陳 蓮 王璐璐 林河通 * 林藝芬 陳藝暉

（1 閩南師范大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 福建漳州 363000

2 福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院 福州 350002

3 亞熱帶特色農(nóng)產(chǎn)品采后生物學(xué)（福建農(nóng)林大學(xué)）福建省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 福州 350002

4 閩臺特色園林植物福建省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 福建漳州 363000

5 福建農(nóng)林大學(xué)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后技術(shù)研究所 福州 350002）

臺灣青棗（Ziziphus mauritiana Lamk.）又稱印度棗、毛葉棗、滇刺棗，為鼠李科棗屬，熱帶亞熱帶重要的果樹。果實(shí)呈圓形或橢圓形，氣味清香，果肉脆甜多汁，適宜鮮食。臺灣青棗果實(shí)富含維生素、礦物質(zhì)、纖維素且果實(shí)體外抗氧化和抗菌能力較強(qiáng)[1-2]。然而，臺灣青棗果實(shí)采后貯運(yùn)期間易發(fā)生病害，引起果實(shí)品質(zhì)劣變，貨架期在1周左右[3-4]。筆者們前期研究發(fā)現(xiàn)，“中青”臺灣青棗果實(shí)在采后貯藏第6天果皮出現(xiàn)可見凹陷病斑，失去商品價(jià)值[4]。臺灣青棗果實(shí)采后由病害引起的果實(shí)腐爛現(xiàn)象極其嚴(yán)重，損失高達(dá)40%。如何減少臺灣青棗果實(shí)采后病害所造成的損失，已成為臺灣青棗果實(shí)采后商品化處理亟待解決的問題[5-6]。

Singh等[7-8]從采前臺灣青棗果實(shí)表面分離出32種真菌，并對成熟果實(shí)人工接種分離出病原菌，結(jié)果發(fā)現(xiàn)分離出的大部分真菌能引起臺灣青棗果實(shí)不同程度的腐爛，因此認(rèn)為臺灣青棗果實(shí)在采前、采后及運(yùn)輸貯藏過程中易被真菌侵染，貯藏期間發(fā)生病害而引起腐爛，特別是成熟度高的臺灣青棗果實(shí)，其中黃曲霉（Aspergillus flavus）在整個(gè)過程中均存在并引起采后腐爛。Singh等[9]進(jìn)一步從采后臺灣青棗果實(shí)中分離出18種真菌，發(fā)現(xiàn)黃曲霉感染與果實(shí)腐爛相關(guān)系數(shù)為85.7%，導(dǎo)致維生素C大量流失。Surolia等[10]從55種臺灣青棗果實(shí)中分離出影響果實(shí)貯藏并與采后病害有關(guān)的12株菌種。趙丹丹等[11]從市售的臺灣青棗中分離出互隔交鏈孢（Alternaria alternata）、草莖點(diǎn)霉（Phoma herbarum）、木賊鐮刀菌（Fusarium equiseti）、黑附球菌（Epicoccum nigrum）等共 24 株霉菌和6株細(xì)菌。真菌病害在臺灣青棗果實(shí)采后貯運(yùn)過程最常發(fā)生，為減少采后病害損失，殺菌劑處理可有效抑制鏈格孢（Alternaria alternata）、曲霉菌（Aspergillus niger）等真菌引起的采后果實(shí)腐爛[12-14]。Nallathambi等[13]用木霉屬（Trichoderma）和殺菌劑處理采后臺灣青棗果實(shí)，認(rèn)為木霉和低濃度殺菌劑結(jié)合使用可完全控制臺灣青棗采后鏈格孢引起的病害。目前臺灣青棗果實(shí)采收后一般采用化學(xué)防腐劑處理，常溫下貯運(yùn)[15]。人們多年來連續(xù)使用化學(xué)防腐劑進(jìn)行病菌控制，使得病菌產(chǎn)生抗藥性，不僅降低化學(xué)防腐劑的防腐保鮮效果，還造成果蔬產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留，直接危害人們健康，污染環(huán)境。人們迫切希望采用一種非化學(xué)方法來延緩臺灣青棗果實(shí)后熟衰老，增強(qiáng)采后抗病性，減輕采后腐爛，延長貨架期。

