趙 輝，王喜英，劉國(guó)權(quán)，譚智勇

（1. 銅仁學(xué)院，貴州 銅仁 564300；2. 貴州省煙草公司思南縣分公司，貴州 銅仁 565100）

煙草黑脛病（tobacco black shank）又稱為煙草疫 病、黑稈瘋、黑根和烏頭病，于1896 年在印度尼西亞 爪哇被發(fā)現(xiàn)并命名，隨后在全世界范圍內(nèi)迅速蔓延[1]。1950 年，煙草黑脛病首次在我國(guó)黃淮煙區(qū)被發(fā)現(xiàn)，隨后逐步擴(kuò)展到其他煙區(qū)[2]。目前，由于植煙面積逐年降低、煙草企業(yè)對(duì)優(yōu)質(zhì)煙葉的需求增加，加上種煙區(qū)主要集中到云貴川等山區(qū)，導(dǎo)致煙草連作年限和品種過(guò)度集中，引起煙草黑脛病發(fā)病率較高，嚴(yán)重影響了煙葉的產(chǎn)質(zhì)量，不利于我國(guó)煙草產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[3]。煙草黑脛病是由寄生疫霉煙草致病變種引起的土傳性病害，可在土壤中存活數(shù)年并具有累積效應(yīng)，可侵染煙株各生長(zhǎng)階段，已成為煙草最頑固的病害之一[4]。

鑒于煙草黑脛病對(duì)煙葉產(chǎn)質(zhì)量的重要影響，如何對(duì)該病害進(jìn)行有效防治已經(jīng)成為許多學(xué)者和植煙人員關(guān)注的焦點(diǎn)。目前，許多科研人員已對(duì)煙草黑脛病的癥狀、機(jī)理、發(fā)生因素和防治方法等進(jìn)行了大量研 究[5-6]，為該病害的防控起到了積極作用。為此，筆者對(duì)煙草黑脛病的發(fā)生因素和防治方法進(jìn)行了綜述，特別是對(duì)近幾年出現(xiàn)的生物防治技術(shù)進(jìn)行了重點(diǎn)分析，以期為該病害的有效防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 煙草黑脛病致病機(jī)理及癥狀

1.1 致病機(jī)理

煙草黑脛病致病病原菌為煙草疫霉，該病原菌為真菌，屬于腐霉科疫霉屬，主要侵染煙草和茄子等茄科植物。煙草疫霉菌產(chǎn)生的卵孢子和厚垣孢子在適宜的環(huán)境條件下會(huì)形成孢子囊，孢子囊通過(guò)釋放出游動(dòng)孢子去侵染植物[7]。游動(dòng)孢子可通過(guò)2 種方式侵入煙株。一是直接侵染，游動(dòng)孢子在土壤弱電流的吸引下，依靠自身的鞭毛移動(dòng)到植物根系表面，其中根冠和傷口處較多；二是在水分適宜條件下，游動(dòng)孢子3 h 內(nèi)即可萌發(fā)并突破植物表皮，新長(zhǎng)出的菌絲進(jìn)入到植物細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間隙，并逐漸向植物其他部位蔓延；在水分較少的條件下，孢子囊直接萌發(fā)形成芽管并侵入到煙株[8]。

煙株在感染病菌后可產(chǎn)生分解寄生細(xì)胞的“毒素”，該毒素?zé)岱€(wěn)定性強(qiáng)，不易揮發(fā)，能被碳吸附[9]。該毒素主要為多元半乳糖醛酶，該酶通過(guò)分解煙株組織內(nèi)的中膠層和導(dǎo)管壁，產(chǎn)生能夠阻塞根部水分上升的果膠碎塊，最終導(dǎo)致煙株因缺水而發(fā)生萎焉[8]。

