陳圣治，吳明松,2,3*，魏雪寧，王昌盛，劉博，雷超

(1.東北大學(xué)秦皇島分校 資源與材料學(xué)院，河北 秦皇島 066004;2.東北大學(xué) 資源與土木工程學(xué)院，沈陽 110819;3.秦皇島市節(jié)水治污與生態(tài)修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 秦皇島 066004)

我國是農(nóng)業(yè)大國，每年果蔬產(chǎn)量很大，但是由于儲(chǔ)運(yùn)和保鮮技術(shù)的不成熟，水果和蔬菜在運(yùn)輸和儲(chǔ)藏過程中損耗相當(dāng)嚴(yán)重[1]。國家農(nóng)副產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心研究發(fā)現(xiàn)，我國每年生產(chǎn)的果蔬損失率高達(dá)25%～30%，價(jià)值近800億元人民幣。而發(fā)達(dá)國家果蔬損失率普遍控制在5%以下，美國則僅為1%～2%。因此，研究蔬果保鮮技術(shù)的開發(fā)與推廣迫在眉睫。

二氧化氯(ClO2)作為一種廣譜、高效、安全的消毒劑，可以有效地殺滅微生物[2]。ClO2在消毒過程中與有機(jī)物發(fā)生的反應(yīng)主要是氧化反應(yīng)，不會(huì)產(chǎn)生氯仿等有害物質(zhì)，無二次污染[3]，是一種性能優(yōu)良、效果最好的食品保鮮劑?！吨腥A人民共和國食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB2760-1996)》將穩(wěn)定性ClO2列入食品添加劑中作防腐劑，使用范圍為果蔬保鮮、魚類加工。該標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)將ClO2列為食品加工助劑。近些年，國內(nèi)外對(duì)ClO2在蔬果保鮮中應(yīng)用研究日益增多，本文對(duì)該領(lǐng)域的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為實(shí)際應(yīng)用提供參考。

1 二氧化氯的保鮮機(jī)理

在儲(chǔ)運(yùn)過程中，由于果蔬細(xì)胞中的代謝活動(dòng)，蛋氨酸被氧化生成乙烯和CO2，促進(jìn)果蔬的成熟和衰老。ClO2能阻止蛋氨酸分解產(chǎn)生乙烯，并且能破壞已經(jīng)生成的乙烯，延緩果蔬的成熟、衰老[4]。同時(shí)，ClO2可以抑制腐敗菌的生長，不與脂肪酸反應(yīng)，不影響食品的品質(zhì)[5]。ClO2能釋放原子態(tài)氧和次氯酸分子，具有強(qiáng)烈的氧化性。在與微生物接觸時(shí)，能迅速通過細(xì)胞膜，ClO2與半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸等特定氨基酸反應(yīng)，改變6-磷酸葡萄糖脫氫酶的活性,使得磷酸戊糖途徑受阻，微生物無法正常進(jìn)行糖類的代謝，繼而死亡[6-7]。近年來，研究表明ClO2對(duì)質(zhì)粒DNA有實(shí)質(zhì)性的損傷作用[8]。ClO2使脫氧核糖核苷三磷酸混合物(dNTPs)的OD260下降54.23%以上，推測(cè)ClO2破壞了嘧啶堿和嘌呤堿的共軛雙鍵。DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生變化導(dǎo)致細(xì)菌不能進(jìn)行正常的DNA表達(dá)，無法通過DNA轉(zhuǎn)錄翻譯合成生命必須的蛋白質(zhì)，最終死亡[7]。控制腐敗菌的生長。適量的ClO2處理可以抑制果實(shí)的呼吸強(qiáng)度[9-14]，減少貯藏期間的營養(yǎng)消耗。抑制多酚氧化酶(PPO)和過氧化物酶(POD)的活性[15-18]，減輕酶促褐變反應(yīng)的程度。因此將ClO2用于蔬果保鮮，可有效延長果蔬的運(yùn)輸和貯存時(shí)間，保持良好風(fēng)味和口感。

