白耀博， 時 艷， 劉 偉

(遼寧省沈陽市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科， 遼寧 沈陽 110041)

人巨細(xì)胞病毒(HCMV)屬于皰疹病毒亞科，是引發(fā)人類疾病的常見病原體。流行病學(xué)顯示，HCMV在世界范圍內(nèi)感染率為40～80%，可通過密切接觸、輸血、性行為、器官移植及母嬰途徑傳播[1,2]。HCMV感染在新生兒中導(dǎo)致先天畸形、智力低下等嚴(yán)重后遺癥；在免疫低下個體中可出現(xiàn)視網(wǎng)膜炎、肺炎等疾病[3]。近年來研究顯示，病毒感染與糖尿病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，病毒感染或可直接或間接損傷胰島細(xì)胞導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生[4]。目前已有大量研究顯示，HCMV感染與1型糖尿病相關(guān)，但其與2型糖尿病的相關(guān)性研究尚較為缺乏[5,6]。隨著2型糖尿病發(fā)病率的逐年增加，探究其發(fā)病原因并對癥采取干預(yù)措施對2型糖尿病的防治具有重要的臨床意義。本研究以2型糖尿病患者作為研究對象，探究HCMV感染對患者糖代謝及胰島素敏感性的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料:將我院2016年2月至2018年2月收治的154例2型糖尿病患者納入T2DM組，所有患者均《中國2型糖尿病防治指南(2013年版)》[7]，排除合并嚴(yán)重器質(zhì)性病變、自身免疫性疾病及惡性腫瘤患者。T2DM組患者男性88例，女性66例，年齡35～69歲，平均(52.74±8.95)歲；病程1個月至11年。另擇50例同期于我院查體排除糖尿病的健康成年人納入對照組，其中男27例，女23例，年齡38～74歲，平均(51.98±9.12)歲，經(jīng)比較，兩組患者性別組成、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法:所有受試者檢測當(dāng)日抽取空腹外周靜脈血，分為3份用于以下檢測:①抗凝血標(biāo)本離心收集血清檢測空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(Fins)、C肽(C-P)等指標(biāo)；②非抗凝血標(biāo)本用于HCMV病毒載量測定；③非抗凝血標(biāo)本檢測T淋巴細(xì)胞亞群。血清學(xué)相關(guān)指標(biāo)測定:FPG水平采用葡萄糖氧化酶法進(jìn)行測定，儀器為日本奧林巴斯株式會社全自動生化儀AU400；Fins水平采用放射免疫測定法進(jìn)行測定，測定儀器為安徽合肥科大創(chuàng)新公司GC400γ放射免疫計數(shù)器；C-P水平采用化學(xué)發(fā)光法測定，儀器為美國亞培公司AXSYM化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。胰島素敏感指數(shù)(ISI):參考文獻(xiàn)[8]，ISI=In(1/FBG×Fins)，ISI值越高代表胰島素敏感性越高。HCMV-DNA載量檢測:采用熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行檢測，熒光PCR反應(yīng)采用美國BIO-RAD公司CF×96 Real-Time System儀器上進(jìn)行，引物由上海生工生物工程技術(shù)有限公司合成。T淋巴細(xì)胞亞群:采用美國Beckman 公司FC500流式細(xì)胞儀進(jìn)行測定，試劑由其Beckman公司提供，實驗操作嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1兩組受試者HCMV-DNA檢測結(jié)果比較:T2DM組及對照組受試者HCMV-DNA陽性率分別為50.64%及26.00%，組間比較差異具統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=9.291，P=0.002)；T2DM組患者HCMV-DNA載量顯著高于對照組(t=20.027，P<0.001)，見表1。

表1 兩組受試者HCMV-DNA檢測結(jié)果比較

2.2對照組及T2DM組糖代謝、胰島功能相關(guān)指標(biāo)比較:T2DM組及HCMV-DNA陽性、HCMV-DNA陰性兩個亞組患者FPG水平均顯著高于對照組，F(xiàn)ins、C-P及ISI顯著低于對照組，差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；T2DM患者中，HCMV-DNA陽性患者FPG水平顯著高于HCMV-DNA陰性，F(xiàn)ins、C-P及ISI顯著低于HCMV-DNA陰性，差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3對照組及T2DM組免疫功能相關(guān)指標(biāo)比較:T2DM組及HCMV-DNA陽性、HCMV-DNA陰性兩個亞組患者CD4+淋巴細(xì)胞比例及CD4+/CD8+比值顯著高于對照組(P<0.05)，CD8+T淋巴細(xì)胞比例顯著低于對照組(P<0.05)；T2DM患者中，HCMV-DNA陽性患者各T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)均顯著優(yōu)于HCMV-DNA陰性，差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表2 對照組及T2DM組糖代謝胰島功能相關(guān)指標(biāo)比較

