜帶不方便的缺點(diǎn)進(jìn)行克服[3]。采用現(xiàn)代制備工藝，既滿足了患者的服藥需求，也保留了中藥的有效成分。不管是單味中藥的療效，還是多種復(fù)方成分的配伍療效，都能夠進(jìn)行合理的發(fā)揮。中藥在煎煮過程中，其中藥成分間出現(xiàn)吸附、增溶、助溶等多種物理化學(xué)反應(yīng)，其有效成分高于單煎合并藥物的藥效[5]。例如，在甘草和五味子進(jìn)行配伍煎煮過程中，其中黃酮含量比甘草液單煎要高的多。臨床研究還表明，水煎劑的臨床療效比免煎顆粒和中藥飲片的療效都要高。由此可見，復(fù)方單煎液與合煎液的有效成分差別很大。

綜上所述，中藥及其制品成分復(fù)雜、制作工藝也比較復(fù)雜，在制作過程中，各種中藥發(fā)生配伍作用，都會對藥效產(chǎn)生影響。關(guān)于中藥免煎顆粒和中藥飲片之間的質(zhì)量優(yōu)劣，不能僅憑一項(xiàng)研究就能夠完全證實(shí)。要想對這項(xiàng)課題進(jìn)行深入的研究，還需要更多人的努力。在臨床用藥過程中，需要對具體的藥物具體分析，不能一味的使用免煎顆粒而摒棄傳統(tǒng)飲片。

參考文獻(xiàn)

劉麗娟， 陳紅英， 李翠芬. 大青葉中藥飲片與配方顆粒的質(zhì)量研究[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2017， 37（7）：723-725.

吳皓東， 李燕， 張景麗，等. 免煎顆粒與中藥飲片薄層鑒別及含量測定的對比研究[J]. 新疆中醫(yī)藥， 2017， 35（4）：55-57.

仇錦林. 中藥免煎顆粒與中藥飲片治療老年偏頭痛的療效比較[J]. 臨床合理用藥雜志， 2017， 10（26）：37-38.