（文山州動物疫病預防控制中心，云南文山 663000）

文山壯族苗族自治州（以下稱文山州）地處云南省的東南部，全州8 縣（市）104 個鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），動物防疫工作點多面廣，難度較大。2018 年我國非洲豬瘟（ASF）的發(fā)生，暴露了文山州基層動物疫病防控能力的薄弱，因此全面了解其獸醫(yī)實驗室建設現(xiàn)狀及檢測能力水平，針對性地加強8 縣（市）動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室的建設，提高各縣市獸醫(yī)實驗室綜合技術能力，對全州動物疫病的預防與控制具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對象的基本情況

至2020 年文山州共有8 個縣級獸醫(yī)實驗室，1 個州級獸醫(yī)實驗室。獸醫(yī)實驗室是動物疫病控制系統(tǒng)的重要組成部分，承擔著動物疫病的診斷、檢測、監(jiān)測以及流行病學調(diào)查等重要任務，是動物疫病防控工作中重要的技術支撐力量。各級獸醫(yī)實驗室在建設、運行、管理等方面的問題直接或間接地影響著當?shù)貏游镆卟》揽毓ぷ鱗1]。

2004 年以來，國家加大對獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室建設投資力度，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在全國實施了省、州（市）、縣三級獸醫(yī)實驗室考核驗收、認證工程，為縣級獸醫(yī)實驗室的建設、規(guī)范運行帶來了發(fā)展機遇[2]。全州8 縣（市）在不同程度上新建、擴建獸醫(yī)實驗室，通過考核驗收獲得省級獸醫(yī)實驗室考核合格證的有7 個，其中包括3 個邊境測報站（文山市、麻栗坡縣、富寧縣），1 個州級獸醫(yī)實驗室，3 個縣級獸醫(yī)實驗室（丘北縣、廣南縣、馬關縣）。

1.2 調(diào)查方法

經(jīng)問卷調(diào)查、檢測工作調(diào)查、現(xiàn)場調(diào)查等方式，對實驗室建設狀況、運行情況、儀器設備、人員配備、開展檢測項目以及生物安全防護等方面進行調(diào)查，全面掌握文山州獸醫(yī)實驗室建設現(xiàn)狀，針對實際問題提出思考，為提高文山州基層獸醫(yī)實驗室動物疫病檢測能力與實驗室生物安全水平奠定基礎。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 檢測能力范圍及通過考核情況

對文山州1 市7 個縣的動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室建設情況開展問卷調(diào)查，結(jié)果顯示：文山州系統(tǒng)內(nèi)獸醫(yī)實驗室共有9 個，包括州級1 個、市級1 個、縣級7 個（其中邊境測報站3 個），具備常規(guī)抗體血清學檢測、監(jiān)測能力的實驗室9 個，具備病原分子生物學檢測能力實驗室1 個（州級獸醫(yī)實驗室）；具備ASF 檢測能力的實驗室4 個（州級1 個、縣級3 個）。全州獸醫(yī)實驗室通過省級考核驗收比例為77.8%（7/9），2 個縣級（硯山縣、西疇縣）獸醫(yī)實驗室未完成建設與考核，獸醫(yī)實驗室的建設與地方財政收入、政府重視程度、養(yǎng)殖量等因素密切相關。

2.2 基礎設施及人員配備

在調(diào)查具備抗體血清學檢測、ASF 檢測能力的獸醫(yī)實驗室中，實驗室建設面積基本達到縣級獸醫(yī)實驗室建設標準（200 m2以上），但有部分實驗室所處的地理位置達不到相對獨立；文山州獸醫(yī)實驗室專業(yè)技術人員僅有34人，各縣實驗室為2～4人，高級獸醫(yī)師15 人（約44%）；年齡在40～55 歲的工作人員占比90%；實驗室技術人員大專學歷有18 人，大學本科學歷13 人，碩士學歷3 人（均在州級獸醫(yī)實驗室），畢業(yè)于獸醫(yī)專業(yè)技術人員僅60%。文山州獸醫(yī)實驗室建設總體上推進較慢，實驗室專業(yè)技術人員年齡偏大、職稱不高、學歷偏低、配備不足直接影響實驗室檢測工作的推進。

2.3 儀器設備及試劑配備

配有便攜式熒光定量PCR 儀的實驗室4 個，配有普通PCR 儀的實驗室1 個（州級獸醫(yī)實驗室），配有全自動核酸提取儀實驗室2 個（1 個州級1 個縣級），配有酶標儀實驗室9 個。ASF 檢測儀器設備與試劑涉及4 個生產(chǎn)廠家，血清學檢測儀器設備與試劑基本相近，多數(shù)以省級比對試驗要求一致。

2.4 生物安全設備設施

9 個獸醫(yī)實驗室均同時配有生物安全柜、高壓滅菌設備，但工作人員理解執(zhí)行生物安全管理文件的能力有待加強，在調(diào)查中發(fā)現(xiàn)各縣實驗室人員生物安全設備的使用、管理不規(guī)范，對生物安全方面的理解片面，生物安全意識不強，盡管設備已就位，但生物安全措施的落實不到位。