1-甲基環(huán)丙烯（1-MCP）因安全、無毒和使用方便而被廣泛用于果蔬采后商品化處理，從而延長貯藏壽命及貨架期。近年來研究發(fā)現(xiàn)適宜濃度1-MCP處理不僅能有效控制采后果實(shí)的果肉軟化和腐爛問題，而且在誘導(dǎo)果實(shí)抗病性方面效果尤為顯著，如1-MCP處理能有效抑制棗、楊桃、蘋果、獼猴桃、芒果等采后病害[16-22]；林媛等[17]研究發(fā)現(xiàn)楊桃果實(shí)采收后經(jīng)1-MCP處理可提高果實(shí)抗病性，認(rèn)為這與抗病相關(guān)酶活性誘導(dǎo)上升有關(guān)；張艷宜等[18]、周曉婉等[19]進(jìn)一步將1-MCP處理的采后獼猴桃、蘋果果實(shí)接種灰霉菌（Botrytis cinerea）后在20℃下貯藏，結(jié)果表明1-MCP處理顯著抑制病斑的擴(kuò)大速度，提高抗病相關(guān)酶（PAL，GLU，CHI）活性；Xu 等[20]、Li等[21]和Du 等[22]將采收后的芒果、蘋果、西紅柿果實(shí)先分別接種炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、青霉菌（Penicillium expansum）、灰霉菌后再進(jìn)行1-MCP處理，結(jié)果表明1-MCP處理明顯抑制采后腐爛，延長果實(shí)品質(zhì)，同時(shí)還進(jìn)行了1-MCP對主要致病菌炭疽菌、青霉菌、灰霉菌的離體抑菌試驗(yàn)，首次報(bào)道1-MCP在體外可直接抑制炭疽菌、青霉、灰霉的孢子萌發(fā)和菌絲生長。另有研究報(bào)道對鏈格孢的體外抑菌實(shí)驗(yàn)，1-MCP無抑制作用[23]。Jiang等[24]研究不同濃度1-MCP處理對草莓果實(shí)采后病害的控制，提出病害的控制與抗病相關(guān)酶PAL及其產(chǎn)物酚類物質(zhì)有關(guān)。張艷宜等[18]、周曉婉等[19]進(jìn)一步將1-MCP處理的采后獼猴桃、蘋果果實(shí)接種灰霉菌，發(fā)現(xiàn)果實(shí)PAL酶活性上升，總酚、類黃酮和木質(zhì)素的含量增加，病害得到有效的控制。筆者前期研究表明1.8μL/L 1-MCP處理可減少臺灣青棗果實(shí)采后腐爛。到目前為止，未見1-MCP處理對采后臺灣青棗果實(shí)貯藏期間病害控制效果及抗病相關(guān)酶活性影響的研究報(bào)道。本文研究“中青”臺灣青棗果實(shí)采收后，用1.8μL/L 1-MCP處理后對果實(shí)貯藏期間病害發(fā)生、總酚、木質(zhì)素及抗病相關(guān)酶活性的影響，以期為臺灣青棗果實(shí)采后病害控制新技術(shù)的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料及前處理

以約八成熟采自福建省漳州平和縣山格鎮(zhèn)示范科技果園的“中青”臺灣青棗（Ziziphus mauritiana Lamk.cv.Zhongqing）為試驗(yàn)材料。果實(shí)采收當(dāng)天運(yùn)至福建農(nóng)林大學(xué)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后技術(shù)研究所。剔除傷病蟲果，把經(jīng)過挑選的大小和色澤基本一致的健康果實(shí)用清水清洗后晾干待用。筆者們前期研究結(jié)果表明，經(jīng)1.8μL/L 1-MCP處理12 h的“中青”臺灣青棗果實(shí)品質(zhì)最好[4]。本試驗(yàn)1-MCP選取的濃度為1.8μL/L。1-MCP采用從臺灣利統(tǒng)股份有限公司購買的紙片型AnsiP-S（商品名：安喜布）。

