陶曉榮

（永豐縣畜牧獸醫(yī)局，江西 吉安331500）

2019 年7 月，江西省永豐縣某規(guī)模化蛋雞場30 日齡左右雛雞出現(xiàn)急性死亡，病死率達(dá)30%。對病死雞進(jìn)行解剖，初步懷疑是禽霍亂，采集病料進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定、16S rRNA 基因序列測定分析和動物致病性試驗，確診為強毒力禽多殺性巴氏桿菌感染所致；并通過藥敏試驗，篩選出敏感藥物，臨床應(yīng)用敏感藥物進(jìn)行治療，很快控制疫情。

1 診斷

1.1 發(fā)病情況調(diào)查

雞場30 日齡左右雛雞，大部分出現(xiàn)突然死亡，無明顯的臨床表現(xiàn)，小部分出現(xiàn)精神不佳、采食量下降，常規(guī)用藥效果不明顯，發(fā)病率達(dá)60%，死亡率達(dá)50%。

1.2 病理變化

病死雞解剖，可看到心臟內(nèi)外膜、肺臟出血，肝臟有大量針尖大小的灰白色壞死灶，腎臟出血，脾臟腫大出血，氣管出血。

1.3 細(xì)菌分離鑒定

無菌采病死雞的肝臟，劃線接種于TSA 平板，37℃培養(yǎng)過夜，染色鏡檢；挑單個菌落接種于TSA平板，進(jìn)行純培養(yǎng)，染色鏡檢；用雞多殺性巴氏桿菌16SrRNA PCR 引物，進(jìn)行菌落PCR，陽性產(chǎn)物送生工物工程（上海）有限公司進(jìn)行測序，BLAST 比對分析，以判定分離菌的種屬。

從病死雞的肝臟中分離到1 株細(xì)菌，菌落呈針尖大小露珠狀、濕潤、隆起、半透明狀；為2 端濃染的革蘭氏陰性短桿菌；16SrRNA PCR 結(jié)果，從分離菌中擴增到與預(yù)期大小相一致的條帶，經(jīng)序列測定，序列長為1450bp，與預(yù)期大小一致，BLAST 比對，所測序列與GenBank 上登錄的禽多殺性巴氏桿菌相應(yīng)序列同源，相似性在99.2%以上。根據(jù)以上結(jié)果，可判定分離菌是多殺性巴氏桿菌。

1.4 動物試驗

取健康雌性昆明鼠4 只，測定培養(yǎng)菌液濃度，腹腔注射分離菌的培養(yǎng)液，每只注射200μL，對照組注射相同體積的TSB 培養(yǎng)基。觀察發(fā)病及死亡情況。分離菌接種昆明鼠后，18h 內(nèi)全部死亡，對照組到第5 天仍存活。說明分離菌的毒力較強。

2 臨床治療試驗

2.1 藥敏試驗

選用臨床常用的13 種抗菌藥的藥敏紙片，參照CSLI 方法進(jìn)行藥敏試驗，以抑菌圈直徑大小判定藥物的敏感程度。結(jié)果，多殺性巴氏桿菌分離株對氨芐西林、復(fù)方新諾明、氟苯尼考、土霉素、磺胺異噁唑和丁胺卡那等6 種抗生素耐藥；對恩諾沙星、青霉素、頭孢噻肟、阿莫西林、氧氟沙星和頭孢曲松高度敏感。

2.2 臨床治療

根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，全群用10%阿莫西林按500g/t 飼料進(jìn)行拌料飼喂，連用3d；病情嚴(yán)重的進(jìn)行隔離，肌注頭孢曲松1 次/d，連續(xù)注射3d，水中加阿莫西林300g/t 飲水，連用3d；雞舍內(nèi)加強消毒。

在飼料中添加阿莫西林，3d 后，雞群基本穩(wěn)定，無死亡；病情嚴(yán)重的雞，經(jīng)注射和水中添加藥物，3d后也開始穩(wěn)定，5d 后無死亡,用藥10d 后雞群恢復(fù)正常。

3 討論

禽霍亂是由禽多殺性巴氏桿菌引起禽類的一種急性敗血性傳染病，發(fā)病率高，死亡率高，是造成養(yǎng)禽經(jīng)濟(jì)損失的重要傳染病之一。尤其是近年來的規(guī)?；B(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展、抗生素濫用、疫苗保護(hù)率不高等因素的作用下，禽霍亂有重新流行的趨勢。

本案例從病死率較高的雞群中分離細(xì)菌，經(jīng)鑒定為禽多殺性桿菌，致病性很強，耐藥性較強。根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選擇使用合適的藥物，用于臨床治療，很快控制了病情。

多殺性巴氏桿菌很容易產(chǎn)生耐藥性，因此進(jìn)行分離菌的藥敏試驗，選用敏感的抗生素進(jìn)行治療，對控制該病具有重要的作用。在用藥的同時，也要加強管理，做好防暑、降溫或保溫，對欄舍進(jìn)行消毒，隔離疑似病雞，可在較短的時間內(nèi)控制疫情，減少損失。