金 琦，李 欣，李文寧，閆 梅，王 鼎，朱慶文**

(北京中醫(yī)藥大學，北京 100029)

艾灸作為中醫(yī)外治療法的分支，療效獨特、作用迅速、歷史悠久，大量的臨床經(jīng)驗表明艾灸足三里對脾胃病有確切的療效[1]。有臨床報道表明，艾灸足三里能顯著提高惡性腫瘤晚期患者的生存質量和免疫功能水平[2]。關于艾灸足三里的機制研究，特別是對新的細胞因子信號通路的研究，也在不斷豐富和完善。明晰艾灸足三里對胃黏膜作用的機制，對艾灸療法的發(fā)展具有重要作用，本文將從艾灸足三里對胃黏膜疾病作用機制進行綜述，并展望未來研究的方向，以期促進中醫(yī)外治療法的發(fā)展。

1 艾灸足三里修復胃黏膜的機制

急性胃黏膜損傷是消化系統(tǒng)疾病最常見的問題，也是諸多消化系統(tǒng)疾病最初的病理過程。由于急性胃黏膜損傷模型易于建立，故對于艾灸足三里促進急性胃黏膜損傷修復的機制研究更為豐富。由于胃接受人體自主神經(jīng)系統(tǒng)調控來實現(xiàn)其生理功能，所以關于艾灸足三里對胃黏膜的影響，主要從神經(jīng)因素、體液因素兩方面來進行，目前對這兩方面的研究已經(jīng)深入到信號轉導途徑方面。

1.1 艾灸足三里信號傳遞的神經(jīng)相關性

人體消化道受自主神經(jīng)系統(tǒng)支配，其中迷走神經(jīng)副交感纖維可以興奮消化道，可加強消化道運動、促進消化腺分泌和胃腸道激素釋放。向麗婷等[3]研究表明，艾灸足三里可以通過對迷走神經(jīng)的影響發(fā)揮修復急性胃黏膜損傷的作用。陳英等[4]研究表明，對大鼠脊髓施行橫斷術后，再進行足三里艾灸，就不能啟動大鼠內源性信息傳遞過程，其促進胃黏膜修復的功能受到明顯抑制。

迷走神經(jīng)的節(jié)前神經(jīng)元在延髓的位置尚不清楚，而孤束核位于延髓背側部,是參與腹腔內臟感覺傳入腦干的主要核團,對調節(jié)腹腔內臟器官的活動發(fā)揮了重要作用，故有團隊針對艾灸足三里從孤束核進行了研究。向娟[5]、李飛等[6]研究發(fā)現(xiàn)，切斷孤束核影響，則艾灸足三里調節(jié)胃黏膜細胞凋亡相關因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、B淋巴細胞瘤2(Bcl-2)蛋白、細胞凋亡促進基因(Bax)水平的功能受到影響?？梢姡淖闳飳ξ葛つさ淖饔门c神經(jīng)通路息息相關，關于艾灸足三里如何將作用傳入脊髓和迷走神經(jīng)的，陳果[7]等研究表明，艾灸足三里刺激可通過腓總神經(jīng)通路，啟動內源性保護信息傳遞過程，從而達成對胃黏膜的保護效應。

1.2 艾灸足三里對胃腸內分泌激素的影響

艾灸足三里不僅通過神經(jīng)通路發(fā)揮作用，還可以直接或間接調節(jié)胃腸激素的分泌，以達到治療目的。內源性保護因子包括胃腸激素中的生長因子家族成員，如表皮生長因子(EGF)等，其對胃腸功能具有保護作用，尤其表現(xiàn)在胃腸黏膜急性損傷時。然而，生長因子同時可以作用于成纖維細胞、平滑肌細胞、神經(jīng)元細胞，長期異常表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的關系，故這些生長因子也被認為是腫瘤相關因子。換言之，同一因子的不同水平或是在病理的不同階段的表達，會起到不同的作用。