2 二氧化氯在水果保鮮中的應(yīng)用

蘋果作為一種常見水果，生產(chǎn)過程中的貯藏保鮮問題尤為突出。在采收、包裝、貯運(yùn)過程中，果柄對(duì)于果實(shí)的擠、壓、刺傷，造成的機(jī)械損傷最為嚴(yán)重，占蘋果總數(shù)的20%～40%，是貯藏期間侵染性病害的主要原因[19]。蘋果在成熟的過程中產(chǎn)生大量乙烯，故蘋果的貯運(yùn)保鮮應(yīng)當(dāng)注意乙烯的積累。趙明慧[20]等人的研究結(jié)果表明，用50 mg/L的ClO2溶液噴灑采前的紅富士蘋果，可以明顯的去除蘋果表面的菌落；保持冷藏期間蘋果的硬度，有效延緩可滴定酸含量的減少；并且抑制呼吸強(qiáng)度，降低乙烯含量；從而降低蘋果在冷藏期間的腐爛程度，降低冷藏期間質(zhì)量損失，可有效延長貯存期。

獼猴桃在生長發(fā)育期間易發(fā)生各種病害，并且長期潛伏至獼猴桃成熟甚至衰敗時(shí)病發(fā)；在運(yùn)輸和儲(chǔ)藏過程中的碰撞造成的機(jī)械損傷也會(huì)引發(fā)微生物感染[21]。田紅炎[12]等人研究表明60 mg/L的ClO2溶液采前處理獼猴桃可有效清除獼猴桃表面的菌落，并且在冷藏期間能保持果實(shí)的硬度，降低呼吸速率、乙烯釋放速率失重和腐爛指數(shù)，抑制可溶性固形物含量的升高，提高POD和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性，從而延長貯藏期。龍明秀[22]研究表明固載ClO2在常溫下，對(duì)“米良”獼猴桃病害組織中分離出的漆斑菌屬、莖點(diǎn)菌屬、交鏈孢霉屬的三組最強(qiáng)致病菌株有抑制效果，在2 ℃下，可完全抑制。張方艷[23]等人研究ClO2聯(lián)合CMC對(duì)中華獼猴桃的保鮮效果，發(fā)現(xiàn)25 d后，對(duì)照組的好果率為14%，80 mg/L的ClO2、80 mg/L ClO2+20.0 g/L CMC處理后好果率相對(duì)于對(duì)照組分別提升157%和271%。該方法中ClO2能殺滅獼猴桃表面的腐敗菌，而CMC則能在獼猴桃表面形成一層微氧環(huán)境，降低呼吸作用，減少水分蒸發(fā)和CO2的損失，能夠有效的降低果實(shí)的失重萎縮。為獼猴桃常溫貯藏方法研究提供一種思路。

葡萄在采摘過程中容易受到機(jī)械損傷，運(yùn)輸、貯藏期間容易受到腐敗菌的感染，尤其霉菌，造成葡萄脫粒、腐爛，從而影響葡萄的外觀及貯藏時(shí)間。目前，國內(nèi)外使用最多的葡萄保鮮技術(shù)是SO2防腐[17]，但是SO2會(huì)漂白、傷害葡萄，使用不當(dāng)會(huì)造成SO2殘留超標(biāo)，具有一定致癌性[24-25]。集賢[17]等人研究表明ClO2溶液浸漬對(duì)葡萄采后灰霉菌的生長有較好的抑制作用。60 mg/L ClO2溶液對(duì)培養(yǎng)7 d的菌絲和8 h的孢子的抑制效果最好，抑制率分別達(dá)到98.89%和73.38%?；铙w有傷接種實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，60 mg/L和80 mg/L的ClO2溶液對(duì)葡萄采摘后灰霉菌引起的霉?fàn)€有較好的抑制效果。顧寧[26]等人用ClO2氣體處理表面接種了灰葡萄霉菌、青霉和交鏈孢霉的葡萄，發(fā)現(xiàn)殺菌率隨著ClO2濃度增加和處理時(shí)間的延長而提高。10 mg/m3ClO2氣體處理40 min可使三種霉菌均減少3.23 logCFU/g以上。同時(shí)，在此殺菌條件下貯藏90 d，有效降低腐爛率，減緩VC、還原糖和可滴定酸含量的降低，保持較好的外觀和風(fēng)味。鐘梅[11]用ClO2氣體處理葡萄，發(fā)現(xiàn)ClO2能降低葡萄果實(shí)腐爛率、脫粒率、延緩果梗褐變干枯、減少可滴定酸、VC和SSC的消耗。綜合來看，ClO2處理效果優(yōu)于SO2，且對(duì)葡萄影響更小、更加安全，避免了SO2處理后生成的亞硫化物有害殘留。