1.2 發(fā)病癥狀

煙草黑脛病在苗期和煙株大田生長(zhǎng)期均會(huì)發(fā)病。苗期主要在晚苗床發(fā)病，始于煙苗莖基部，呈現(xiàn)出污黑色病斑，并逐漸蔓延至幼莖，最終導(dǎo)致煙苗死亡[10]。大田煙株發(fā)病于莖基部，并圍繞全頸向煙株上部蔓延，導(dǎo)致煙葉由下到上依次變黃，稱為黑脛；當(dāng)病原菌進(jìn)入到煙株髓部，通過(guò)阻礙煙株水分和養(yǎng)分運(yùn)輸，葉片由下到上逐漸變黃，大雨后若遇到高溫和烈日天氣，將導(dǎo)致煙株葉片發(fā)生萎焉，并逐步發(fā)黃和枯死，稱為“穿大褂”；煙株莖部發(fā)病后期，切開(kāi)莖稈，發(fā)現(xiàn)髓部呈現(xiàn)黑褐色，并干縮呈“碟片狀”；在多雨和濕度大的條件下，黑脛病斑初期無(wú)明顯邊緣，呈水漬狀為暗綠色，隨后快速擴(kuò)增為中央呈黑褐色，病斑形如“膏藥狀”，被煙農(nóng)稱為稱為“黑膏藥”；當(dāng)煙株中部葉片發(fā)病后，病斑由主脈和葉基擴(kuò)展到莖部，最終導(dǎo)致莖中部表現(xiàn)出黑褐色腐爛，稱為“腰爛病”[11]。

2 發(fā)病因素

2.1 栽培方式

煙草黑脛病為土傳病害，可在土壤和煙株殘?bào)w中存活2～3 a 以上，當(dāng)煙草連年種植時(shí)，煙株為病原物的積累提供適宜載體，加重了黑脛病蔓延。長(zhǎng)期連作煙田土壤理化質(zhì)量逐漸退化，微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化，特別是土壤真菌/細(xì)菌比值增加，微生態(tài)失衡，加重土壤病害的發(fā)生[12]。在pH值＜4.4的強(qiáng)酸條件下，煙草黑脛病的發(fā)病率會(huì)降低。張笑宇等[13]研究表明，隨著連作年限增加，土壤黑脛病發(fā)病率上升，連作年限與發(fā)病率呈正比。不同品種煙株具有不同的抗病基因，能夠克服不同的致病生理小種。病原菌專化性越強(qiáng)則寄主的抗病性越強(qiáng)，并且病原菌的生理小種越多，寄主的抗原也就越多。

2.2 氣候條件

溫濕度與煙草黑脛病之間關(guān)系密切，在氣溫為28～30 ℃時(shí)，黑脛病發(fā)病較快，當(dāng)氣溫低于20 ℃時(shí)較少發(fā)病[14]。王革等[15]研究表明，低溫有利于菌絲體和厚垣孢子的存活；其中4℃的存活量比25℃時(shí)增加了25%左右。在高濕條件下也有利于該病害的發(fā)生。土壤濕度也是煙草黑脛病傳播的主要途徑，因?yàn)殒咦佑蝿?dòng)需要以水分為媒介進(jìn)行侵染傳播。屈霞等[16]研究也表明，雨后3～5 d 濕度在80%以上的煙田，黑脛病發(fā)病率達(dá)到高峰。

2.3 根結(jié)線蟲(chóng)的侵染

根結(jié)線蟲(chóng)造成的傷口有利于真菌的侵入，被根結(jié)線蟲(chóng)感染的植物根部易受病原真菌的侵染[14-15]。煙草黑脛病的發(fā)生不依賴于根結(jié)線蟲(chóng)的侵染，但其存在會(huì)加重?zé)煵莺诿劜〉陌l(fā)生，凡是前期煙草根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病率高的田塊，后期煙草黑脛病流行廣且危害重[16]。

3 綜合防治

3.1 農(nóng)業(yè)防治

烤煙連作產(chǎn)質(zhì)量降低，導(dǎo)致煙草疫霉菌在土壤積累，提高黑脛病發(fā)病率?？緹煂?shí)行輪作或者間作被認(rèn)為是一種比較好的農(nóng)業(yè)防治措施。釧有聰?shù)萚17]研究表明，烤煙和大蒜輪作可降低黑脛病發(fā)病率，提高煙葉產(chǎn)質(zhì)量。薛超群等[18]研究也表明，烤煙與大蒜、黑燕麥、花生間作均可降低煙草黑脛病發(fā)病率，其中與大蒜間作效果最佳。布云虹等[19]研究發(fā)現(xiàn)，烤煙間作紅薯、大麥和芹菜均可降低煙草黑脛病發(fā)病率。由以上研究結(jié)果可知，烤煙輪作或間作在一定程度上均可減低黑脛病病情指數(shù)。