①1-MCP處理：紙片型1-MCP按濃度要求剪裁后，用蒸餾水噴濕平放在果實(shí)上，（15±1）℃下泡沫箱內(nèi)密封處理12 h。②對照（CK）：果實(shí)在（15±1）℃下泡沫箱內(nèi)密閉12 h。上述每一處理重復(fù)3次，每次30 kg。將各組果實(shí)用0.015mm厚的聚乙烯薄膜袋包裝，每袋10個(gè)。臺灣青棗果實(shí)在（15±1）℃下貯藏，每隔3 d取樣觀察臺灣青棗果實(shí)腐爛、病害情況并測定相關(guān)指標(biāo)。

1.2 測定方法

1.2.1 果實(shí)腐爛指數(shù)和病害指數(shù)的測定 每次隨機(jī)取5袋（共50個(gè)果實(shí)），按照參考文獻(xiàn)[25]的方法測定臺灣青棗果實(shí)腐爛指數(shù)，按照參考文獻(xiàn)[26]的方法測定臺灣青棗果實(shí)感病指數(shù)。腐爛指數(shù)=Σ（腐爛級別×該級果實(shí)數(shù)）／最高腐爛級別×總果數(shù)；果實(shí)病害指數(shù)=Σ（病害級數(shù)×該級果數(shù)）/（總果數(shù)×發(fā)病最重級的代表數(shù)值）。

1.2.2 果實(shí)幾丁質(zhì)酶（CHI）和β-1，3-葡聚糖酶（GLU）活性的測定 從10個(gè)臺灣青棗果實(shí)中取果肉5.0 g，按照參考文獻(xiàn)[27-28]的方法測定臺灣青棗果實(shí)CHI和GLU活性，結(jié)果以U/mg蛋白表示。

1.2.3 果實(shí)苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的測定從10個(gè)果實(shí)中取5 g果肉，按照參考文獻(xiàn)[27]的方法測定臺灣青棗果實(shí)PAL活性，結(jié)果以U/mg蛋白表示。

1.2.4 果實(shí)總酚含量的測定 按照參考文獻(xiàn)[27]的方法測定臺灣青棗果實(shí)總酚含量，以沒食子酸作標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以mg·g-1FW表示。

1.2.5 果實(shí)木質(zhì)素含量的測定 從30個(gè)果實(shí)中取40 g果肉，按照參考文獻(xiàn)[29]的方法測定臺灣青棗果實(shí)木質(zhì)素含量。木質(zhì)素=（抽濾后重-抽濾前濾紙重）/樣品干重×100%，結(jié)果以%表示。

1.2.6 果實(shí)酶提取液的蛋白質(zhì)含量測定 按照參考文獻(xiàn)[30]的方法測定臺灣青棗果實(shí)酶提取液的蛋白質(zhì)含量。

1.3 數(shù)據(jù)分析

各指標(biāo)測定均重復(fù)3次，數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行方差分析（ANOVA），Ducan多重比較法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 1-MCP處理對臺灣青棗果實(shí)病害指數(shù)和腐爛指數(shù)的影響

由圖1a可知，臺灣青棗果實(shí)在整個(gè)采后貯藏期間，對照和1-MCP處理的果實(shí)病害發(fā)生的嚴(yán)重程度隨著貯藏時(shí)間的延長不斷加重。在貯藏0～3 d內(nèi)，對照臺灣青棗果實(shí)病害指數(shù)緩慢上升，而1-MCP處理在貯藏0～3 d內(nèi)無感病，感病指數(shù)為0；在貯藏3～15 d內(nèi)，對照臺灣青棗果實(shí)病害指數(shù)隨貯藏時(shí)間的延長快速上升，而1-MCP處理的病害指數(shù)緩慢上升；到貯藏第15天時(shí)，對照臺灣青棗果實(shí)病害指數(shù)高達(dá)0.63，病害嚴(yán)重，而經(jīng)1-MCP處理的病害指數(shù)僅為0.29。比較發(fā)現(xiàn)，在臺灣青棗果實(shí)采后整個(gè)貯藏期間，經(jīng)1-MCP處理的果實(shí)病害指數(shù)始終低于對照，且在貯藏6～15 d內(nèi)1-MCP處理極顯著（P＜0.01）低于對照，表明1-MCP處理可減輕臺灣青棗果實(shí)病害指數(shù)的上升，抑制臺灣青棗果實(shí)采后病害的發(fā)生和發(fā)展，減少采后由病害引起的腐爛損失。