香蕉在我國北方的銷售需經(jīng)過長途運(yùn)輸和長時(shí)間的貯藏，容易造成外皮的機(jī)械損傷，受傷組織中的鞣質(zhì)或者苦命酚類物質(zhì)被氧化后會(huì)導(dǎo)致表皮褐變，影響外觀，同時(shí)，機(jī)械損傷易造成微生物的滋生，導(dǎo)致果實(shí)呼吸作用增強(qiáng)，釋放出出更多的乙烯，縮短自身和周圍果實(shí)的儲(chǔ)存時(shí)間[27]。目每隔3.5 d用0.2 μL/L的ClO2氣體處理30 min，可以顯著降低香蕉的呼吸強(qiáng)度、抑制香蕉內(nèi)源乙烯的產(chǎn)生、推遲呼吸躍變高峰、延緩果實(shí)成熟，還可降低果肉丙二醛(MDA)含量和果皮細(xì)胞膜滲透性，抑制果皮褐變，保持香蕉外觀品質(zhì)[14]。

桂圓在高溫季節(jié)成熟與采摘，且屬于非呼吸躍變型水果，采摘后果實(shí)代謝旺盛，易脫水，極易發(fā)生果皮褐變，易受到微生物感染導(dǎo)致腐爛變質(zhì)，果肉自溶[28-29]。國內(nèi)外不少學(xué)者借鑒葡萄熏硫技術(shù)進(jìn)行桂圓的殺菌保鮮，雖然可以在一定程度上殺滅果皮上的微生物，降低桂圓貯運(yùn)過程中的霉?fàn)€率，防止果皮褐變。但是這種方法同樣會(huì)產(chǎn)生SO2殘留，損傷果肉和危害食用者的健康[30]。泰國的Nitiya Guntiya[31]等人研究發(fā)現(xiàn)，ClO2降低桂圓病害的兩種機(jī)制，一是ClO2誘導(dǎo)幾丁質(zhì)酶和葡聚糖酶的活性。其次，ClO2直接破壞真菌細(xì)胞膜，抑制3種主要病原菌：枝孢菌、鐮刀菌、二孢菌在桂圓表皮的滋生。ClO2氣體熏蒸可以維持桂圓抗壞血酸和谷胱甘肽氧化還原的平衡，去除桂圓果實(shí)中過量的H2O2[32]，防止活性氧的升高，減少引起膜損傷的自由基的產(chǎn)生[33]。同時(shí)可以降低PPO和POD活性[18]，以此防止桂圓表皮發(fā)生褐變。

荔枝在儲(chǔ)藏期間易被微生物感染而引起果皮褐變和果實(shí)腐爛。Wu[34]等人用不同濃度ClO2溶液對(duì)荔枝進(jìn)行3 min浸泡處理。發(fā)現(xiàn)ClO2對(duì)荔枝炭疽孢子的滅活效果隨濃度增加而加強(qiáng)，20 mg/L時(shí)，孢子被全部滅活，有效抑制荔枝果皮因感染真菌而導(dǎo)致的褐變、腐爛。80、120 mg/L的ClO2可分別抑制住PPO、POD活性，減緩TSS和TA(可滴定酸)的降低。同時(shí)，ClO2也可抑制果實(shí)呼吸強(qiáng)度、降低乙烯釋放量，延緩果實(shí)成熟[35]。