在烤煙黑脛病防治工作中，還應(yīng)做好田間管理。在預(yù)防黑脛病時(shí)，前期要做好漂浮盤(pán)的消毒，煙苗的病蟲(chóng)害管理，培育健壯苗，杜絕病株移栽到大田。在煙株栽培中，杜絕平地栽煙，做到地膜覆蓋高起壟，井窖式小苗栽培，及時(shí)查苗補(bǔ)缺。李勇等[20]研究表明，烤煙采用膜下小苗栽種可降低煙草黑脛病發(fā)病指數(shù)。在煙株生長(zhǎng)過(guò)程中，及時(shí)中耕除草、高培土，并做好田間排水，減少雨水與煙株基部接觸，降低黑脛病發(fā)病率。發(fā)病煙株在晴天及時(shí)拔除并帶出煙田集中處理，減少感染源[21]。移栽是煙草栽培管理的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。曾琛等[22]研究發(fā)現(xiàn)，煙苗移栽期如果提前10 d 左右，可明顯降低煙草黑脛病發(fā)病率，推遲移栽期會(huì)加重黑脛病的發(fā)生，同時(shí)也會(huì)導(dǎo)致發(fā)病程度增加。

鑒于煙草抗病品種在黑脛病防治中的安全性和經(jīng)濟(jì)性等特點(diǎn)，是一種有效的防治措施。當(dāng)前，我國(guó)育種工作者已經(jīng)選育出多個(gè)煙草抗黑脛病品種。黃成江等[23]研究表明，云煙311、云煙317 和K596 為高抗品種，K326 和吉永一號(hào)為中抗品種。李梅云等[24]研究表明，K326 為高抗品種，烏江1 號(hào)和筑波1 號(hào)等為中抗品種。于海芹等[25]通過(guò)對(duì)55 個(gè)烤煙種質(zhì)資源開(kāi)展抗黑脛病田間試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)不同品種間抗病能力差異顯著。由于立地條件的差異性，因此在不同的種植區(qū)域需因地制宜地選擇抗病品種。

3.2 化學(xué)防治

化學(xué)方法基于高效和便捷等特點(diǎn)，已成為煙農(nóng)黑脛病防治的首選方法?；瘜W(xué)藥劑可分為內(nèi)吸性、保護(hù)性、內(nèi)吸性和保護(hù)性混合幾種類型。內(nèi)吸性藥劑被煙株吸收后，直接在煙株維管束的導(dǎo)管和細(xì)胞間隙內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)移，具有較好的防治效果。當(dāng)前使用較多的內(nèi)吸性藥劑主要有甲霜靈、烯酰嗎啉、惡唑菌酮、惡霜靈等。舒正義等[26]通過(guò)開(kāi)展甲霜銅對(duì)煙草黑脛病的試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)施用43%甲霜銅800 倍液防治效果可達(dá)80%～90%。Kang[27]研究也發(fā)現(xiàn)甲霜靈對(duì)煙草黑脛病防治效果顯著。保護(hù)性藥劑主要通過(guò)抑制黑脛病菌孢子囊釋放游動(dòng)孢子及萌發(fā)，可針對(duì)黑脛病多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行防治。鑒于該藥劑不能在煙株體內(nèi)進(jìn)行移動(dòng)，因此對(duì)未與藥劑接觸的部位無(wú)防治效果。目前，煙農(nóng)施用的保護(hù)性藥劑主要有代森錳鋅、代森鋅和丙森鋅等。該藥劑雖然不易產(chǎn)生抗藥性，但用藥量大、效果不顯著，并且容易對(duì)土壤環(huán)境造成污染。由于內(nèi)吸性和保護(hù)性藥劑本身具備的優(yōu)缺點(diǎn)，因此2 種藥劑混合施用效果較好，既可增強(qiáng)藥效又可延緩抗藥時(shí)間。目前，甲霜靈和代森錳鋅的混合藥劑甲霜靈錳鋅被廣泛應(yīng)用于煙草黑脛病防治，既可被煙株吸收，又可在煙株體內(nèi)移動(dòng)，具有較好的防治效果[28]。沈元戶等[29]通過(guò)開(kāi)展金雷多米爾錳鋅（精甲霜靈和代森錳鋅混合）對(duì)植物黑脛病的試驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)金雷多米爾錳鋅對(duì)易感染和未感染的植物組織均有顯著防效。Jaarsveld[30]研究發(fā)現(xiàn)代森錳鋅分別與烯酰嗎啉和惡唑菌酮混合施用對(duì)黑脛病有一定的防治效果。

