曾鳳澤

（烏蘭察布醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000）

1 前言

人們的日常生活離不開食品和藥品，受生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)條件的影響，部分食品和藥品在生產(chǎn)過程中容易被微生物污染，這就需要相關(guān)單位采取現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，對食品和藥品中的微生物進(jìn)行有效檢測[1]。

2 現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的簡單概述

現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)主要指從分子水平上對生命現(xiàn)象進(jìn)行研究的一種物質(zhì)性基礎(chǔ)技術(shù)，在實(shí)際應(yīng)用過程中，相關(guān)人員主要通過分析細(xì)胞成分的物理、化學(xué)性質(zhì)以及這些變化所引起的生命現(xiàn)象達(dá)到技術(shù)應(yīng)用的目的。 現(xiàn)代分子生物學(xué)也屬于一門通過研究生命發(fā)展過程來表達(dá)生命現(xiàn)象本質(zhì)的現(xiàn)代化學(xué)科。

3 現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用意義

應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)可以解決當(dāng)前社會發(fā)展過程中面臨的很多全球性問題，在實(shí)際應(yīng)用過程中，其主要利用解酶催化原理和反應(yīng)，進(jìn)行酶的人工模擬，設(shè)計(jì)出各種新的催化劑，然后應(yīng)用在化學(xué)工業(yè)生產(chǎn)過程中， 在很大程度上促進(jìn)了化學(xué)工業(yè)的整體發(fā)展[2]。將現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用在食品和藥品微生物檢測工作中，可以有效提高食品和藥物的安全性。

4 食品藥品的微生物污染

食品的微生物污染主要有細(xì)菌污染、病毒污染以及寄生蟲污染等，造成食品微生物污染的原因可能是食品的生產(chǎn)原料存在問題，也有可能是食品的加工過程不夠嚴(yán)謹(jǐn)。

很多藥品中都含有適合微生物生長繁殖的成分，例如糖分、有機(jī)氮、有機(jī)碳等，一旦藥品被微生物侵染則會改變藥品原本的成分，危害人體的生命健康。

5 現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在食品和藥品微生物檢測中的應(yīng)用

5.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的應(yīng)用

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是現(xiàn)代分析生物學(xué)技術(shù)的一種，是在體外對特定的DNA 片段進(jìn)行迅速擴(kuò)增的技術(shù)。 PCR 主要機(jī)理是在機(jī)體外對目標(biāo)DNA 和引物進(jìn)行變性、退火和延伸處理，然后使目標(biāo)DNA在較短的時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)特異性擴(kuò)增。

現(xiàn)階段，我國在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的應(yīng)用上比較常見的是PCR 技術(shù)聯(lián)合核酸測序技術(shù)檢測微生物的基因型。 隨著PCR 技術(shù)的不斷發(fā)展完善，后期已經(jīng)延伸出了更多的相關(guān)技術(shù)，都在微生物檢測工作中得到了應(yīng)用。 例如：（1）多重PCR 技術(shù)。 這種技術(shù)又被稱作多重引物PCR 技術(shù)，在實(shí)際操作過程中，多重PCR 技術(shù)在原本的翻譯體系中增加了多對特異性引物，不僅可以對多種致病病菌同時(shí)進(jìn)行檢測，在具體的檢測操作中還可以對微生物的致病性進(jìn)行有效的分析和判斷[3]。 （2）免疫捕獲PCR（IMPCR）。 這種技術(shù)結(jié)合了抗原抗體反應(yīng)，利用微量的抗原進(jìn)行檢測，是一種新型的微生物檢測技術(shù)。 IMPCR 在應(yīng)用的過程中靈敏度較高，操作簡單，檢測也較為迅速，檢測成本較低。 根據(jù)相關(guān)資料顯示，IMPCR 在靈敏度方面是PCR 技術(shù)的100 倍，但是這種技術(shù)的發(fā)展還不夠成熟，因此使用也會受到限制。 （3）熒光定量PCR。這種技術(shù)在常規(guī)PCR 技術(shù)的基礎(chǔ)上增加了熒光基團(tuán)，應(yīng)用熒光信號的積累進(jìn)行微生物檢測，檢測效果也較好[4]。

