梁引庫,耿敬章
陜西理工大學生物科學與工程學院(漢中 723000)
銀杏在我國分布廣,產量居世界第一[1]。銀杏具有很好的食用價值和藥用價值。銀杏中的淀粉大約占其干重的60%~70%[2]。銀杏以銷售干果為主,其深加工產品很少。因此,銀杏抗性淀粉的開發(fā)能使銀杏資源得到充分利用,提高銀杏的經濟效益。
抗性淀粉是健康者小腸中不吸收的淀粉和淀粉水解物的總稱[3]。作為一種新型的功能食品添加劑,抗性淀粉的開發(fā)應用引起了越來越多的關注。抗性淀粉可以降低糖尿病患者餐后血糖濃度,從而有效緩解糖尿病病情[4];抗性淀粉可將腸道內有毒物質稀釋,能增加大腸糞便體積,還可分解產生短鏈脂肪酸等代謝物,降低結腸pH,可以減少腸道運送排泄物的時間,從而預防、治療便秘、結腸癌等疾??;抗性淀粉可降低血中膽固醇和三甘油酯含量,從而降低患心臟病危險[5]。銀杏回生抗性淀粉為糊化后又冷卻老化的淀粉,其可在食品加工過程中由可消化淀粉轉化而成,研究表明,平均聚合度在50~100的相對分子量最利于抗性淀粉的生成[4-5]。“三高”指高脂血癥、高血壓、高血糖,是目前比較嚴重的健康性疾病,是威脅現(xiàn)代人們身體健康的主要疾病。隨著經濟不斷發(fā)展,人們生活條件不斷改善,“三高”健康問題逐漸成為一個普遍性問題。在這種情況下,健康性食品例如高纖維、低熱量和糖分的食品逐漸受到了越來越多的關注??瓜矸凼且环N典型的膳食纖維食品,其具有很大的市場發(fā)展空間。因此,以銀杏為原料,利用響應面分析法優(yōu)化銀杏抗性淀粉的工藝條件,并探討銀杏抗性淀粉水解特性,以期為銀杏資源的開發(fā)提供理論依據(jù)。
銀杏淀粉:銀杏購于當?shù)刂兴幉呐l(fā)市場,實驗室提取制備銀杏淀粉;檸檬酸、乙醇、普魯蘭酶、氫氧化鈉、3, 5-二硝基水楊酸、氯化鈉、鹽酸、葡萄糖等,均為分析純。
HFX-32高速離心機(上海姚氏儀器設備廠);HZX-JA 100電子天平(鄭州萬博儀器設備有限公司);7200型可見光光度計(華立設備公司)、HH-S型恒溫水浴鍋(環(huán)凱設備公司)等。
1.3.1 銀杏抗消化淀粉制備工藝
采用酶解-壓熱法[5]。取10 g 銀杏淀粉(干基),加磷酸緩沖液(0.2 mol/L,pH 5.0)配制一定濃度的淀粉乳,置于250 mL錐形瓶中,100 ℃糊化30 min,降溫至58 ℃,加入一定量的普魯蘭酶,酶解一定的時間后,以100 ℃滅酶10 min;以4 000 r/min離心15 min,去除上清液,向沉淀物加入去離子水,在高壓滅菌鍋中120 ℃處理一定時間,冷卻到室溫,4 ℃環(huán)境中放置24 h進行老化。40 ℃烘干含水量10%以下,粉碎過100目篩。
1.3.2 抗消化淀粉含量的測定
采用Zeng等[6]的方法。用胰α-淀粉酶將非抗性淀粉水解成葡萄糖,再利用抗性淀粉能溶于KOH中的性質,用淀粉葡萄糖苷酶使其水解成葡萄糖,然后測定糖的含量,從而算出原料抗性淀粉的含量。
1.3.3 淀粉水解率
2.1.1 不同普魯蘭酶用量的制備效果
設定銀杏抗消化淀粉制備其他各因素條件,選取3,5,7,9,11和13 U/g 6個水平的普魯蘭酶用量進行銀杏抗消化淀粉制備,觀察銀杏抗消化淀粉制備效果變化。由圖1可以看出,普魯蘭酶用量為9 U/g時,銀杏抗消化淀粉制備效果較好。
圖1 不同普魯蘭酶用量的制備效果
2.1.2 不同淀粉乳含量的制備效果
設定銀杏抗消化淀粉制備其他各因素條件,選取8%,12%,16%,20%,24%和28% 6個水平的淀粉乳含量進行銀杏抗消化淀粉制備,觀察銀杏抗消化淀粉制備效果變化。由圖2可以看出,淀粉乳含量為16%時,銀杏抗消化淀粉制備效果較好。
圖2 不同淀粉乳含量的制備效果
2.1.3 不同壓熱處理時間的制備效果