化學(xué)藥劑雖然對(duì)黑脛病的防治效果快且顯著，但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生抗藥性。Kang[27]研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期（12 a）施用甲霜靈，煙草黑脛病病原菌對(duì)甲霜靈的EC50值上升了100 倍。Shew[31]研究也發(fā)現(xiàn)隨著甲霜靈使用年限逐漸增加，抗藥性逐漸提高。袁宗勝等[32]研究也發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期施用甲霜靈煙草黑脛病菌產(chǎn)生了耐藥性。鑒于黑脛病菌對(duì)甲霜靈的抗藥性，云南和四川等地不斷加大甲霜靈用藥量，以達(dá)到防治要求[33]。胡燕等[34]研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期施用烯酰嗎啉導(dǎo)致煙草黑脛病防治效果下降，使黑脛病病原菌產(chǎn)生了抗藥性。基于以上分析可知，科學(xué)合理的施用化學(xué)藥劑可延緩煙株黑脛病產(chǎn)生抗藥性，因此化學(xué)藥劑混合施用是重要的防治措施，可有效利用資源。

3.3 生物防治

目前，隨著分子生物技術(shù)的快速發(fā)展，從微生物拮抗角度對(duì)黑脛病防治進(jìn)行了大量研究，并取得了一系列成果。生物防治具有無(wú)毒害無(wú)殘留的特點(diǎn)，適合綠色生態(tài)煙葉的發(fā)展方向。微生物通過(guò)產(chǎn)生抗生素，抑制黑脛病菌的生長(zhǎng)，并最終導(dǎo)致游動(dòng)孢子和菌絲的消解。芽孢桿菌和假單胞桿菌主要通過(guò)拮抗作用來(lái)抑制黑脛病菌的生長(zhǎng)[35]。黃建等[36]通過(guò)開(kāi)展對(duì)黑脛病的化學(xué)藥劑和生物藥劑對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)寡雄腐霉菌的防治效果顯著高于烯酰嗎啉和精甲霜靈·代森錳鋅。Han 等[37]研究發(fā)現(xiàn)，Tpb55 枯草芽孢桿菌的盆栽黑脛病防治效果可達(dá)70.66%。王靜等[38]從土壤篩選出的鏈霉菌F8 對(duì)黑脛病盆栽防治效果可達(dá)70.3%。Cartwright 等[39]研究認(rèn)為，雙核絲核菌NBR 對(duì)煙草黑脛病的防治效果可達(dá)到70%。李祝等[40]研究發(fā)現(xiàn)，蠟狀芽孢桿菌1205 對(duì)煙草苗期黑脛病防治效果較好。龍春瑞等[41]研究發(fā)現(xiàn)，木霉菌和青霉菌滅活菌絲體復(fù)合物對(duì)煙草黑脛病的防治效果顯著，可明顯提高出苗率。楊珍福等[42]從煙草內(nèi)生細(xì)菌中分離出的銅綠假單胞菌YN201458，對(duì)黑脛病的防治效果可達(dá)76.07%。王革等[43]研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)枝木霉對(duì)煙草黑脛病菌具較強(qiáng)拮抗作用。奚家勤等[44]研究發(fā)現(xiàn)，鏈霉菌中的菌株92121對(duì)煙草黑脛病菌的抑制效果最佳。English 等[45]研究發(fā)現(xiàn)，農(nóng)田土壤中添加細(xì)菌可顯著降低黑脛病菌侵染率。