3 二氧化氯在蔬菜保鮮中的應(yīng)用

青椒在采摘時(shí)會(huì)攜帶大量病原微生物，在采摘后的保存期間，微生物的活性及青椒的生理活性依然強(qiáng)烈，營養(yǎng)消耗和生理衰敗快，不利于貯藏保鮮[36]。杜金華[9]等人發(fā)現(xiàn)用5、10、20、50 mg/L ClO2氣體處理，10 ℃下恒溫貯藏，均能明顯抑制青椒腐敗，40 d時(shí)的腐敗率均小于對(duì)照的50%。在20 mg/L以上可顯著抑制青椒的呼吸作用，減緩VC、可滴定酸和可溶性固形物含量的降低。其中50 mg/L ClO2處理作用效果最佳，貯藏至30 d才有腐爛現(xiàn)象。5 mg/L ClO2氣體可減緩葉綠素降解，但更高濃度處理后葉綠素含量反而下降的更快，影響不顯著。

杭白菜含水量大，組織脆嫩，易受到機(jī)械損傷，采后水分蒸發(fā)快、呼吸作用旺盛，貯藏期間常出現(xiàn)脫幫、黃化、腐爛等問題。甄鳳元[33]等人研究用不同濃度ClO2氣體密閉處理杭白菜低溫貯藏對(duì)杭白菜品質(zhì)的影響。結(jié)果表明，0.57 mg/L ClO2氣體密閉處理30min效果最佳，能明顯抑制杭白菜的失水，有效減緩褐變和可溶性固形物、葉綠素和VC含量的減少；降低PPO和POD的活性。ClO2可有效抑制杭白菜軟腐病致病菌——果膠桿菌的生長、破壞細(xì)胞膜透性，有效的降低杭白菜軟腐病的發(fā)生率，且處理效果隨著ClO2濃度升高而增強(qiáng)[37]。1.50 mg/L ClO2氣體密閉處理接種果膠桿菌的杭白菜30 min后，果膠桿菌存活率為對(duì)照組的11.96%。

西蘭花具有營養(yǎng)成分豐富、口感好、獨(dú)特的食療價(jià)值等特點(diǎn)，深受許多家庭的喜愛。然而西蘭花采后呼吸旺盛，極易衰老、黃化、頸和花蕾變得松軟。鮮切西蘭花由于切割邊組織直接暴露在空氣中，更容易滋生各種微生物，導(dǎo)致西蘭花的褐變、腐爛，縮短貨架期，造成大量浪費(fèi)。0.3 μg/L的ClO2即可有效降低西蘭花的腐爛率和腐爛指數(shù)。冷藏條件下ClO2對(duì)西蘭花的呼吸強(qiáng)度沒有影響，但可有效保持葉綠素的含量，抑制了花球的黃化[38]。雖然發(fā)現(xiàn)乙烯的釋放速率有所提高，但乙烯的促衰老作用由于ClO2中和未占主導(dǎo)地位。ClO2還有利于維持西蘭花VC含量、有效抑制膜脂過氧化作用減緩MDA含量的上升。高佳[39]等人發(fā)現(xiàn)25、50、75 mg/L ClO2水溶液均可顯著抑制鮮切西蘭花貯藏過程中微生物的生長；但高濃度的ClO2會(huì)顯著降低鮮切西蘭花中的VC和葉綠素含量，導(dǎo)致切割面褐變。

菠菜是一種營養(yǎng)豐富的綠葉蔬菜。我國是最大的菠菜生產(chǎn)國，僅2016年的菠菜產(chǎn)量占世界菠菜產(chǎn)量的91%。然而，菠菜在儲(chǔ)運(yùn)過程中容易造成機(jī)械損傷，導(dǎo)致菠菜中產(chǎn)生、積累硝酸鹽，危害食用者身體健康。ClO2處理也可提高菠菜貯藏期間超氧化物歧化酶(SOD)活性，抑制BOD活性，有利于延緩衰老。50 mg/L的ClO2處理機(jī)械損傷后，可有效降低菠菜中硝酸鹽的產(chǎn)生[40]，菠菜中可溶性固形物和葉綠素含量均高于對(duì)照組，可以顯著保持機(jī)械損傷菠菜中的葉綠素含量。ClO2處理還可顯著提高菠菜貯藏期間的抗氧化能力，保存水分和葉綠素，延緩衰老[41]。75mg/L ClO2對(duì)細(xì)菌和霉菌的殺菌率分別達(dá)98.85%、80.85%，且抑菌效果保持時(shí)間最長，能有效減少微生物病害的發(fā)生，處理10 min即可有效抑制對(duì)硝酸還原酶的活性，綠色保鮮12 d。