王園園等[8]發(fā)現(xiàn)艾灸足三里與中脘穴可以升高急性胃黏膜損傷大鼠胃組織中EGF、轉化生長因子α(TGF-α)的表達，而降低胃黏膜中三葉因子家族3(TFF3)的含量，從而保護胃黏膜。佘暢[9]在歷時13周建立的大鼠慢性萎縮性胃炎模型的研究中發(fā)現(xiàn)，該模型的艾灸和針刺組刺激足三里和中脘穴后，胃黏膜保護相關因子EGF、TGF-α、PGE2水平較高，這一結果與上述急性胃黏膜損傷模型的一致。而在另一項20周建模的胃癌癌前病變的動物實驗中，楊宗保等[10]研究發(fā)現(xiàn)，艾灸足三里組較模型組大鼠胃黏膜細胞中，EGF、TGF-α、增殖細胞核抗原(PCNA)、血管內皮生長因子(VEGF)、核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)的表達均呈下降趨勢。這說明，艾灸足三里在病理的不同階段，可能產生的效應不同。何其達[11]等通過艾灸急性胃潰瘍大鼠模型的實驗表明，艾灸足三里與梁門可以使胃黏膜增殖細胞核抗原(PCNA)升高并降低P物質(SP)的表達，且這一作用在干預前4 d明顯，而在胃潰瘍損傷基本修復的第7天，PCNA和SP的表達在各組之間并沒有顯著的統(tǒng)計學差異。這也印證了上述關于“艾灸對胃黏膜保護作用的機制在各病理階段不同”的猜想。

1.3 艾灸足三里作用于胃黏膜損傷的信號轉導途徑研究

胃黏膜損傷的誘因繁多，飲食不節(jié)、情志不調等綜合因素在臨床上都與之密切相關。建立大鼠模型，通常選用乙醇等理化因素灌胃刺激，引起急性胃黏膜損傷；若建立慢性萎縮性胃炎模型，則通常聯(lián)合誘癌劑甲基硝基亞硝基胍(MNNG)。此兩種模型可很好模擬臨床飲食不節(jié)的情況。同時還有另一種常見模型，即應激性胃潰瘍模型。應激性胃黏膜損傷(SGML)發(fā)生于機體受嚴重創(chuàng)傷、內臟功能嚴重受損、休克、力竭運動及水浸-束縛等情況下，以胃黏膜出血、潰瘍、糜爛為主要特征的病變[12]。力竭運動和束縛-浸水是建立該模型最常用的方法，可以模擬臨床生活工作、情志精神因素對機體的影響。研究表明，艾灸足三里對上述三個模型均有確切的療效，其作用機制既有相似之處，也有對應的特別之處。

許多重要蛋白質的磷酸化水平受艾灸的作用影響。王晨光等[13]研究表明，艾灸足三里與梁門參與調節(jié)急性胃黏膜損傷中絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)相關信號通路，包括正磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白質絲氨酸蘇氨酸激酶(PI3K/Akt)信號通路、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(PAK)、蛋白激酶B(PKB/Akt)、磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK2)等的水平。而劉瓊等[14]在同期對SGML的研究中發(fā)現(xiàn)，上述這些蛋白質在艾灸足三里和梁門作用下也有相同的變化趨勢；此外，還有腫瘤壞死因子受體相關因子2(TRAF2)、轉錄活性因子1(STAT1)、腫瘤抑癌基因(p53)、Mkp-3、核轉錄因子NF-κB等的水平受艾灸足三里抑制。這些蛋白質都在細胞信號轉導的過程中發(fā)揮了重要作用。

在SGML模型的研究中，李婧婷等[15]研究發(fā)現(xiàn)，艾灸足三里和梁門參與神經(jīng)內分泌調節(jié)，可以抑制束縛-浸水模型大鼠亢進的下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸，通過改善應激狀態(tài)，進而從根本上控制胃黏膜損傷的程度；王紅梅等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在力竭游泳的模型中，海馬內離子鈣接頭蛋白1(Iba-1)及IL-6mRNA表達降低，即在慢性疲勞病理過程中發(fā)揮重要作用的小膠質細胞的活化水平和促炎性細胞因子水平可以被艾灸足三里抑制，但海馬IL-1β未見顯著下降。這一結果與舒文娜[17]對慢性萎縮性胃炎模型的研究結果有相似性，艾灸足三里和中脘穴不僅可以降低COX-2水平，還可以使抑制胃酸分泌的IL-1β和促炎因子IL-6、IL-8的含量明顯降低，這三者都在慢性炎癥中發(fā)揮著直接或間接的作用。顯然前者研究重點在抗應激方面，后者研究重點在于抗局部刺激，雖然其研究部位不同，但其通路存在相關性。何其達等[11]的研究中，艾灸足三里與梁門對P物質的改變也可以說明，其治療作用是通過對高級中樞的整體治療實現(xiàn)。