由圖1b可知，臺灣青棗果實(shí)在采后貯藏過程中，對照和1-MCP處理的果實(shí)腐爛嚴(yán)重程度隨著貯藏時(shí)間的延長不斷加重。在貯藏0～3 d內(nèi)，對照和1-MCP處理的果實(shí)沒出現(xiàn)腐爛現(xiàn)象，腐爛指數(shù)為0；在貯藏3～15 d內(nèi)，對照臺灣青棗果實(shí)腐爛指數(shù)快速上升，果實(shí)腐爛程度明顯加重，腐爛指數(shù)變化很大；到貯藏第15天時(shí)，果實(shí)腐爛指數(shù)高達(dá)0.61。1-MCP處理的腐爛指數(shù)在貯藏3～9 d內(nèi)緩慢上升，果實(shí)腐爛程度逐漸加重；在貯藏9～15 d內(nèi)果實(shí)腐爛指數(shù)較快上升，果實(shí)腐爛程度明顯加重，到貯藏第15天時(shí)，1-MCP處理的腐爛指數(shù)為0.30。比較發(fā)現(xiàn)，在臺灣青棗果實(shí)采后整個(gè)貯藏期間，經(jīng)1-MCP處理的果實(shí)腐爛指數(shù)均低于對照，且在貯藏6～15 d內(nèi)1-MCP處理的腐爛指數(shù)極顯著（P＜0.01）低于對照，由此說明1-MCP處理可有效降低臺灣青棗果實(shí)貯藏期間腐爛指數(shù)的升高，減輕采后損耗。

圖1 1-MCP處理對采后臺灣青棗果實(shí)病害指數(shù)和腐爛指數(shù)的影響Fig.1 Effects of 1-MCP treatment on disease index and decay index of harvested Indian jujube fruit

2.2 1-MCP處理對臺灣青棗果實(shí)β-1，3-葡聚糖酶（GLU）活性的影響

由圖2可知，在貯藏0～6 d內(nèi)，對照臺灣青棗果實(shí)GLU活性基本沒變化；GLU活性從貯藏第6天開始快速上升，至貯藏第9天，GLU活性停止上升快速下降。與對照組相比較，1-MCP處理后果實(shí)的GLU活性在貯藏0～6 d內(nèi)緩慢上升；從貯藏第6天開始GLU活性顯著升高，在貯藏第9天GLU活性達(dá)到最大值，其活性分別是采收當(dāng)天的37.4倍、對照的1.73倍；隨后GLU活性明顯下降，而仍高于對照。由于GLU是植物體內(nèi)重要的病程相關(guān)酶之一，經(jīng)1-MCP處理的果實(shí)GLU活性在整個(gè)貯藏過程中始終高于對照，且在貯藏6～12 d內(nèi)，1-MCP處理的果實(shí)GLU活性極顯著（P＜0.01）高于對照，由此說明1-MCP處理誘導(dǎo)了GLU活性的上升，增強(qiáng)了臺灣青棗果實(shí)在貯藏期間的抗病性。

圖2 1-MCP處理對采后臺灣青棗果實(shí)β-1，3-葡聚糖酶活性的影響Fig.2 Effects of 1-MCP treatment on β-1，3-glucanase activity of harvested Indian jujube fruit

