趙婷，李曉，吳曉梅，肖肖，袁濤△

（1云南省第一人民醫(yī)院 云南省臨床病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明；2云南省第一人民醫(yī)院婦科，云南 昆明）

0 引言

細(xì)菌性陰道病(bacterial vaginosis,BV)是育齡婦女最常見的陰道感染性疾病，是由多種致病性厭氧菌感染引起的無明顯粘膜炎性反應(yīng)疾病[1，2]。細(xì)菌性陰道病主要是由于女性陰道內(nèi)乳桿菌的減少甚至消失，致使陰道菌群失調(diào)，陰道清潔度、PH值發(fā)生變化，使外源性有害微生物入侵及內(nèi)源性致病菌大量繁殖從而引起陰道炎的發(fā)生。細(xì)菌性陰道病發(fā)病還會(huì)導(dǎo)致諸多并發(fā)癥，如可導(dǎo)致婦女盆腔炎、不孕不育等疾病[3，4]。如不及時(shí)治療可轉(zhuǎn)為慢性感染或帶菌者，病原體因外來或生理因素影響可再次復(fù)活而侵襲傳播，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 資料來源

本研究收集2016年1月至2016年12月樣本12888例。入選標(biāo)準(zhǔn)：①年齡在 18 歲以上，有性生活，未絕經(jīng)；②非月經(jīng)期、妊娠期；③無陰道出血、急性生殖器官炎癥。排除標(biāo)準(zhǔn)：①白帶常規(guī)檢查假絲酵母菌或/和陰道毛滴蟲陽性；②3d內(nèi)有性生活史；③1周內(nèi)有陰道局部用藥、陰道沖洗及手術(shù)操作史；④2周內(nèi)有全身應(yīng)用抗生素、激素史。

1.2 檢查方法

1.2.1 婦科陰道分泌物采集

（1）用無菌棉拭子自受試者陰道側(cè)壁中上 1/3 處取分泌物，做相關(guān)檢查：①放入有少量生理鹽水的無菌試管中及時(shí)送檢作白帶常規(guī)檢查；②pH值測(cè)定：將精密 pH 試紙（pH3.8-5.4）直接浸入棉拭子上的陰道分泌物中，0.5s后取出與標(biāo)準(zhǔn)色板比較讀取pH值；（2）陰道微生態(tài)取樣：將擴(kuò)陰器生理鹽水潤滑后放入受檢者陰道內(nèi)，暴露宮頸，無菌棉簽從陰道后穹窿或陰道上 1/3 皺褶內(nèi)取分泌物并裝于無菌試管內(nèi)，試管內(nèi)加入生理鹽水0.5ml 攪勻后棉簽在清潔載玻片上均勻涂開，試管內(nèi)標(biāo)本用于功能學(xué)檢測(cè)。

1.2.2 陰道微生態(tài)檢測(cè)

革蘭染色后顯微鏡檢測(cè)項(xiàng)目包括:（1）群密集度:根據(jù)油鏡下每視野平均細(xì)菌數(shù)分I-IV級(jí)。I級(jí)：1-9個(gè)/油鏡視野；II級(jí)：10-99個(gè)/油鏡視野；III級(jí)：≥100個(gè)/油鏡視野。光鏡下觀察細(xì)菌滿視野；IV級(jí)：光鏡下觀察細(xì)菌聚集成團(tuán)、或密集覆蓋軸膜上皮細(xì)胞。如果沒有觀察到細(xì)菌,標(biāo)記為0級(jí)。（2）菌群多樣性：根據(jù)光鏡下細(xì)菌的形態(tài)分為I-IV級(jí)。I級(jí)：能辨別1-3種細(xì)菌；Ⅱ級(jí)：能辨別4-6種；III級(jí)：能辨別7-10種；IV級(jí)：能辨別11種及以上的細(xì)菌。如果沒有觀察到細(xì)菌，標(biāo)記為0級(jí)。（3）優(yōu)勢(shì)菌判斷：鏡下所見最多的微生物定義為優(yōu)勢(shì)菌。無優(yōu)勢(shì)菌標(biāo)記為菌群抑制；優(yōu)勢(shì)菌是革蘭陽性桿菌時(shí)為正常優(yōu)勢(shì)菌；異常優(yōu)勢(shì)菌包括革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌等。（4）陰道分泌物功能檢測(cè)：依照試劑盒的操作分別檢測(cè)過氧化氫酶、自細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶、B-葡萄糖醛酸酶、乙酚氨基葡萄糖苷酶和pH值6項(xiàng)指標(biāo)。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）BV：采用Amsel臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，4項(xiàng)中有3項(xiàng)陽性即診斷為BV。（2） VVC：10% KOH濕片鏡檢，檢查菌絲或芽孢，但有陰道炎癥的部分患者，取分泌物進(jìn)行真菌培養(yǎng)確診。（3）TV：生理鹽水鏡片檢測(cè)，看到活動(dòng)的滴蟲即診斷為TV。（4）AV：陰道分泌物顯微鏡濕片的診斷標(biāo)準(zhǔn)。顯微鏡濕片診斷標(biāo)準(zhǔn)分為觀察的5個(gè)指標(biāo)，分別是乳桿菌、白細(xì)胞數(shù)、中毒性白細(xì)胞所占比例、背景菌落、基底層細(xì)胞所占比例。根據(jù)五個(gè)指標(biāo)分別評(píng)分，＞3分以上可以診斷AV。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用卡方檢驗(yàn)分析比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陰道分泌物檢測(cè)

見表1。

2.2 菌群多樣性分析

見表2、表3。

3 討論

女性陰道是一個(gè)復(fù)雜的微生態(tài)體系，由陰道內(nèi)的微生態(tài)菌群，機(jī)體內(nèi)分泌調(diào)節(jié)功能組成。陰道炎是婦科常見病及多發(fā)病。陰道炎根據(jù)其病因和病原體的不同可分為10余種，但90%以上的陰道炎為BV、WC及TV三種陰道炎[6-8]。陰道炎患者表現(xiàn)各種各樣的癥狀，常常不典型，或者部分婦女無癥狀，診斷往往比較困難，臨床上50%以上的陰道炎為混合性感染。常見的混合性陰道炎有BV+TV、BV+VVC、TV+VVC。在混合感染中可同時(shí)分離出多種具有致病作用的病原體和某些條件致病性微生物。在本研究中BV合并其他感染增加了病程進(jìn)展，使治療更加困難BV+TV、BV+VVC、BV+AV混合感染使患者的陰道環(huán)境更加復(fù)雜，且表現(xiàn)的特征不一；BV+AV混合感染較其他兩種混合感染的菌群多樣性和密集度顯著增加。

表1 單純BV及混合BV感染的臨床實(shí)驗(yàn)室檢查情況

表2 菌群密集度分析（%）

表3 陰道菌群多樣性比較（%）

陰道內(nèi)乳酸桿菌的減少或缺失是導(dǎo)致BV發(fā)生的主要原因，其復(fù)發(fā)也與沒能重新建立乳酸桿菌占優(yōu)勢(shì)的陰道菌群狀態(tài)相關(guān)。

綜上所述，通過對(duì)陰道分泌物陰道菌群的密集度、多樣性、優(yōu)勢(shì)菌及陰道菌群狀態(tài)功能的綜合研究，能夠客觀全面地評(píng)價(jià)女性陰道微生態(tài)，為臨床診斷、治療及評(píng)估預(yù)后提供充足的依據(jù)。