注:*與對照組比較，P<0.05；#與HCMV-DNA(-)患者比較，P<0.05

表3 對照組及T2DM組免疫功能相關(guān)指標(biāo)比較

注:*與對照組比較，P<0.05；#與HCMV-DNA(-)患者比較，P<0.05

3 討 論

2型糖尿病又稱非胰島素依賴型糖尿病，主要表現(xiàn)為胰島素抵抗伴胰島素分泌不足。目前研究認(rèn)為，2型糖尿病可能是遺傳因素及環(huán)境因素共同作用導(dǎo)致，常見環(huán)境因素如老齡化、生活方式、運(yùn)動、營養(yǎng)、雌激素缺乏及吸煙史等均為2型糖尿病發(fā)病的危險因素。大量研究表明，1型糖尿病的發(fā)生發(fā)展與病毒感染有極為密切的聯(lián)系，病毒感染或可直接或間接攻擊并損傷胰島細(xì)胞，導(dǎo)致胰島細(xì)胞分泌胰島素功能下降，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。但與1型糖尿病胰島β細(xì)胞嚴(yán)重受損不同，2型糖尿病胰島細(xì)胞功能尚存，二者發(fā)病機(jī)制存在一定差異，病毒感染在2型糖尿病發(fā)生中的作用尚有待考證。

HCMV為線性雙鏈DNA病毒，在人類中普遍易感，對新生兒及免疫機(jī)能低下個體可造成較為嚴(yán)重的并發(fā)癥，經(jīng)原發(fā)感染后，病毒可長期潛伏于體內(nèi)。HCMV感染對1型糖尿病的作用目前已有大量研究，其對胰島功能的損傷機(jī)制大致可分為病毒直接破壞及機(jī)體過度免疫間接損傷。本研究對2型糖尿病患者及健康對照者人群HCMV感染情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，2型糖尿病患者中HCMV-DNA檢測陽性患者占比50.64%，顯著高于健康對照組中的26.00%，提示HCMV在2型糖尿病患者流行率高于健康人群。王娜[9]等報道2型糖尿病抗HCMV-IgG陽性率為50%，本研究結(jié)果與前人報道有所差異，可能與地域差異及檢測方法差異所致。即便HCMV在2型糖尿病患者感染率較高，既往無明確證實HCMV與2型糖尿病之間的關(guān)系。本研究比較了健康對照組及2型糖尿病患者、HCMV-DNA陽性及陰性患者各胰島功能相關(guān)指標(biāo)的差異，結(jié)果顯示，與健康對照者比較，患病人群伴有FPG升高、Fins、C-P及ISI下降；而HCMV-DNA陽性患者各指標(biāo)上升或下降幅度更大，提示HCMV對2型糖尿病患者病情有一定影響。值得注意的是，2型糖尿病患者具有相對較為正常的Fins水平，與既往研究報道的1型糖尿病多伴有較低Fins水平有顯著差異，提示患者機(jī)體胰島素分泌尚正常，但FPG顯著高于正常值，結(jié)合ISI值，可以推斷本研究入組2型糖尿病患者存在Fins分泌稍差伴胰島素敏感性低等，與既往研究所述2型糖尿病病癥相符。

HCMV病毒感染勢必也會引起機(jī)體免疫機(jī)能的改變，本研究對患病及健康人群T淋巴細(xì)胞亞群比例進(jìn)行比較，結(jié)果顯示2型糖尿病患者機(jī)體伴有CD4+T淋巴細(xì)胞比例及CD4+/CD8+比值的下降及CD8+T淋巴細(xì)胞比例上升，而HCMV-DNA陽性患者各指標(biāo)上升或下降幅度大于HCMV-DNA陰性患者，提示2型糖尿病患者均伴有機(jī)體免疫功能的失衡，而HCMV感染可進(jìn)一步加重這種免疫失衡狀態(tài)，導(dǎo)致病情的加重。結(jié)合上述研究結(jié)果進(jìn)行分析，2型糖尿病患者主要伴有胰島素分泌稍顯不足及胰島素靈敏度下降等癥狀，我們推測，與HCMV病毒感染對1型糖尿病致病相關(guān)機(jī)制類似，HCMV可導(dǎo)致機(jī)體免疫失衡，免疫細(xì)胞分泌活性氧、含氮化合物等毒性物質(zhì)，對胰島β細(xì)胞產(chǎn)生一定毒性作用；而T淋巴細(xì)胞亞群的失衡，導(dǎo)致免疫細(xì)胞分泌白介素-6、腫瘤壞死因子等誘導(dǎo)發(fā)生胰島素抵抗作用[10]。但HCMV感染對2型糖尿病具體相關(guān)作用機(jī)制，還有待進(jìn)一步進(jìn)行基礎(chǔ)研究。

綜上，HCMV病毒感染可導(dǎo)致2型糖尿病患者糖代謝異常，降低胰島素敏感性，加重機(jī)體免疫失衡癥狀，促進(jìn)病情的進(jìn)展。