2.3 1-MCP處理對臺灣青棗果實(shí)幾丁質(zhì)酶（CHI）活性的影響

由圖3可知，在臺灣青棗果實(shí)整個(gè)貯藏期間，對照CHI活性總體呈下降趨勢，在貯藏0～3 d內(nèi)對照果實(shí)CHI活性緩慢下降，從貯藏第3天開始對照果實(shí)CHI活性快速下降，貯藏6～12 d內(nèi)對照CHI活性幾乎沒變化。與對照相比，1-MCP處理的CHI活性在貯藏0～3 d內(nèi)快速上升；隨后1-MCP處理CHI活性明顯下降，而CHI活性仍高于對照，在貯藏9～12 d內(nèi)CHI活性再次快速上升。由于CHI是植物體內(nèi)重要的病程相關(guān)酶之一，臺灣青棗果實(shí)經(jīng)1-MCP處理后果實(shí)CHI活性在整個(gè)貯藏期間始終高于對照，如在貯藏第15天時(shí)，臺灣青棗果實(shí)經(jīng)1-MCP處理后CHI活性為對照的2.45 倍，兩者差異極顯著（P＜0.01），由此表明，臺灣青棗果實(shí)采后經(jīng)1-MCP處理誘導(dǎo)果實(shí)CHI活性上升，增強(qiáng)了臺灣青棗果實(shí)在貯藏期間的抗病性。

2.4 1-MCP處理對臺灣青棗果實(shí)苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的影響

由圖4可知，在臺灣青棗果實(shí)貯藏0～3 d內(nèi)，對照果實(shí)PAL活性快速下降而1-MCP處理PAL活性較快下降；在貯藏3～6 d內(nèi)，對照果實(shí)PAL活性緩慢上升而1-MCP處理PAL活性快速上升；對照和1-MCP處理的PAL活性在貯藏6～12 d內(nèi)均下降，在貯藏12～15 d內(nèi)，對照PAL活性緩慢上升而1-MCP處理PAL活性快速下降。進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)，1-MCP處理的果實(shí)PAL活性除貯藏第3、15天外，均高于采收當(dāng)天，而對照果實(shí)PAL活性均低于采收當(dāng)天；在臺灣青棗果實(shí)整個(gè)貯藏期內(nèi)，1-MCP處理的果實(shí)PAL活性始終高于對照果實(shí)，如貯藏第6天時(shí)，1-MCP處理的果實(shí)PAL活性為0.57U/mg蛋白，對照果實(shí)PAL活性為0.21 U/mg蛋白，兩者差異極顯著（P＜0.01）。上述結(jié)果表明，1-MCP處理誘導(dǎo)果實(shí)PAL活性的上升，增強(qiáng)了臺灣青棗果實(shí)在貯藏期間的抗病性。

圖3 1-MCP處理對采后臺灣青棗果實(shí)幾丁質(zhì)酶活性的影響Fig.3 Effects of 1-MCP treatment on chitinase activity of harvested Indian jujube fruit

圖4 1-MCP處理對采后臺灣青棗果實(shí)苯丙氨酸解氨酶活性的影響Fig.4 Effects of 1-MCP treatment on phenylalanine ammonialyase activity of harvested Indian jujube fruit

2.5 1-MCP處理對臺灣青棗果實(shí)總酚和木質(zhì)素含量的影響

由圖5a可知，1-MCP處理和對照果實(shí)總酚含量在貯藏0～3 d內(nèi)快速下降，到第3天達(dá)到最低值，1-MCP處理的果實(shí)總酚含量為對照總酚含量的1.1倍；之后對照果實(shí)總酚含量快速上升，從貯藏第9天開始對照果實(shí)總酚含量開始下降直到貯藏結(jié)束；而1-MCP處理從貯藏第3天開始果實(shí)總酚含量快速上升，至貯藏第12天1-MCP處理的果實(shí)總酚含量才開始下降，經(jīng)1-MCP處理的臺灣青棗果實(shí)總酚含量除貯藏第3、15天外均高于采收當(dāng)天。比較發(fā)現(xiàn)，在整個(gè)貯藏期間1-MCP處理的果實(shí)總酚含量始終高于對照果實(shí)，如貯藏第12天1-MCP處理的果實(shí)總酚含量為對照的1.15倍，兩者差異極顯著（P＜0.01）。以上說明臺灣青棗果實(shí)采后經(jīng)1-MCP處理誘導(dǎo)果實(shí)總酚的生成和積累，增強(qiáng)了臺灣青棗果實(shí)在貯藏期間的抗病性。

