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        牛布魯氏菌病的診斷程序及免疫

        2020-01-14 08:19:14馮輝內(nèi)蒙古自治區(qū)科爾沁右翼前旗巴日嘎斯臺鄉(xiāng)政府
        中國畜牧業(yè) 2020年20期
        關(guān)鍵詞:抗酸布魯氏菌菌落

        文│馮輝(內(nèi)蒙古自治區(qū)科爾沁右翼前旗巴日嘎斯臺鄉(xiāng)政府)

        布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的人畜共患傳染病,是世界范圍內(nèi)流行廣泛的人畜共患病之一,給畜牧養(yǎng)殖業(yè)帶來較大損失。筆者從布魯氏菌的病原、生存環(huán)境、鑒定、診斷程序和免疫幾方面進(jìn)行簡要介紹,希望為布魯氏菌病防控提供參考以及借鑒。

        一、病原特點

        布魯氏菌的菌落較小,不能游動,呈球桿狀,為革蘭氏陰性菌。由于不能通過含0.5%乙酸的改良抗酸染色技術(shù)進(jìn)行脫色,因此抗酸染色陽性。體液或組織涂片中的布魯氏菌經(jīng)抗酸染色呈特征性的成簇分布的紅色球桿菌。由于布魯氏菌的遺傳相似程度高,所以有人建議都?xì)w入馬耳他布魯氏菌。然而,這一決定在2005年發(fā)生了變化,重新認(rèn)定6種布魯氏菌。此外一些新的種屬,包括來自海洋哺乳動物和田鼠的布魯氏菌,根據(jù)血清學(xué)特性,分為流產(chǎn)布魯氏菌、馬耳他布魯氏菌、豬布魯氏菌、綿羊布魯氏菌、犬布魯氏菌、沙林鼠布魯氏菌、海豚布魯氏菌、海豹布魯氏菌。

        二、生存環(huán)境

        布魯氏菌通常存在于性成熟的雄性和雌性動物的生殖器官,每種布魯氏菌會感染特定的動物種類。被感染的動物作為傳染源通常會持續(xù)感染其他動物。感染動物排泄的細(xì)菌在潮濕環(huán)境中可以存活幾個月。通常是通過直接接觸感染的動物和流產(chǎn)相關(guān)的體液和組織來傳播。

        三、布魯氏菌的鑒定

        布魯氏菌可通過菌落的外觀形態(tài)、生化實驗、特定的培養(yǎng)需求和染料的生長抑制來鑒定。此外,與單特異性血清的凝集、對噬菌體的易感性及分子生物學(xué)方法也被用于細(xì)菌種類的鑒別。

        分離初期,流產(chǎn)布魯氏菌、馬耳他布魯氏菌和豬布魯氏菌的菌落小而光滑,3~5天后變?yōu)橛泄鉂傻?、帶藍(lán)色的、半透明的菌落。隨著培養(yǎng)時間的增加,菌落變得不透明。相反,綿羊布魯氏菌、犬布魯氏菌的菌落呈粗糙型、無光澤、黃色、不透明、易碎。布魯氏菌在血瓊脂培養(yǎng)基上不溶血。

        四、診斷程序

        布魯氏菌的診斷主要依賴血清學(xué)檢測和細(xì)菌的分離鑒定。運輸與處理樣品時應(yīng)非常小心,應(yīng)在安全柜中操作。

        實驗室檢測的樣本必須與特定的臨床癥狀相關(guān)。用MZM染色涂片法對標(biāo)本進(jìn)行檢測,尤其是胎盤絨毛小葉、胎兒真胃內(nèi)容物和子宮分泌物,常常顯示出特征性的MZN陽性球桿菌。在含有細(xì)胞的樣品中,這些細(xì)菌可能成簇出血??捎肞CR方法檢測樣品,對此方法已有不同的描述。其優(yōu)點是靈敏度高,可用于檢測少量的樣品和微生物。常用營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基來分離。培養(yǎng)基在37℃、5%~10%二氧化碳中可保存5天。雖然二氧化碳是個別細(xì)菌種類所需的特殊物質(zhì),但多數(shù)的布魯氏菌是嗜二氧化碳的。在國家根除方案中,血清學(xué)檢測用于國際貿(mào)易及鑒別被感染的牛羊群和個別動物。布魯氏菌的抗原和一些其他的革蘭氏陰性細(xì)菌如小腸結(jié)腸炎耶爾森菌O∶9血清型,在凝集實驗中產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

        五、診斷

        盡管初產(chǎn)母牛和經(jīng)產(chǎn)母牛的流產(chǎn)會預(yù)示此病,但是臨床感染沒有特異性。胎盤絨毛小葉涂片的改良的抗酸染色,顯示成簇的陽性球桿菌可確診此病,此外通過檢測胎兒皺胃內(nèi)容物和子宮排放物也可發(fā)現(xiàn)抗酸染色陽性球桿菌。流產(chǎn)布魯氏菌的分離鑒定方法已經(jīng)被確認(rèn)。分離鑒定標(biāo)準(zhǔn):菌落的特征,改良的抗酸染色陽性,高效價抗血清的細(xì)菌凝集,快速尿素酶活性。生物學(xué)鑒定試驗,已經(jīng)開發(fā)出來包含PCR分子生物學(xué)方法等。

        六、免疫

        感染布魯氏桿菌的牛難以治愈。國家撲殺計劃是以檢測和屠殺受感染牛為基礎(chǔ),通過血清學(xué)方法來檢測。幼齡母牛的預(yù)防接種是根除計劃早期的一項戰(zhàn)略性措施,當(dāng)布魯氏菌病達(dá)到較低的流行水平時可以被終止。布魯氏菌主要是細(xì)胞介導(dǎo)免疫。目前,牛主要用減毒株19(s19)疫苗,以及更新的RB51疫苗:減毒株19疫苗可在雌性小牛(5個月齡以上)接種。而成熟動物接種后可保持持續(xù)性的抗體效價。

        RB51株式是穩(wěn)定的、粗糙型突變體,它對預(yù)防動物流產(chǎn)有良好的保護(hù)作用,并且在傳統(tǒng)的布魯氏菌病監(jiān)測中不會監(jiān)測到血清學(xué)反應(yīng)。在一些國家,它是預(yù)防布魯氏菌的官方指定疫苗。

        佐劑滅活疫苗雖然保護(hù)效果不顯著,但是在過去已被用于一些國家的根除計劃中。

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