平華 ，杜遠(yuǎn)芳 ，顏世偉，馮曉元 ，李楊 ，馬智宏 *

1. 北京農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究中心（北京 100097）；2. 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（北京）（北京 100097）；3. 陜西省果業(yè)研究發(fā)展中心（陜西 710021）

獼猴桃營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，被譽(yù)為維生素C之王，此外還含有豐富的氨基酸、微量元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[1]。獼猴桃原產(chǎn)于中國(guó)，目前種植面積和產(chǎn)量均居世界第一。近年來(lái)，陜西、河南、四川、湖南、貴州、江西、浙江等省的獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，特別是陜西省，2016年栽培面積達(dá)到68 666 hm2，產(chǎn)量達(dá)到131萬(wàn) t，是中國(guó)獼猴桃生產(chǎn)第一大省[2]。目前我國(guó)栽培的獼猴桃品種多樣，主要有徐香、海沃德和紅陽(yáng)等。從果肉顏色上分為綠肉、黃肉和紅肉三大品種。獼猴桃主要病害有潰瘍病、灰霉病、褐斑病、炭疽病、根腐病、枯枝病和軟腐病等；蟲(chóng)害主要有金龜子、紅蜘蛛、葉嬋、蚧殼蟲(chóng)等[3]。隨著我國(guó)獼猴桃栽培面積的增大，各大主產(chǎn)區(qū)獼猴桃病蟲(chóng)害發(fā)生日益嚴(yán)重，農(nóng)藥使用也不斷增多[4-5]。根據(jù)中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng)數(shù)據(jù)顯示，目前獼猴桃登記農(nóng)藥有14個(gè)產(chǎn)品，涉及的有效成分僅有6種，而實(shí)際生產(chǎn)上使用的農(nóng)藥有幾十余種，主要為殺菌劑、殺蟲(chóng)劑、殺螨劑和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等，90%以上是未登記農(nóng)藥；由于未登記農(nóng)藥缺乏相應(yīng)的技術(shù)規(guī)范，生產(chǎn)上存在濫用、超劑量使用的現(xiàn)象，容易造成藥害或農(nóng)殘超標(biāo)現(xiàn)象，這就給獼猴桃質(zhì)量安全帶來(lái)一定的風(fēng)險(xiǎn)隱患[6]。因此有必要對(duì)流通市場(chǎng)環(huán)節(jié)國(guó)產(chǎn)獼猴桃產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并對(duì)其膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估。目前，我國(guó)在果品農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方面雖然已開(kāi)展了一些研究工作，但仍然處于起步階段，多采用國(guó)外的膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)[7-9]。關(guān)于獼猴桃中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的研究較少，此次試驗(yàn)分別采用污染指數(shù)法和膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法從不同角度對(duì)獼猴桃農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)開(kāi)展評(píng)估，以期客觀、全面評(píng)估獼猴桃農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)狀況，為安全生產(chǎn)和政府監(jiān)管提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈、正己烷和丙酮（HPLC級(jí)，美國(guó)Fisher公司）；無(wú)水硫酸鎂使用前先放入馬弗爐在500 ℃加熱5 h，待冷卻后再放入干燥器備用；N-丙基乙二胺（PSA）、鍵合硅固相吸附劑C18（天津艾杰爾有限公司）；0.2 μm微孔濾膜（美國(guó)PALL公司）。

單個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液，濃度為100 μg·mL-1（純度大于98%，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所）。將單個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液配成混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，試驗(yàn)時(shí)再根據(jù)需要配制成不同質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.2 儀器與設(shè)備

ACQUITY超高效液相色譜儀，Xevo TQ三重四極桿質(zhì)譜儀（配有ESI電離源，美國(guó)Waters公司）；氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（TQ 8040，日本Shimadzu公司）；高速冷凍離心機(jī)（3K30，美國(guó)Sigma公司）；純水機(jī)（美國(guó)Pall公司）；電子分析天平（XS205，瑞士梅特勒公司）；勻漿機(jī)（B-400型，瑞士布琪公司）；渦旋振蕩器（Vortex 5，德國(guó)IKA公司）。