2.5 能力驗證情況

2017 年有6 個實驗室參加云南省禽流感血凝抑制比對試驗，比對結(jié)果符合率約為92.5%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對符合率為94%。2018 年參與云南省禽流感病原學PCR 檢測比對實驗室1 個，比對結(jié)果符合率為97%；參與禽流感血凝抑制試驗比對實驗室6 個，比對結(jié)果符合率為95%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對符合率為98%。2019 年參與云南省非洲豬瘟病毒核酸PCR 檢測比對實驗室1 個，使用國家ASF 參考實驗室提供的引物進行盲樣比對，比對結(jié)果符合率為100%；參與ASF 熒光快速PCR 檢測比對實驗室3 個，比對結(jié)果符合率約為93%；參與禽流感病原學PCR 檢測比對實驗室1 個，比對結(jié)果符合率為100%；參與禽流感血清學檢測能力比對實驗室7 個，比對結(jié)果符合率98%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對實驗室7 個，比對結(jié)果符合率為100%。全州獸醫(yī)實驗室在病原學PCR 檢測方面能力十分薄弱，缺乏新的檢測儀器設備；在血清學檢測能力方面有所提高，但因試驗因素影響及人員技術等原因仍存在檢測結(jié)果不穩(wěn)定的情況。

3 討論

3.1 獸醫(yī)實驗室建設

經(jīng)現(xiàn)場調(diào)查發(fā)現(xiàn)文山州縣級獸醫(yī)實驗室建設緩慢，基礎硬件設施相對不足。從全州獸醫(yī)實驗室建設完成情況來看，完成實驗室基礎硬件平臺建設，具有固定相對獨立實驗室區(qū)域；能開展血凝和血凝抑制試驗、瓊脂凝膠免疫擴散試驗、平板凝集試驗、試管凝集試驗、ELISA 抗體檢測試驗等血清學檢測項目；通過省級考核驗收的獸醫(yī)實驗室7 個，全州獸醫(yī)實驗室建設完成比例為77.8%。目前擁有ASF 檢測能力的獸醫(yī)實驗室僅有4 個，占總數(shù)的44.4%。各獸醫(yī)實驗室條件有限，難以開展病原學檢測項目，縣級獸醫(yī)實驗室檢測項目少、檢測能力薄弱?？h級獸醫(yī)實驗室配置的儀器設備中廢舊、老化的儀器占比較高，而適用于目前動物疫病檢（監(jiān)）測的儀器設備相對稀缺，難以滿足當前動物疫病檢（監(jiān)）測工作的需求。全州獸醫(yī)實驗室服務于動物疫病預防控制工作的基礎硬件設施有待提高。對于縣級獸醫(yī)實驗室的建設及檢測診斷能力水平，我國其他地區(qū)也存在實驗室硬件基礎條件不完善，無法正常開展動物疫病的檢測和對疫病及時準確的診斷工作，甚至ASF 檢測能力的缺失等問題，面對目前復雜多樣的動物疫病，持續(xù)加強縣級獸醫(yī)實驗室的建設十分重要[3-6]。

3.2 獸醫(yī)實驗室內(nèi)部管理

獸醫(yī)實驗室內(nèi)部質(zhì)量管理體系和生物安全體系的建設不完善。80%的基層獸醫(yī)人員對管理體系的認識、理解局限于文件上，實際工作落實情況與文件要求存在一定差距，執(zhí)行和運行上存在一些細節(jié)問題。獸醫(yī)實驗室對實驗室物資管理方面存在不足，如對ASF 檢測，各實驗室采購ASF 快速檢測儀器、試劑廠家各不一致，來源復雜，缺少統(tǒng)一的判定標準，檢測結(jié)果可靠性有待驗證。部分獸醫(yī)實驗室開展PCR 檢測環(huán)境的控制能力較低，進行ASF 檢測的實驗室存在半開放性的實驗室，檢測區(qū)域未達到負壓標準。我國高級別獸醫(yī)防護實驗室分布不均且數(shù)量有限，大量高風險動物疫病樣品的采集、前期處理、疫病初篩等試驗活動尚需要由基層獸醫(yī)實驗室承擔，面對基層獸醫(yī)實驗室的基礎設施改造、設備配置、完善規(guī)范運行、人員能力提升等諸多因素，基層獸醫(yī)實驗室急需規(guī)范內(nèi)部工作，強化實驗室管理[7]。

3.3 實驗室檢測技術人員

各縣獸醫(yī)實驗室檢測技術人員素質(zhì)參差不齊，檢測能力不足。因體制改革，實驗室檢測人員不穩(wěn)定，存在一人同時兼數(shù)職、調(diào)崗工作兼扶貧工作等現(xiàn)象，導致獸醫(yī)實驗室檢測壓力大，超負荷運轉(zhuǎn)。在現(xiàn)場調(diào)查中發(fā)現(xiàn)部分實驗室檢測人員對快速PCR 儀器檢測方法認識匱乏，試驗操作不規(guī)范，檢測結(jié)果無法正確判斷；大部分檢測人員未開展崗前專業(yè)的ASF 檢測技術及PCR 和熒光PCR 檢測技術實操培訓，僅依靠個人經(jīng)驗、儀器廠家短暫的儀器操作培訓及大規(guī)模的政府ASF 防控文件、政策知識培訓，技術人員的檢測能力無法達到實際檢測工作的要求。獸醫(yī)實驗室的檢測能力難以適應新形勢下動物疫病防控工作需求，疫病的預警和預報能力發(fā)揮不夠，服務功能發(fā)揮不全[8]。