此外，艾灸足三里還可以通過減少胃黏膜細胞的凋亡，以控制急、慢性胃黏膜損傷。郁潔等[18]發(fā)現(xiàn)，艾灸中脘、足三里穴能誘導急性胃黏膜損傷中的熱休克蛋白60(HSP60)表達，從而抑制線粒體促凋亡蛋白(Smac)的表達，最終起到修復胃黏膜損傷的作用；艾灸足三里、梁門穴預處理可以通過上調大鼠胃黏膜細胞熱休克蛋白70(HSP70)表達，抑制細胞凋亡線粒體信號轉導途徑中相關因子細胞色素c(Cyt-c)、凋亡酶激活因子1(Apaf-1)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表達,使細胞免于進入細胞凋亡的不可逆程序[19、20]。在楊青[21]對慢性萎縮性胃炎的研究中，艾灸足三里和中脘可以減少NF-κB、B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)的表達，從而改善慢性萎縮性胃炎模型中胃黏膜細胞的凋亡情況。

2 艾灸足三里機制研究展望

艾灸足三里的相關機制研究仍在不斷完善補充中，在已有的研究中仍存在一些空白值得進一步探索，以下文舉隅拋磚引玉。

2.1 艾灸選穴與方法

在治療胃黏膜疾病中，艾灸足三里有確切療效，作為較為固定的選穴，常配伍中脘、梁門等穴位一起使用。部分實驗設置非穴位點對照組與胃經(jīng)穴組對比，但沒有將單一穴位與配伍穴位進行對比的相關研究。

上述文獻中多選用溫和灸的方式進行干預，部分實驗將溫和灸與電針的效果進行對比，差異較小；但將溫和灸與化膿灸等不同灸法進行對比的實驗較少。無創(chuàng)的溫和灸與有創(chuàng)的化膿灸在局部產生的效應不同，但兩者在遠端產生的作用是否有顯著差異尚待進一步探究。張秀麗[22]臨床研究表明，足三里的化膿灸可以防治消化道惡性腫瘤化療后的不良反應，包括化療后白細胞計數(shù)水平大幅下降等,能改善化療患者的惡心嘔吐、腹痛、腹瀉等消化道癥狀,提升患者的生活質量。因此，化膿灸對胃黏膜相關疾病的研究值得進行，類似還有火針與針刺、各種灸法等。同時，比較其作用機制與效果差異性的研究仍然較少。

2.2 艾灸足三里機制研究的空白

艾灸足三里對機體的調節(jié)隨時間變化，可見其作用是通過高級中樞實現(xiàn)的。由于慢性萎縮性胃炎建模時間較長，缺乏對其作用動態(tài)監(jiān)測的研究，應當在日后實驗中進行補充。尤其是對生長因子家族中諸多亦參與腫瘤生長的因子，其在病理過程的不同時期產生的作用及意義有極大不同。

此外，仍有一些未被研究的相關通路值得探索。由于胃腸黏膜的相似性與相關性，新的探索可以從腸黏膜病變中尋找靈感，或將胃黏膜損傷的研究推演至腸黏膜損傷的相關研究中。在動物實驗中，張何驕子[23]的研究表明，針灸足三里和關元穴，可以降低潰瘍性結腸炎小鼠結腸組織中缺氧誘導因子1α(HIF-1α)和轉錄活性因子3(STAT3)的表達。在急性胃黏膜損傷、慢性胃炎、胃癌等各類胃黏膜病變中，HIF-1α都有一定的表達，其中胃癌表達HIF-1α的陽性率最高[24]。有研究表明，胃癌細胞中不僅HIF-1α高表達，而且HIF-1α的表達與患者的預后有密切關系，通常HIF-1α低表達者預后更好[25]。缺氧情況下，HIF-1α氧依賴降解結構域(ODD)脯氨酸殘基羥化受阻，即HIF-1α降解受抑制，從而加強VEGF的表達，增加NO的合成，進而損傷胃黏膜。而HIF-1α/VEGF通路的異常激活，可促進胃黏膜微血管生成、腫瘤細胞增殖等,與胃癌的發(fā)生進展有密切關系[26]。上述文獻已顯示出艾灸足三里對VEGF的影響，且有實驗表明[27]，火針可通過調節(jié)血清一氧化氮(NO)與血管內皮素(ET)的平衡，促進胃黏膜的修復，但現(xiàn)尚無艾灸足三里影響急、慢性胃黏膜損傷模型中HIF-1α水平的研究。

3 總 結

總之，艾灸作為非藥物療法，能夠避免藥物對胃腸道的刺激。艾灸足三里對于慢性胃炎、潰瘍性結腸炎等持久難愈性疾病具有確切的療效及簡、便、廉的特點，在消化系疾病的治療中顯示出優(yōu)勢。根據(jù)上述列舉的艾灸足三里促進胃黏膜修復的作用特點，在未來的研究中可將目光轉向動態(tài)變化監(jiān)測與更高級中樞的信號調節(jié)控制方面。對艾灸足三里作用機制的深入研究，為艾灸的推廣夯實了基礎，也為醫(yī)患帶來了新的選擇。