1.3 樣品采集方法

在獼猴桃流通市場(chǎng)分別進(jìn)行調(diào)研取樣，共采集83份國(guó)產(chǎn)獼猴桃成熟果實(shí)樣品，主要品種有徐香、翠香、海沃德、紅陽(yáng)、金艷和亞特等。

1.4 方法

1.4.1 農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法

根據(jù)獼猴桃生產(chǎn)過(guò)程中農(nóng)藥使用情況，檢測(cè)殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、殺螨劑和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等62種常見(jiàn)農(nóng)藥。按化學(xué)結(jié)構(gòu)分為有機(jī)磷、有機(jī)氯、菊酯類(lèi)、氨基甲酸酯類(lèi)、三唑類(lèi)和其它類(lèi)農(nóng)藥。根據(jù)農(nóng)藥性質(zhì)不同選擇不同的檢測(cè)方法，有機(jī)磷、有機(jī)氯、菊酯類(lèi)等農(nóng)藥參照GB 23200.113—2018采用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定；氨基甲酸酯、苯并咪唑類(lèi)等農(nóng)藥參照GB/T 20769—2008采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。對(duì)于樣品中檢出的所有農(nóng)藥，當(dāng)某個(gè)樣品中該農(nóng)藥低于方法檢出限時(shí)，用1/2方法檢出限（LOD）代替。

1.4.2 質(zhì)量安全狀況評(píng)價(jià)方法

單因子污染指數(shù)法和綜合污染指數(shù)法最初主要用于環(huán)境質(zhì)量評(píng)價(jià)，在水質(zhì)評(píng)價(jià)、土壤中重金屬污染評(píng)價(jià)、大氣環(huán)境質(zhì)量評(píng)價(jià)中得到了廣泛應(yīng)用[10-11]。由于研究性質(zhì)相近，只要有相應(yīng)指標(biāo)的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)就可以，因此近年來(lái)該方法在蔬菜水果中農(nóng)藥殘留質(zhì)量安全評(píng)價(jià)中也得到了很好的應(yīng)用[12-13]。

1.4.2.1 單因子污染指數(shù)法[14]

單因子污染指數(shù)法是針對(duì)獼猴桃中某一種農(nóng)藥質(zhì)量安全狀況進(jìn)行評(píng)價(jià)，以確定該農(nóng)藥污染程度，同時(shí)可以為綜合污染指數(shù)法提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，其計(jì)算公式為式（1）：

式中：Pi為獼猴桃樣品中農(nóng)藥i的單因子污染指數(shù)值；Ci為獼猴桃樣品中農(nóng)藥i的實(shí)際測(cè)得含量，mg/kg；C0為獼猴桃中農(nóng)藥i的最大殘留限量，mg/kg，每種農(nóng)藥最大殘留限量值見(jiàn)表3。

評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：按污染嚴(yán)重程度分為四級(jí)。Pi＜1時(shí)，表示獼猴桃樣品中農(nóng)藥i安全；1≤Pi＜2時(shí)，表示獼猴桃樣品中農(nóng)藥i輕度污染；2≤Pi＜3時(shí)，表示獼猴桃樣品中農(nóng)藥i中度污染；Pi≥3時(shí)，表示獼猴桃樣品中農(nóng)藥i重度污染。

1.4.2.2 綜合污染指數(shù)法[14]

綜合污染指數(shù)法是在單因子污染指數(shù)評(píng)價(jià)方法的基礎(chǔ)上建立的，是對(duì)所有農(nóng)藥污染狀況進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)的方法，用以綜合評(píng)價(jià)獼猴桃受農(nóng)藥污染程度及污染級(jí)別，其計(jì)算公式為式（2）：

式中：P綜為獼猴桃樣品中農(nóng)藥綜合污染指數(shù)；Piave為各農(nóng)藥單因子污染指數(shù)的平均值；Pimax為各農(nóng)藥單因子污染指數(shù)最大值。