由圖5b可知，1-MCP處理和對照果實(shí)木質(zhì)素含量在貯藏0～6 d內(nèi)快速上升，在貯藏第6天時(shí)，1-MCP處理和對照果實(shí)木質(zhì)素含量達(dá)到最高值，1-MCP處理的果實(shí)木質(zhì)素含量為對照的1.38倍。對照果實(shí)木質(zhì)素含量隨后快速下降，在第9天時(shí)達(dá)到最低值，隨后上升。而1-MCP處理的果實(shí)木質(zhì)素含量在貯藏6 d后下降。進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)，在臺灣青棗采后整個(gè)貯藏期間，1-MCP處理的果實(shí)木質(zhì)素含量始終高于采收當(dāng)天且均高于對照。如貯藏第9天1-MCP處理的果實(shí)木質(zhì)素含量為對照的4.48倍，采收當(dāng)天的4.3倍，上述結(jié)果表明，1-MCP處理誘導(dǎo)了臺灣青棗果實(shí)木質(zhì)素的生成和積累，增強(qiáng)了果實(shí)采后抗病性。

圖5 1-MCP處理對采后臺灣青棗果實(shí)總酚和木質(zhì)素含量的影響Fig.5 Effects of 1-MCP treatment on total phenolics and lignin content of harvested Indian jujube fruit

3 討論

采后臺灣青棗果實(shí)病原菌侵染導(dǎo)致貯藏期間的腐爛損失高達(dá)40%[5-6]。人們常用殺菌劑處理采后臺灣青棗果實(shí)來抑制由病害引起的腐爛[11-13]。由于殺菌劑殘留和環(huán)境污染等問題，人們傾向?qū)ふ倚碌木G色環(huán)保的保鮮處理方法。誘導(dǎo)果蔬自身的抗病性來減輕果蔬采后病害，被認(rèn)為是最環(huán)保、最有效的辦法[5-6，31]。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，植物乙烯具有兩面性，一方面促進(jìn)采后果蔬衰老成熟，有利于采后病原菌的侵染，另一方面在果蔬遭受病原菌侵染后調(diào)節(jié)系統(tǒng)獲得抗性（Systemic acquired resistance，SAR）和誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性（Induced systemic resistance，ISR）發(fā)展的信號網(wǎng)絡(luò)中起著關(guān)鍵作用[32-34]。1-MCP（新型乙烯受體抑制劑）由于其無毒、環(huán)保、方便的特性被廣泛用于果蔬貯藏保鮮并用于研究乙烯在果蔬誘導(dǎo)抗病性中的作用。近幾年來，人們研究發(fā)現(xiàn)適宜濃度的乙烯受體抑制劑1-MCP處理能有效抑制臺灣青棗、棗、楊桃、獼猴桃、蘋果等果實(shí)采后病害的發(fā)生和發(fā)展[4，16-21]。張艷宜等[18]、周曉婉等[19]用1-MCP分別處理采后獼猴桃、蘋果果實(shí)后接種灰霉菌，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1-MCP處理能有效抑制接種后病斑的面積和深度的擴(kuò)大。本文研究表明，1.8μL/L 1-MCP處理能有效抑制臺灣青棗果實(shí)采后貯藏期間病害指數(shù)（圖1a）和腐爛指數(shù)（圖1b）的上升。