蓮藕是我國重要的水生蔬菜，種植面積和產(chǎn)量均居我國水生蔬菜之首。蓮藕在采收之后常用高壓水槍沖洗表面及內(nèi)部附帶的污泥，導(dǎo)致其采收后易失水褐變、腐爛。ClO2處理可減小蓮藕貯藏期間失重率；有效保護(hù)色澤，感官品質(zhì)[42]，且有明顯抑菌作用，在一定范圍內(nèi)，濃度越高作用效果越強(qiáng)，有效降低腐爛率。[43]。100 mg/L的ClO2處理10 min對(duì)PPO有最好的抑制作用，處理10 d內(nèi)OVQ值(整體視覺質(zhì)量)最高[44]。

鮮切萵苣容易發(fā)生褐變，切割面細(xì)胞破裂易滋生各種微生物，導(dǎo)致腐爛、黃化，縮短貨架期。陳釗[45]用10、40、100 mg/L的ClO2溶液分別浸泡5、10、20 min。發(fā)現(xiàn)ClO2對(duì)POD活性抑制效果隨著濃度和處理時(shí)間的增加而加強(qiáng)，其中100 mg/L ClO2處理20min可有效去除萵苣表面微生物，貨架期延長250%，PPO和POD酶活性最低，對(duì)色度的保持效果最佳。由于剝皮，切片和切割造成的組織損傷，在缺水的市場(chǎng)中出現(xiàn)的微生物生長，褐變和木質(zhì)化導(dǎo)致的貨架期短和質(zhì)量惡化等問題，可用ClO2水溶液結(jié)合15%的殼聚糖溶液對(duì)竹筍涂膜處理解決。28 mg/L ClO2加殼聚糖涂膜處理可抑制呼吸速率和硬度的增加，延遲褐變和木質(zhì)化，并減少總需氧菌和酵母菌和霉菌的微生物數(shù)量。此外，ClO2和殼聚糖的組合在整個(gè)儲(chǔ)存期間抑制了苯丙氨酸氨解酶(PAL)、肉桂醇脫氫酶(CAD)、POD和PPO的活性[10]。黃程前[46]等人用6 kJ/m2的UV-C結(jié)合100 mg/L的ClO2處理鮮切毛竹筍，在0 ℃下貯藏6 d后，發(fā)現(xiàn)ClO2有效抑制了PAL、PPO和POD的活性，減少木質(zhì)素的合成和MDA的積累，延緩組織老化。減少水分損失，保持較好的感官品質(zhì)。

4 結(jié)論與展望

人們對(duì)蔬果安全和品質(zhì)要求日益提高，國內(nèi)果蔬儲(chǔ)運(yùn)和保鮮技術(shù)發(fā)展相對(duì)較慢。ClO2作為一種廣譜、高效、安全的消毒劑，可以有效地殺滅果蔬表面的致腐、致病微生物，抑制果實(shí)呼吸強(qiáng)度，減輕褐變程度，且不會(huì)影響果蔬風(fēng)味和外觀品質(zhì)，是目前國際上公認(rèn)的性能優(yōu)良的食品保鮮劑，國內(nèi)關(guān)于ClO2果蔬保鮮方面的研究比國外更加活躍，但多停留在理論研究階段，廣泛應(yīng)用的案例很少，且多停留在驗(yàn)證效果層次，對(duì)保鮮機(jī)理的研究較少。另外除現(xiàn)有國標(biāo)中提到的“穩(wěn)定型二氧化氯”之外，其他的ClO2產(chǎn)品組蔬果保鮮應(yīng)用中的適用性也需要進(jìn)一步探討。