李程勛，徐曉俞，李愛(ài)萍*，鄭開(kāi)斌, *

1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所（福州 350013）；2. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)研究所（漳州 363005）

寒蘭是蘭科蘭屬植物，是國(guó)蘭之一，廣泛分布于中國(guó)、日本南部、朝鮮半島南端，在中國(guó)寒蘭主要分布在福建、廣東、浙江、廣西、江西、湖南、湖北、四川等地[1-2]。蘭花性平、味辛，全草有養(yǎng)陰潤(rùn)肺之療效，兼治咯血、頭暈?zāi)垦！⑸窠?jīng)衰弱、尿道感染等病癥[3]。寒蘭具有很高的商業(yè)價(jià)值[4-5]，隨著技術(shù)發(fā)展進(jìn)步，寒蘭花培育規(guī)模逐步增大，但是近期市場(chǎng)上盆栽寒蘭花的銷售量增長(zhǎng)不快，甚至出現(xiàn)不增反減現(xiàn)象，寒蘭花過(guò)剩，腐敗丟棄現(xiàn)象大量發(fā)生，且寒蘭花花期短、保鮮要求高、長(zhǎng)途運(yùn)輸困難，在玫瑰花[6]、牡丹花[7]等早期發(fā)展時(shí)都有存在這些問(wèn)題，相應(yīng)干燥技術(shù)的開(kāi)發(fā)研究使得這些花的資源優(yōu)勢(shì)得以充分發(fā)揮，因此研究寒蘭花功效成分并有針對(duì)性地研究寒蘭花干燥儲(chǔ)存技術(shù)，對(duì)于寒蘭花的市場(chǎng)應(yīng)用前景和企業(yè)生產(chǎn)開(kāi)發(fā)具有意義。黃酮類化合物是蘭花中主要功效成分[8]，可以抗菌、抗炎、抗輻射，降低血糖、膽固醇，改善血液循環(huán)，促進(jìn)傷口愈合和止痛等[9-13]。試驗(yàn)通過(guò)研究不同干燥工藝對(duì)寒蘭花總黃酮及其抗氧化能力的影響，以期為寒蘭花儲(chǔ)存、開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

寒蘭鮮花（福建省連城蘭花股份有限公司）。

1.2 試劑和儀器

無(wú)水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉（均為國(guó)產(chǎn)分析純）；蘆丁（含量大于98%，北京索萊寶科技有限公司）；1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，東京化成工業(yè)株式會(huì)社）。

電熱鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9240 A，上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；手提式粉碎機(jī)（HK-04 A，廣州市旭朗機(jī)械設(shè)備有限公司）；電子天平（Denver TP-214，丹佛儀器有限公司）；超聲儀（SB-5200 DTDN，寧波新芝生物科技股份有限公司）；離心機(jī)（Centrifuge 5804 R，eppendorf 公司）；紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（T6新世紀(jì)，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 寒蘭花干燥方法

分別采用3種不同的殺青方法和3種不同的烘干溫度對(duì)寒蘭鮮花進(jìn)行處理（見(jiàn)表1）。殺青方法采用較為傳統(tǒng)的蒸汽殺青[14]和高溫殺青[15]，烘干溫度根據(jù)前期試驗(yàn)得出，低于45 ℃烘干時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，高于75 ℃時(shí)寒蘭花斷碎較多、顏色變黑且焦味明顯。

表1 寒蘭花干燥方法

1.3.2 樣品溶液制備

將烘干至恒重的寒蘭花，用手提式粉碎機(jī)打成粉末（80目），以1︰20（g/mL）料液比加入90%乙醇溶液，混合均勻，靜置10 min，靜置后樣品超聲提?。?0 ℃）10 min，在10 000 r/min下離心5 min，取上清液即為樣品溶液。

1.3.3 不同處理寒蘭花總黃酮測(cè)定

標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備。精密稱取14.4 mg標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁于50 mL容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容至刻度線，制成質(zhì)量濃度0.288 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

顯色反應(yīng)及測(cè)定方法。取適量測(cè)定溶液于5 mL試管中，加入0.3 mL的5%亞硝酸鈉溶液，混合均勻，靜置6 min；加入0.3 mL的10%硝酸鋁溶液，混合均勻，靜置6 min；加入2 mL的4%氫氧化鈉溶液，用蒸餾水定容至刻度線，混合均勻，靜置10 min，于510 nm處測(cè)定其吸光度。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。分別移取0，0.3，0.6，0.9，1.2，1.5和1.8 mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照顯色及測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，以吸光度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品溶液測(cè)定。取樣品溶液，按照顯色及測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，得到樣品溶液的吸光度，每個(gè)樣品重復(fù)3次，并對(duì)其含量進(jìn)行計(jì)算。

式中：W為樣品總黃酮得率，%；C為待測(cè)樣品總黃酮質(zhì)量濃度，mg/mL；V為待測(cè)液體積，mL；n為稀釋倍數(shù)；m為寒蘭花質(zhì)量，g。

