李若春，周何龍，張 靜 ，梁 巧

（1.西安臨潼區(qū)人民醫(yī)院兒科，西安 710600；2.安康市中醫(yī)醫(yī)院兒科，陜西安康 725000）

上呼吸道感染是一種兒科常見病，其易引起鼻、鼻竇和咽喉部的感染[1]。病毒感染、細(xì)菌感染或支原體、衣原體感染等都會(huì)誘發(fā)上呼吸道感染的發(fā)生[2-3]。通常情況下寄生于上呼吸道的菌群，在機(jī)體抵抗力降低時(shí)可引起機(jī)體局部以及全身的感染[4-5]。因此了解學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群的分布及其與上呼吸道感染和急性鼻竇炎的關(guān)系有利于預(yù)防和治療學(xué)齡前兒童上呼吸道感染和急性鼻竇炎的發(fā)生和發(fā)展，具體報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究選取我市某幼兒園共94例學(xué)齡前兒童為研究對(duì)象，年齡在4～7周歲，對(duì)其進(jìn)行為期一年（2015年9月～2016年8月）的前瞻性研究。分別收集研究對(duì)象的人口學(xué)信息、病史和暴露史（包括家中寵物、地毯、父親吸煙等），對(duì)研究對(duì)象入組時(shí)和四季（春分、夏至、秋分、冬至）以及一年內(nèi)出現(xiàn)上呼吸道感染或急性鼻竇炎癥狀的隨機(jī)時(shí)間進(jìn)行采樣分析。研究對(duì)象入組前需征得家長(zhǎng)或法定監(jiān)護(hù)人同意并簽署知情同意書，兒童身體健康。排除標(biāo)準(zhǔn)：具有先天或獲得性免疫缺陷者；面部畸形者；采樣前30天內(nèi)服用過(guò)抗生素者；研究過(guò)程中脫落者；采樣時(shí)患感冒者；慢性中耳炎、過(guò)敏性鼻炎者。

1.2 儀器和試劑 菌群計(jì)數(shù)系統(tǒng)購(gòu)于Oxford-optronix（GelCount?型），培養(yǎng)基購(gòu)于法國(guó)生物梅里埃公司。

1.3 方法

1.3.1 樣本收集：首先用無(wú)菌棉拭子取兒童鼻咽分泌物無(wú)菌封閉保存，于半小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行接種培養(yǎng)。然后將樣本分別接種于含50μg/ml萬(wàn)古霉素的5ml/dl兔血巧克力平板和5ml/dl羊血瓊脂平板上，在含8%（v/v）二氧化碳環(huán)境中35℃過(guò)夜培養(yǎng)。

1.3.2 菌種的分離、鑒定：菌種的分離、鑒定等試驗(yàn)均可參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第2版）[6]。

1.3.3 診斷依據(jù)：急性鼻竇炎：參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)收集，采用R軟件及其程序包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群分布及其影響因素 見表1，表2。對(duì)94例學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群分布進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有9種細(xì)菌，共分離954個(gè)菌株，其中以鏈球菌屬（25.26%）、奈瑟菌屬（20.23%）、嗜血桿菌屬（17.19%）和莫拉氏菌屬（11.74%）分布為主。影響學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群分布的主要因素有季節(jié)（r2=0.137，P＜0.01）、急性鼻竇炎史（r2=0.070，P＜0.01）、冠狀病毒感染史（r2=0.048，P ＜0.05）和家中有吸煙者（r2=0.048，P＜0.05）。

2.2 鼻咽部菌群與上呼吸道感染的關(guān)系 見表3。鼻咽部菌群與上呼吸道感染關(guān)系探究結(jié)果顯示鼻咽部菌群數(shù)與上呼吸道感染次數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（F=6.579，P =0.002）。另外，相較于未感染兒童，首次感染時(shí)間間隔小于60天的菌群數(shù)降低（P＜0.001）。

表1 學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群分布（n=954）

表2 影響學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群分布的因素

表3 上呼吸道感染次數(shù)、首次感染時(shí)間間隔 與鼻咽部菌群種類的關(guān)系

2.3 鼻咽部菌群與急性鼻竇炎的關(guān)系 94例學(xué)齡前兒童1年內(nèi)發(fā)生急性鼻竇炎的共有54例,菌群數(shù)（±s）為11.98±2.34，未發(fā)生急性鼻竇炎的有40例，菌群數(shù)（±s）為24.65±4.19，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明發(fā)生急性鼻竇炎會(huì)使鼻咽部菌群數(shù)顯著減少。

3 討論

正常情況下，兒童鼻咽部菌群與宿主之間保持著動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系，一旦失衡，兒童就有可能出現(xiàn)上呼吸道感染[8]。本研究結(jié)果表明學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群分布主要以鏈球菌屬、奈瑟菌屬、嗜血桿菌屬、莫拉氏菌屬為主，這與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的結(jié)果相似。探究影響鼻咽部菌群分布的主要因素（如年齡[10]、季節(jié)[11]和既往病史[12-16]），結(jié)果顯示季節(jié)（r2=0.137，P＜0.01）、急性鼻竇炎史（r2=0.070，P＜0.01）、冠狀病毒感染史（r2=0.048，P＜0.05）和家中有吸煙者（r2=0.048，P＜0.05）與鼻咽部菌群分布顯著相關(guān)。

鼻咽部菌群與上呼吸道感染關(guān)系探究結(jié)果顯示鼻咽部菌群數(shù)與上呼吸道感染次數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（F=6.579，P=0.002）。另外，相較于未感染兒童，首次感染時(shí)間間隔小于60天的菌群數(shù)降低（P＜0.001）。

94例學(xué)齡前兒童一年內(nèi)發(fā)生急性鼻竇炎的共有54例、未發(fā)生急性鼻竇炎的有40例，研究鼻咽部菌群和急性鼻竇炎之間關(guān)系的結(jié)果表明發(fā)生急性鼻竇炎會(huì)使鼻咽部菌群數(shù)顯著減少（P＜0.05）。

綜上，健康學(xué)齡前兒童鼻咽部菌群與急性鼻竇炎和上呼吸道感染有關(guān)，本研究為科學(xué)有效的預(yù)防學(xué)齡前兒童急性鼻竇炎和上呼吸道感染的發(fā)生提供了依據(jù)和基礎(chǔ)，本課題組將進(jìn)一步探究鼻咽部菌群與兒科常見疾病之間的相互關(guān)系。