評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：按污染嚴(yán)重程度分為五級(jí)。P綜≤0.7時(shí)，表示獼猴桃污染水平為清潔，處于安全級(jí)別；0.7＜P綜≤1時(shí)，表示獼猴桃污染水平為尚清潔，處于警戒級(jí)別；1＜P綜≤2時(shí)，表示獼猴桃已經(jīng)開(kāi)始受到污染，處于輕度污染級(jí)別；2＜P綜≤3時(shí)，表示獼猴桃已經(jīng)受到中度污染，處于中度污染級(jí)別；P綜＞3時(shí)，表示獼猴桃受污染已相當(dāng)嚴(yán)重，處于重度污染級(jí)別。

1.4.3 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

采用國(guó)內(nèi)外學(xué)者廣泛使用的目標(biāo)危害系數(shù)法（Target hazard quotients，THQ），用來(lái)評(píng)價(jià)食用獼猴桃后由于農(nóng)藥殘留所帶來(lái)的健康風(fēng)險(xiǎn)。該方法不僅可用于單一農(nóng)藥污染因子的膳食暴露人體健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，還可以用來(lái)評(píng)價(jià)多種農(nóng)藥殘留聯(lián)合污染的健康風(fēng)險(xiǎn)。單一農(nóng)藥殘留暴露風(fēng)險(xiǎn)采用THQ評(píng)價(jià)，多種農(nóng)藥殘留聯(lián)合暴露風(fēng)險(xiǎn)采用HI（Hazard index）評(píng)價(jià)。該評(píng)價(jià)方法已經(jīng)在農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中得到了廣泛應(yīng)用[15-16]。

1.4.3.1 單一農(nóng)藥暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[17]

估計(jì)攝入量（Estimated daily intake，EDI）為每人每天每千克體重通過(guò)獼猴桃暴露估計(jì)攝入農(nóng)藥量（mg·kg-1·d-1），其計(jì)算公式為式（3）：

式中：C為獼猴桃樣品中檢出的農(nóng)藥含量，mg·kg-1；F為每人每天平均獼猴桃攝入量，kg；BW為人體平均體重，kg。每人每天平均獼猴桃攝入量為0.009 47 kg，平均體重為60.3 kg。

慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估采用人體每日的膳食暴露量與每日允許攝入量（Acceptable daily intake，ADI）的比值進(jìn)行評(píng)估。單一農(nóng)藥殘留慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估公式為式（4）：式中：ADI為每人每天每千克體重某種農(nóng)藥污染因子允許攝入的最大量（mg·kg-1·d-1），即人終生持續(xù)暴露在該劑量水平污染物環(huán)境下，而不會(huì)發(fā)生非致癌有害效應(yīng)的劑量。ADI值參考GB 2763—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[18]。

THQ值如果小于1，表明對(duì)暴露人群無(wú)明顯健康風(fēng)險(xiǎn)；如果大于1，表明存在明顯的健康風(fēng)險(xiǎn)，并且隨著比值的增大，相應(yīng)的健康風(fēng)險(xiǎn)增大。

1.4.3.2 農(nóng)藥多殘留聯(lián)合暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[17]

由于獼猴桃中往往檢出不止一種農(nóng)藥殘留，這就需要對(duì)農(nóng)藥多殘留的聯(lián)合暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估。多種農(nóng)藥殘留聯(lián)合暴露評(píng)估采用HI表示，用來(lái)評(píng)價(jià)農(nóng)藥殘留聯(lián)合污染的健康風(fēng)險(xiǎn)，其計(jì)算公式為式（5）：

HI值如果小于1，則表明對(duì)暴露人群無(wú)明顯健康風(fēng)險(xiǎn)；如果大于1，表明存在明顯的健康風(fēng)險(xiǎn)，并且隨著比值的增大，相應(yīng)的健康風(fēng)險(xiǎn)增大。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藥殘留狀況分析