1.3.4 不同處理寒蘭花DPPH自由基的清除能力測(cè)定

待測(cè)樣品溶液的稀釋。取樣品溶液，分別稀釋成10%（5 mg/mL），1%（0.5 mg/mL）和0.1%（0.05 mg/mL）的溶液進(jìn)行測(cè)定。

測(cè)定方法。配制質(zhì)量濃度39.40 μg/mL的DPPH自由基無(wú)水乙醇溶液，存放冰箱，30 d內(nèi)有效；取2 mL DPPH溶液和2 mL樣品混合，靜置30 min后，于517 nm波長(zhǎng)檢測(cè)吸光度，并對(duì)其DPPH自由基清除率進(jìn)行計(jì)算。

式中：A0為DPPH自由基乙醇溶液與純水混合液吸光度；Ai為DPPH自由基乙醇溶液加等體積樣品測(cè)得吸光度；每個(gè)樣品重復(fù)3次，取平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同干燥工藝對(duì)寒蘭花總黃酮的影響

對(duì)不同干燥工藝下制成的寒蘭花總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2和圖1。

結(jié)果表明，90 ℃殺青的寒蘭花總黃酮顯著高于水蒸氣殺青和不殺青寒蘭花，不同殺青方法下的寒蘭花總黃酮整體呈現(xiàn)為：90 ℃殺青＞不殺青＞水蒸氣殺青，其中在45 ℃烘干條件下，90 ℃殺青寒蘭花總黃酮含量是水蒸氣殺青的2.29倍；在60 ℃烘干條件下，90 ℃殺青寒蘭花總黃酮含量是水蒸氣殺青的2.12倍；在75 ℃烘干條件下，90 ℃殺青寒蘭花總黃酮含量是水蒸氣殺青的1.96倍，因此得出不同殺青方法對(duì)于寒蘭花總黃酮的影響很大。不同烘干溫度下寒蘭花總黃酮得率差異不大，因此得出45，60和75 ℃這3個(gè)烘干溫度對(duì)于寒蘭花總黃酮的影響不大。

表2 不同干燥工藝下寒蘭花總黃酮含量

2.2 不同干燥工藝對(duì)寒蘭花抗氧化能力的影響

對(duì)不同干燥工藝下制成的寒蘭花進(jìn)行提取，對(duì)其提取液的DPPH自由基清除能力進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3和圖2。

結(jié)果表明，在較高濃度（10%）和較低濃度（0.1%）的寒蘭花提取液中，所有處理的寒蘭花提取液DPPH自由基清除能力沒(méi)有顯著性差異；在中等濃度（1%）寒蘭花提取液中，90 ℃殺青寒蘭花DPPH自由基的清除能力顯著強(qiáng)于其他兩種殺青方式。

圖2 10%寒蘭花提取液的DPPH自由基清除能力

圖3 1%寒蘭花提取液的DPPH自由基清除能力

圖4 0.1%寒蘭花提取液的DPPH自由基清除能力

3 討論

不同干燥工藝對(duì)于寒蘭花的總黃酮影響很大，其中，水蒸氣殺青顯著降低寒蘭花總黃酮含量，可能因?yàn)闇囟冗^(guò)高造成部分黃酮類物質(zhì)發(fā)生轉(zhuǎn)化或熱降解，而90℃殺青寒蘭花總黃酮會(huì)比不殺青高，這可能是因?yàn)?0℃殺青后，寒蘭花中含有的黃酮類物質(zhì)降解酶失活，因此對(duì)于寒蘭花中存在的黃酮物質(zhì)降解速度減慢。

干燥工藝對(duì)于寒蘭花提取液的DPPH自由基清除能力也有一定影響，在中等濃度（1%）時(shí)，90 ℃殺青寒蘭花提取液的DPPH自由基清除能力顯著高于另外2種殺青方法。黃酮類物質(zhì)是一種抗氧化物，是天然抗氧化劑，研究中寒蘭花提取物的DPPH自由基清除能力也和寒蘭花中的總黃酮含量呈現(xiàn)一定相關(guān)關(guān)系，90 ℃殺青的寒蘭花總黃酮含量較高，DPPH自由基清除能力也較強(qiáng)。

4 結(jié)論

干燥工藝對(duì)于寒蘭花總黃酮的影響很大，不同殺青條件下寒蘭花總黃酮含量為：90 ℃殺青＞不殺青＞水蒸氣殺青。寒蘭花提取液的DPPH清除能力排序?yàn)椋?0 ℃殺青＞不殺青≈水蒸氣殺青。不同烘干溫度下寒蘭花總黃酮的含量差別不大。因此，對(duì)于寒蘭花的干燥儲(chǔ)存需要采用合適的殺青方法，有利于寒蘭花中功效物質(zhì)保存，保留寒蘭花的利用價(jià)值。