蘋果果實(shí)采后經(jīng)1-MCP處理后接種灰霉菌，貯藏期間腐爛率低而且在1-MCP處理的果實(shí)中觀察到病程相關(guān)蛋白（CHI，GLU，PAL）活性的升高，認(rèn)為1-MCP可能通過誘導(dǎo)抗病相關(guān)酶活性的升高來減輕采后果實(shí)的腐爛[19]。病程相關(guān)蛋白β-1，3-葡聚糖酶（GLU）、幾丁質(zhì)酶（CHI）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）被認(rèn)為在植物防御中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用[35]。GLU能通過降解病原體細(xì)胞壁而直接作用于病原體，或通過誘導(dǎo)細(xì)胞釋放寡糖而誘導(dǎo)防御反應(yīng)[36]。幾丁質(zhì)酶通過催化構(gòu)成侵染果實(shí)的真菌細(xì)胞壁成分幾丁質(zhì)水解而直接作用于病原體。而單一幾丁質(zhì)酶的抑菌活性很弱，這是因?yàn)檎婢墒鞎r(shí)其頂端的幾丁質(zhì)酶層被其它物質(zhì)如β-1，3-糖苷等包裹，幾丁質(zhì)酶沒辦法接觸到菌絲內(nèi)的幾丁質(zhì)[37]。如GLU和CHI兩種酶共同作用于真菌細(xì)胞壁可大大提高單一抗病相關(guān)酶的抗病性。人們認(rèn)為，植物對真菌感染的防御機(jī)制之一是細(xì)胞內(nèi)CHI和GLU配合共同作用水解入侵真菌細(xì)胞壁聚合物[38]。本文研究表明，臺灣青棗果實(shí)經(jīng)1-MCP處理后GLU和CHI活性在貯藏前期（0～3 d）均升高，兩種抗病相關(guān)酶共同水解入侵果實(shí)的真菌細(xì)胞壁，直接作用于病原體增強(qiáng)采后果實(shí)對病菌的抗性（圖2、3）；貯藏第9天，1-MCP處理的果實(shí)GLU活性達(dá)到最大值（圖3），說明1-MCP可能通過誘導(dǎo)臺灣青棗果實(shí)增加GLU的合成，增強(qiáng)對入侵真菌細(xì)胞壁的水解能力從而抑制侵染真菌的生長與繁殖，增強(qiáng)抗病性。蘋果果實(shí)1-MCP處理后接種灰霉菌，不僅果實(shí)病害的發(fā)展受到抑制而且在1-MCP處理的果實(shí)中檢測到苯丙氨酸途徑PAL活性的上升，認(rèn)為1-MCP可能通過誘導(dǎo)PAL活性的升高來降低采后蘋果果實(shí)的腐爛[19]。PAL作為苯丙氨酸途徑的第一個(gè)酶，與植物體內(nèi)抗病性相關(guān)代謝產(chǎn)物（酚類化合物、木質(zhì)素、植保素）的生物合成密切相關(guān)，其代謝產(chǎn)物酚酸參與植保素的積累，木質(zhì)素的生物合成和結(jié)構(gòu)性障礙的形成，起間接抵抗病原體的主要作用[39-40]。Paradeep等[41]研究認(rèn)為，臺灣青棗果實(shí)的化學(xué)組成，如TSS、糖、葉綠素等對果實(shí)采后抗病性無明顯作用。本文研究表明，在臺灣青棗果實(shí)整個(gè)貯藏期間，1-MCP處理的PAL活性、總酚和木質(zhì)素含量一直保持在較高水平（圖4、5a、5b），說明 1-MCP 可能通過誘導(dǎo)或活化苯丙氨酸途徑關(guān)鍵酶PAL，促進(jìn)抗病物質(zhì)總酚、木質(zhì)素的生成和積累，加快木質(zhì)素等結(jié)構(gòu)性障礙的形成，而起到抵抗病原體的作用，增強(qiáng)了抗病性。

4 結(jié)論

1-MCP處理可能啟動(dòng)了臺灣青棗抗病相關(guān)蛋白應(yīng)答，一方面通過誘導(dǎo)抗病相關(guān)酶（CHI和GLU）活性的上升，直接降解病原菌細(xì)胞壁，形成采后抗病性的第一道防線；另一方面通過誘導(dǎo)PAL活性上升，激活苯丙氨酸途徑，增加總酚和木質(zhì)素的生成和積累，加快結(jié)構(gòu)性障礙的形成，形成采后抗病性第二道防線。兩道防線共同作用增強(qiáng)了貯藏期間臺灣青棗果實(shí)的抗病性，減少由采后病害引起采后損耗，降低腐爛率和病害指數(shù)，延長了果實(shí)的貯藏壽命和貨架期。