張麗潔，袁曉華，趙 園，王九菊，趙喬佳杰，魏緒倉

(陜西省人民醫(yī)院a.血液遺傳研究所；b.產(chǎn)科，西安 710068)

臨床上約有10%的育齡期夫婦會出現(xiàn)稽留流產(chǎn)、復發(fā)性流產(chǎn)、胚胎停育、胎兒發(fā)育畸形等不良孕產(chǎn)，其病因十分復雜，除與孕婦自身的子宮發(fā)育、內(nèi)分泌、感染、免疫等因素有關(guān)外，還與夫婦染色體異常等遺傳因素有關(guān)。常見的染色體異常分為染色體畸變和染色體多態(tài)性。本文采取G顯帶染色體核型方法對466例不良孕產(chǎn)史夫婦進行細胞遺傳學分析，以探討染色體異常與不良孕產(chǎn)史的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2015年1月至2018年6月就診于我院生殖科門診患者，其中466例因胚胎停育、復發(fā)性流產(chǎn)、稽留流產(chǎn)、生育畸形兒等不良孕產(chǎn)史進行染色體核型檢查，年齡22～45歲，男性202例，女性264例，女性的婦科、內(nèi)分泌、免疫功能等檢查均正常。同時選取80例健康婚檢夫婦作為對照組，年齡22～38歲，男性40例，女性40例。

1.2 儀器與試劑 外周血淋巴細胞培養(yǎng)液和Chromed G吉姆薩染液分別購自廣州市達暉生物技術(shù)有限公司和上海樂辰生物科技有限公司。染色體分析采用德國ZEISS顯微鏡及染色體圖像分析系統(tǒng)。

1.3 方法 在患者知情同意的前提下，采集外周血進行淋巴細胞培養(yǎng)和染色體標本制備，然后進行胰酶消化和吉姆薩染色，顯微鏡下分析核型，每例計數(shù)20個中期分裂相，選擇5個核型進行分析，異常者增加核型分析數(shù)，必要時增加C顯帶和N顯帶分析。根據(jù)人類細胞遺傳學國際命名體制ISCN（2013）對所檢染色體進行命名。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

表1 14例畸變?nèi)旧w核型患者及其臨床表現(xiàn)

2 結(jié)果

2.1 染色體畸變 見表1。466例不良孕產(chǎn)史夫婦中畸變?nèi)旧w核型有14例，檢出率3.0 %，其中男性染色體畸變核型3例，女性畸變?nèi)旧w核型11例。14例畸變?nèi)旧w核型中結(jié)構(gòu)異常10例，其中染色體易位8例（1.72%），占畸變?nèi)旧w核型的57.14%，倒位2例（0.43%），占染色體畸變核型的14.29%，臨床多表現(xiàn)為復發(fā)性流產(chǎn)，胚胎停育，胎兒發(fā)育異常等。染色體數(shù)目異常4例（0.86%），占畸變?nèi)旧w核型的28.57%，均為女性嵌合核型，表現(xiàn)為反復自然流產(chǎn)、稽留流產(chǎn)等。80例健康婚檢夫婦中有1例為數(shù)目畸變?nèi)旧w核型（嵌合體），檢出率為1.25%，低于不良孕產(chǎn)史患者的畸變核型檢出率，但差異不具統(tǒng)計學意義（χ2=0.874，P＞0.05）。

2.2 染色體多態(tài)性 見表2。不良孕產(chǎn)史患者中染色體多態(tài)性攜帶者的發(fā)生率為13.52%（63/466），女性29例，男性34例。在80例健康婚檢夫婦中，4例攜帶染色體多態(tài)性，檢出率為5%，顯著低于不良孕產(chǎn)夫婦的多態(tài)性發(fā)生率，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=5.082，P＜0.05）。