3.3.1 植物源殺菌劑 植物源農(nóng)藥也是生物農(nóng)藥的一種，具有低毒害、無(wú)殘留和不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)，是一種有很好應(yīng)用前景的新型環(huán)保農(nóng)藥。植物源農(nóng)藥的作用機(jī)理主要是通過(guò)植物活性成分來(lái)抑制黑脛病菌絲的生長(zhǎng)和游動(dòng)孢子的形成。商勝華等[46]通過(guò)開(kāi)展大蒜提取液對(duì)煙草黑脛病防治效果研究，結(jié)果表明濃度大于1.5%的大蒜提取液對(duì)煙草黑脛病菌的抑菌效果顯著。楊蘭等[47]研究也發(fā)現(xiàn)大蒜素對(duì)煙草黑脛病具有一定的防治效果。賴榮泉等[48]研究發(fā)現(xiàn)大蒜提取液和乙醇浸出物混合施用，對(duì)煙草黑脛病的防治效果可達(dá)100%。朱三榮等[49]通過(guò)開(kāi)展煙草黑脛病的植物源防治篩選研究，發(fā)現(xiàn)中藥材（土黃連和黃柏）混合作用對(duì)黑脛病菌絲的抑制效果最佳。盧敏等[50]研究發(fā)現(xiàn)檸檬草精油在640 μg/mL 下對(duì)煙草黑脛病防治效果最好。Bowers 等[51]研究發(fā)現(xiàn)10%丁香油和胡椒芥子油混合液可通過(guò)抑制黑脛病菌厚垣孢子生長(zhǎng)來(lái)防治黑脛病。張立猛等[52]研究發(fā)現(xiàn)，玉米根系分泌物濃度為0.90 mg/mL 時(shí)對(duì)黑脛病菌絲、孢子萌發(fā)和游動(dòng)孢子釋放的抑制效果分別達(dá)到55.2%、87.2%和73.8%。

3.3.2 誘導(dǎo)防治 植物誘導(dǎo)抗病性是植物受到外界環(huán)境（物理、化學(xué)和生物）刺激后，產(chǎn)生的一種病害抗性。趙蕾等[53]研究發(fā)現(xiàn)，殼聚糖通過(guò)誘導(dǎo)煙株P(guān)PO和PAL 酶活性的增強(qiáng)，提高煙株對(duì)黑脛病的抵抗能力。徐后娟等[54]研究發(fā)現(xiàn)，PDJ（二氫茉莉酸丙酯）通過(guò)增強(qiáng)煙草相關(guān)病程蛋白的表達(dá)和保護(hù)酶活性，提高煙株黑脛病抗性，減輕煙草黑脛病病害。楊軍等[55]研究發(fā)現(xiàn)，在蠅蛆低聚幾丁糖濃度1 mg/mL 處理下，可誘導(dǎo)煙苗產(chǎn)生抗性，對(duì)黑脛病的相對(duì)防效可達(dá)92.21%。劉菲等[56]研究發(fā)現(xiàn)，盆栽煙苗經(jīng)過(guò)核黃素處理后，煙苗黑脛病病情指數(shù)顯著下降。沈奕等[57]研究發(fā)現(xiàn)，幾丁寡糖在離體條件下雖然對(duì)黑脛病菌絲無(wú)抑制作用，但在盆栽條件下可誘導(dǎo)煙株產(chǎn)生抗性，防效可達(dá)57.81%。

4 展 望

煙草黑脛病的發(fā)病因素較多，僅僅采取單一的防治方法很難達(dá)到預(yù)期目的，因此采取綜合性的方法是煙草黑脛病防治的必然選擇。筆者認(rèn)為，在煙草黑脛病的綜合防治工作中，需要做好以下幾點(diǎn)：一是選擇適合的抗病品種，減少大面積種植同一品種；二是建立烤煙輪作或間作制度，有利于減少黑脛病病原和侵染源；三是建立科學(xué)合理的施肥和田間管理措施，為煙株生長(zhǎng)提供良好的生態(tài)環(huán)境條件；四是開(kāi)展化學(xué)藥劑混合防治，探索性開(kāi)展生物防治，增強(qiáng)煙株的抗 性，降低農(nóng)藥對(duì)煙葉產(chǎn)質(zhì)量和煙田可持續(xù)利用造成的影響。