設定銀杏抗消化淀粉制備其他各因素條件,選取15,20,25,30,35和40 min 6個水平的壓熱處理時間進行銀杏抗消化淀粉制備,觀察銀杏抗消化淀粉制備效果變化。由圖3可以看出,壓熱處理時間為30 min時,銀杏抗消化淀粉制備效果較好。
圖3 不同壓熱處理時間的制備效果
2.1.4 不同酶解時間的制備效果
設定銀杏抗消化淀粉制備其他各因素條件,選取3,5,7,9,11和13 h 6個水平的酶解時間進行銀杏抗消化淀粉制備,觀察銀杏抗消化淀粉制備效果變化。由圖4可以看出,酶解時間為9 h時,銀杏抗消化淀粉制備效果較好。
圖4 不同酶解時間的制備效果
2.1.5 銀杏抗消化淀粉制備條件優(yōu)化試驗
在單因素試驗基礎上,選擇普魯蘭酶用量、淀粉乳含量、淀粉乳含量和酶解時間4個因素做試驗因素,以抗消化淀粉含量為響應值,進行優(yōu)化試驗,試驗因素和水平表見表1所示,試驗結果見表2所示。
分析銀杏抗消化淀粉制備的條件可知,普魯蘭酶用量、淀粉乳含量、壓熱處理時間、酶解時間這4個因素都是顯著因素??瓜矸酆康亩位貧w擬合方程為:抗消化淀粉含量=48.21-1.04A-4.46B-0.39C-3.60D-5.21AB-2.39AC-7.27AD+3.86BC-2.50BD+3.16CD-2.53A2-3.15B2-7.55C2-5.50D2(其中,A為普魯蘭酶用量,B為淀粉乳含量、C為壓熱處理時間,D為酶解時間)。
表1 銀杏抗消化淀粉制備試驗因素和水平
表2 銀杏抗消化淀粉制備試驗結果
表3 回歸方程各項的方差
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接表3
銀杏抗消化淀粉制備試驗失擬項不顯著,p=0.051 1,模型極顯著,p<0.000 1,所以能對銀杏抗消化淀粉制備的條件進行預測。得到銀杏抗消化淀粉制備的最佳條件為普魯蘭酶用量為10.3 U/g,淀粉乳含量為13.7%,壓熱處理時間為30.5 min,酶解時間為9 h。
依據(jù)設計表(表4)來進行驗證試驗,以驗證試驗得到的銀杏抗消化淀粉制備的最佳條件的可靠性。從表4看出,試驗4的抗消化淀粉含量最高,因此銀杏抗消化淀粉制備的最佳條件為普魯蘭酶用量為10.3 U/g,淀粉乳含量為13.7%,壓熱處理時間為30.5 min,酶解時間為9 h。
表4 驗證試驗設計表
2.2.1 主要成分
銀杏抗消化淀粉淀粉含量為97.31 g/100 g,銀杏抗消化淀粉具有較高純度。酶解-壓熱處理后的銀杏淀粉蛋白質成分要比原淀粉高得多。淀粉經過酶解-壓熱處理后,粗纖維、脂肪和灰分成分大幅下降。
表5 主要化學成分分析 g/100 g
2.2.2 內在品質
經過酶解-壓熱處理的后,原淀粉中會游離直鏈淀粉含量增加,直鏈淀粉間會組合形成結晶體,這類物質能夠抵御酶作用,因此,酶解-壓熱法可以有效提高銀杏抗消化淀粉成色和品質。
2.3.1 水解率
從圖6中可以看出,在0~20 min內,原淀粉和白面包水解速率較高,超過20 min后水解速度明顯下降,這可以看出白面包和原淀粉具有很強的水解性,并能夠產生葡萄糖;試驗證明,經過酶解-壓熱處理后的銀杏淀粉水解速率相對更慢。20 min后水解速率明顯放緩。這是因為經過酶解-壓熱處理后的銀杏淀粉,其抗消化性明顯增強。
圖5 銀杏抗消化淀粉品質分析
圖6 不同時間淀粉的水解率
2.3.2 水解率與血糖指數(shù)
用淀粉酶水解獲得的在90 min時的淀粉水解百分率(H90),預測其血糖指數(shù)值(GI):GI=39.21+0.803×H90[8]。試驗表明:原淀粉血糖指數(shù)達83,屬于高血糖食品。酶解-壓熱淀粉血糖指數(shù)為36,屬于中等血糖指數(shù)食品。
銀杏抗消化淀粉制備的最佳條件為普魯蘭酶用量為9 U/g,淀粉乳含量為20%,壓熱處理時間為35 min,酶解時間為7 h。經過酶解-壓熱處理后的銀杏淀粉水解速率相對更慢,而且酶解-壓熱淀粉血糖指數(shù)低于70,屬于中等血糖指數(shù)食品。