3.4 實驗室生物安全意識

基層獸醫(yī)安全意識缺乏，生物安全防護落實不到位。實驗室專業(yè)技術人員缺乏，實驗室操作技術不規(guī)范，實驗室雖然配有高壓滅菌鍋和生物安全柜等重要生物安全防護裝置，但因人員意識及操作規(guī)范方面的投入相對不足，許多人認為“建成生物安全實驗室就一定能夠進行有效的防護”[9]。而實際在實驗室開展禽流感、口蹄疫、布病、ASF等動物疫病的檢測過程中，試驗人員對廢棄物的處理、生物安全防護裝置的維護保養(yǎng)以及試驗關鍵設備及應用防護等方面存在短板，導致工作中存在很大的生物安全隱患。

4 建議

4.1 重視縣級獸醫(yī)實驗室建設

從本次調(diào)查情況來看，文山州9個獸醫(yī)實驗室，僅有4 個實驗室具有ASF 檢測能力，少數(shù)實驗室具有完整的生物安全管理體系?？h級獸醫(yī)實驗室檢測能力十分薄弱，無法及時準確診斷疫病，繼而錯失控制疫病的最佳時機。隨著現(xiàn)代畜牧業(yè)的不斷發(fā)展，獸醫(yī)實驗室建設、功能定位都發(fā)生了變化[10]。各縣政府部門應高度重視基層動物疫病預防控制機構(gòu)獸醫(yī)實驗室的建設，合理安排獸醫(yī)實驗室建設運行專項資金的投入，加快推進縣級獸醫(yī)實驗室的建設，尤其是邊境以及畜牧養(yǎng)殖業(yè)豐富的縣市，充分履行基層獸醫(yī)實驗室的職能、職責，切實開展動物疫病診斷、監(jiān)測、檢測、流行病學調(diào)查等重要工作，提高實驗室的服務功能，為獸醫(yī)行政管理部門和動物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法部門提供科學有力的技術保障。

4.2 加強實驗室內(nèi)部管理

基層獸醫(yī)隊伍龐大、建設發(fā)展不平衡，需加強管理與指導。當前，全州各縣獸醫(yī)實驗室內(nèi)部質(zhì)量管理體系與生物安全管理體系建設、執(zhí)行不到位，各縣獸醫(yī)實驗室應以實驗室建設為契機，結(jié)合實際工作不斷改進、建設管理體系，加強實驗室管理，加大培訓學習力度，利用年度實驗室內(nèi)部審核和管理評審工作強化兩大體系的學習與落實，向外探討、向內(nèi)提升，逐步規(guī)范化管理獸醫(yī)實驗室。

4.3 提高獸醫(yī)實驗室檢測服務能力

各縣市獸醫(yī)實驗室應主動開展檢測技術、生物安全、政策法規(guī)、質(zhì)量體系文件等相關基礎知識的培訓，并對實驗室檢測人員進行考核持證上崗。對實驗室已授權(quán)的檢測項目有計劃地進行內(nèi)部培訓，定期開展實驗室內(nèi)的檢測能力比對。同時積極主動參與省、州級組織的檢測能力比對試驗，對檢測能力比對符合率不高的試驗項目進行分析總結(jié)、查找原因，加強實驗室檢測能力比對與技術培訓，提高實驗室檢測能力與技術服務水平。

4.4 選擇可靠的檢測儀器設備與試劑

獸醫(yī)實驗室檢測儀器設備、檢測技術的標準、試劑等不統(tǒng)一，檢測數(shù)據(jù)不統(tǒng)一分析是獸醫(yī)實驗室檢測工作的一個難題。目前，出現(xiàn)在市面上的ASF 診斷和檢測制品多種多樣，相關儀器設備與試劑種類繁多，價格不一，在選擇診斷、檢測試劑、儀器設備時要與實際情況相結(jié)合，選擇質(zhì)量可靠、較穩(wěn)定的通用儀器設備及檢測試劑。

4.5 加強生物安全防護

獸醫(yī)實驗室作為密切接觸臨床病例的場所，加強實驗室生物安全防護措施，規(guī)范實驗室人員、儀器設備等操作程序，是防止實驗室感染與病原傳播的有效手段。各縣級獸醫(yī)實驗室管理滯后，生物安全設備有效利用率較低，廢棄物無害化處理不規(guī)范，生物安全意識薄弱，生物安全風險較高，因此亟需科學嚴謹?shù)丶訌娚锇踩雷o與管理。各獸醫(yī)實驗室可考慮從生物安全制度的制定、落實，人員的管理，風險評估、預防及控制[11]，以及生物安全儀器設備的規(guī)范使用，有效維護保養(yǎng)等方面來完善獸醫(yī)實驗室的生物安全防護。