所有獼猴桃樣品合格率為88.0%，超出限量值的比例為12.0%。在檢測(cè)的62種農(nóng)藥中，檢出22種農(nóng)藥，檢出率為35.5%；獼猴桃樣品中各個(gè)農(nóng)藥殘留量平均值均處于較低水平（表1）。由圖1可以看出，檢出率較高的5種農(nóng)藥分別為氯吡脲（75.9%）、氯氟氰菊酯（69.9%）、多菌靈（47.0%）、戊唑醇（42.2%）和苯醚甲環(huán)唑（31.3%）。檢出的農(nóng)藥除氯吡脲外，均未在獼猴桃上登記。未檢出禁限用農(nóng)藥，說(shuō)明生產(chǎn)中嚴(yán)格控制了禁限用農(nóng)藥的使用。檢出的農(nóng)藥以低毒農(nóng)藥為主，占比72.7%，中等毒農(nóng)藥占比為27.3%。其中，殺菌劑、殺蟲(chóng)劑、殺螨劑和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑所占比例分別為47.8%，43.5%，4.3%和4.3%，以殺蟲(chóng)劑和殺菌劑為主，占比達(dá)到91.3%（圖2）。樣品中農(nóng)藥檢出率為100.0%，單個(gè)樣品中檢出農(nóng)藥數(shù)量百分比見(jiàn)圖3，存在多殘留現(xiàn)象，檢出3種以上農(nóng)藥樣品所占比例為74.7%。

83份樣品中有10份樣品檢出農(nóng)藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象。檢出的超標(biāo)農(nóng)藥有氯氟氰菊酯和苯醚甲環(huán)唑，超標(biāo)率分別為8.4%和3.6%，氯氟氰菊酯超標(biāo)倍數(shù)為1.09～1.73倍（表2）。獼猴桃農(nóng)藥最大殘留限量值參照標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表3。

2.2 農(nóng)藥殘留質(zhì)量安全評(píng)價(jià)

單因子污染指數(shù)法評(píng)價(jià)結(jié)果表明，檢出的所有農(nóng)藥單因子污染指數(shù)Pi平均值均小于1，表示獼猴桃樣品中所有檢出的農(nóng)藥均處于安全水平（圖4）。圖4為Pi平均值大于0.02的6種農(nóng)藥，Pi平均值較高的3種農(nóng)藥有氯氟氰菊酯、氯吡脲和苯醚甲環(huán)唑，Pi值分別在0.005～1.73，0.005～0.989和0.005～1.26之間，7個(gè)樣品中氯氟氰菊酯Pi值在1.0～2.0之間，處于輕度污染水平；3個(gè)樣品中苯醚甲環(huán)唑Pi值在1.0～2.0之間，處于輕度污染水平，這兩種農(nóng)藥可以作為生產(chǎn)中需要重點(diǎn)控制的農(nóng)藥。

表1 獼猴桃中農(nóng)藥檢出情況

圖1 農(nóng)藥檢出率

圖2 不同類(lèi)型農(nóng)藥檢出情況

表2 檢出的超標(biāo)農(nóng)藥

表3 檢出農(nóng)藥最大殘留限量值

圖3 單個(gè)樣品中檢出農(nóng)藥數(shù)量百分比

綜合污染指數(shù)法評(píng)價(jià)結(jié)果表明，86.8%的獼猴桃樣品綜合污染指數(shù)小于0.7，污染水平為清潔，處于安全級(jí)別；8.4%的獼猴桃樣品綜合污染指數(shù)在0.7～1.0之間，污染水平為尚清潔，處于警戒級(jí)別；4.8%的獼猴桃樣品綜合污染指數(shù)在1.0～2.0之間，已經(jīng)開(kāi)始受到污染，處于輕度污染級(jí)別。所有獼猴桃樣品P綜平均值為0.32，小于0.7，說(shuō)明獼猴桃樣品中農(nóng)藥殘留整體水平為清潔，處于安全級(jí)別。

圖4 農(nóng)藥殘留單因子污染指數(shù)