5.2 變性梯度凝膠電泳的應(yīng)用

變性梯度凝膠電泳（DGGE）技術(shù)的原理是根據(jù)DNA 在不同濃度變性劑中的接連程度不同，電泳遷移率也會不同，從而實(shí)現(xiàn)對大小相同但是堿基組成不同的片段的分離。

目前，變性梯度凝膠電泳技術(shù)在相似性聚類分析中的應(yīng)用比較常見，可以對食品和藥品的菌落組成以及動態(tài)變化進(jìn)行有效的分析。例如，有學(xué)者利用變性梯度凝膠電泳技術(shù)對中藥川芎中真菌的群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，通過比較不同產(chǎn)區(qū)的中藥川芎中的真菌，最終得出了中藥川芎中的真菌的種群結(jié)構(gòu)和多樣性特點(diǎn)。由此可見，變性梯度凝膠電泳技術(shù)在檢測食品和藥品微生物的多樣性和動態(tài)變化等方面的優(yōu)勢較大。

5.3 基因芯片技術(shù)的應(yīng)用

基因芯片技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用過程的技術(shù)機(jī)理是將固定標(biāo)記、已知序列的核酸探針雜交，然后再進(jìn)行核苷酸測序。

目前，基因芯片技術(shù)在臨床診斷、新基因?qū)ふ?、藥物篩選以及微生物檢測方面的應(yīng)用都較為廣泛。其在實(shí)際的應(yīng)用過程中，自動化和多樣化水平也較高，可以在同一芯片上進(jìn)行多種微生物的檢測。 例如，相關(guān)人員應(yīng)用基因芯片技術(shù)對傳統(tǒng)的發(fā)酵食品的發(fā)酵過程進(jìn)行檢測，并將檢測結(jié)果和傳統(tǒng)的宏觀基因組學(xué)、熒光定量PCR 技術(shù)進(jìn)行檢測，最終發(fā)現(xiàn)基因芯片技術(shù)在檢測微生物的多樣化和功能方面具有較高的檢測效果。

5.4 隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性技術(shù)的應(yīng)用

隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性（RAPD）技術(shù)也是一種比較常見的現(xiàn)代分析生物學(xué)技術(shù)，在食品和藥品檢測工作中的應(yīng)用也較為常見。 RAPD 技術(shù)在應(yīng)用時(shí)需要使用8～12 個(gè)核苷酸長度的隨機(jī)引物在低溫環(huán)境下進(jìn)行退火操作，再經(jīng)過基因組DNA 和引物之間的非特異位點(diǎn)錯(cuò)配實(shí)現(xiàn)復(fù)性，同時(shí)還需要利用PCR 技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增。

在當(dāng)前階段，RAPD 技術(shù)被廣泛應(yīng)用在真菌、支原體以及細(xì)菌等微生物的檢測工作中。例如，專家學(xué)者應(yīng)用RAPD 技術(shù)對淡水中分離出來的溶血弧菌和溶藻弧菌進(jìn)行有效的分型，然后采取RAPD 技術(shù)聯(lián)合其他技術(shù)對一些重要的基因進(jìn)行獲取， 最終實(shí)現(xiàn)相關(guān)基因的迅速分離。隨著時(shí)間的推移，RAPD 技術(shù)的應(yīng)用也逐漸成熟，在微生物的鑒定和分型上發(fā)揮著重要作用[5]。

6 結(jié)語

總而言之，食品和藥品在人們?nèi)粘Ｉ钪胁豢苫蛉保湮⑸镂廴緯苯佑绊懭藗兊纳眢w健康，這就需要相關(guān)單位加強(qiáng)對食品和藥品的微生物檢測，應(yīng)用現(xiàn)代分析生物學(xué)技術(shù)，對食品和藥品的微生物進(jìn)行有效檢測，最終促進(jìn)食品和藥品的安全發(fā)展，保障人們的身體健康。