3 討論

不良孕產(chǎn)會給育齡期夫婦帶來沉重的心理負擔。導致不良孕產(chǎn)的原因很多，染色體異常是其中一個重要因素。在不育和流產(chǎn)夫婦中，染色體畸變核型攜帶者占3%～6%，本研究中的染色體畸變核型檢出率為3.0%?；?nèi)旧w攜帶者除了會發(fā)生復發(fā)流產(chǎn)、胚胎停育等早孕期異常外，產(chǎn)出染色體病患兒的機率也較正常核型夫婦高，因此及早對有不良孕產(chǎn)史的夫婦進行染色體檢查具有重要的意義[1-2]。

本文對466例不良孕產(chǎn)史患者進行細胞遺傳學篩查，其中畸變?nèi)旧w核型14例，在14例畸變?nèi)旧w攜帶者中，11例為女性（78.6%），3例為男性（21.4%），女性攜帶者的檢出率高于男性，這與劉天盛等[3]的研究結(jié)果一致。而與付愛紅等[4]的研究結(jié)果有所不同，其發(fā)現(xiàn)男性異常染色體核型率高于女性，這可能與地域及入選標本量等有關(guān)。對照組80例健康體檢夫婦中檢出1例數(shù)目嵌合染色體畸變女性攜帶者，檢出率為1.25%，低于不良孕產(chǎn)史夫婦的畸變?nèi)旧w核型檢出率，但是差異無統(tǒng)計學意義，說明染色體異常在表型正常的人群中有一定的發(fā)生率，在未孕育子代前不會出現(xiàn)不良的臨床表現(xiàn)。本研究檢出的畸變?nèi)旧w核型中平衡易位的發(fā)生率最高，占染色體畸變核型的50%（7/14）。易位染色體經(jīng)過減數(shù)分裂形成的配子中，1/18是正常的，1/18是平衡易位的，其余的配子均是不平衡的，在與正常配子結(jié)合后，大部分將形成單體或部分單體，三體或部分三體，導致臨床上多出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎或畸形兒。本文中的1例臂間倒位涉及9號染色體的短臂2區(qū)1帶（9p21）和長臂1區(qū)1帶（9q11），該女性患者經(jīng)歷過一次胚胎停育；1例臂內(nèi)倒位發(fā)生于15號染色體，該畸變核型攜帶者為男性，其配偶經(jīng)歷過3次反復自然流產(chǎn)。倒位染色體攜帶者在孕育下一代時，理論上50%胚胎可正常發(fā)育，50%胚胎會出現(xiàn)早期流產(chǎn)或發(fā)育畸形。鑒于畸變?nèi)旧w產(chǎn)生的遺傳效應(yīng)和臨床表現(xiàn)，需對畸變?nèi)旧w攜帶者加強遺傳篩查和宮內(nèi)診斷，以防止染色體病患兒的出生[5]。

表2 63例染色體多態(tài)性患者及臨床表現(xiàn)

染色體多態(tài)性主要表現(xiàn)為異染色質(zhì)的變異，結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)集中分布于著絲粒、端粒、隨體、次縊痕和Y染色體長臂。本次針對不良孕產(chǎn)夫婦的細胞遺傳學篩查中染色體多態(tài)性的檢出率為13.52%，顯著高于對照組的健康體檢夫婦的多態(tài)性檢出率（5%）（χ2=5.082，P＜0.05）。本文不良孕產(chǎn)史夫婦檢出的多態(tài)性變異中，次縊痕變異最常見，D/G組染色體短臂和隨體區(qū)變異次之，多態(tài)性分布情況與張建芳等[6]對染色體多態(tài)性的報道有不同，但一致的是染色體多態(tài)性會對生育產(chǎn)生一定的不良影響，應(yīng)引起足夠的重視。

本研究的病例數(shù)偏少，在后續(xù)的研究中進一步增加研究對象人數(shù)，以更加準確的評估染色體異常與不良孕產(chǎn)的關(guān)系。

綜上所述，染色體異常是導致不良孕產(chǎn)的一個重要因素。除了染色體畸變外，染色體多態(tài)性變異在不良孕產(chǎn)史夫婦中檢出率較高，應(yīng)該引起足夠的重視。不良孕產(chǎn)史夫婦應(yīng)進行染色體檢查等細胞遺傳學篩查，以利于查明病因，接受適當?shù)纳笇А?/p>