2.3 農(nóng)藥殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

對(duì)獼猴桃中檢出農(nóng)藥慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了評(píng)估，檢出的22種農(nóng)藥的ADI值參照GB 2763—2016（表4）。由表4中可以看出，22種農(nóng)藥的慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)THQave值在1.85×10-7～4.70×10-4之間，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于1.0，平均值為7.38×10-5。THQmax值在7.74×10-6～9.35×10-3之間，也遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于1.0。這表明獼猴桃農(nóng)藥殘留慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)為可接受狀態(tài)，對(duì)人體無(wú)健康風(fēng)險(xiǎn)。農(nóng)藥多殘留聯(lián)合膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)HI值為1.62×10-3，也遠(yuǎn)小于1.0，說(shuō)明農(nóng)藥聯(lián)合膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)也為可接受狀態(tài)，對(duì)人體無(wú)健康風(fēng)險(xiǎn)。

以THQave計(jì)算，貢獻(xiàn)率在1.0%以上的農(nóng)藥有13種，總貢獻(xiàn)率達(dá)97.3%。貢獻(xiàn)率較高的2種農(nóng)藥為戊唑醇（29.0%）和氯氟氰菊酯（27.0%），總貢獻(xiàn)率為56.0%。其中低毒農(nóng)藥有16種，貢獻(xiàn)率為62.6%；中等毒農(nóng)藥有6種，貢獻(xiàn)率為37.4%。

2.4 不同品種風(fēng)險(xiǎn)程度分析

分別計(jì)算每個(gè)獼猴桃樣品農(nóng)藥殘留的HI值，通過(guò)比較相同品種獼猴桃HI平均值發(fā)現(xiàn)，不同品種獼猴桃風(fēng)險(xiǎn)存在一定差異，亞特＞翠香＞海沃德＞徐香＞紅陽(yáng)＞金艷（圖5）。

表4 農(nóng)藥殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及貢獻(xiàn)率

圖5 不同品種獼猴桃風(fēng)險(xiǎn)比較

2.5 果肉中農(nóng)藥殘留分析

通過(guò)對(duì)所有獼猴桃樣品果肉中農(nóng)藥殘留情況進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，果肉中僅檢出多菌靈、戊唑醇和毒死蜱3種農(nóng)藥。全果中檢出超標(biāo)的氟氯氰菊酯和苯醚甲環(huán)唑在果肉中均未檢出。僅有一個(gè)樣品中檢出3種農(nóng)藥，2個(gè)樣品檢出2種農(nóng)藥，38.6%的樣品中檢出1種農(nóng)藥，58.6%的樣品中未檢出任何農(nóng)藥。果肉中農(nóng)藥殘留水平遠(yuǎn)低于全果中殘留量，因此獼猴桃剝皮后，果肉可以放心食用。

3 結(jié)論

采用污染指數(shù)法和膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法分別對(duì)流通市場(chǎng)環(huán)節(jié)國(guó)產(chǎn)獼猴桃中農(nóng)藥殘留狀況進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，獼猴桃樣品中雖然農(nóng)藥檢出率較高，但殘留水平總體較低，污染整體水平為清潔，處于安全級(jí)別。氯氟氰菊酯和苯醚甲環(huán)唑雖然有超標(biāo)現(xiàn)象，但慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)均為可接受狀態(tài)，對(duì)人體無(wú)健康風(fēng)險(xiǎn)。膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)貢獻(xiàn)率較高的兩種農(nóng)藥為戊唑醇和氯氟氰菊酯，貢獻(xiàn)率分別為29.0%和27.0%。因此在獼猴桃生產(chǎn)中需要加強(qiáng)氯氟氰菊酯、戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑的用藥管理，指導(dǎo)農(nóng)戶科學(xué)用藥。目前我國(guó)獼猴桃上登記的農(nóng)藥種類(lèi)較少，造成了生產(chǎn)中盲目用藥的現(xiàn)象，建議加快獼猴桃農(nóng)藥登記工作?？傮w而言，國(guó)產(chǎn)獼猴桃農(nóng)藥殘留處于安全狀態(tài)，剝皮后果肉完全可以放心食用。