楊孝智，賀婷婷，梁 鵬

(江蘇金聚合金材料有限公司 江蘇丹陽 212300)

草酰胺分子式為(CONH2)2，是以煤制合成氣為原料，通過氣體分離凈化、酯化、偶聯(lián)、氨化工序制取[1]。草酰胺是含氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)31.8%的白色粉末，其氮素利用率高達(dá)65%～80%，是尿素的2倍，且微溶于水，用草酰胺代替尿素作為氮肥施用，在潮濕的土壤中受微生物作用和自身水解作用逐步釋放出易于被植物吸收的氨[2]，可大幅減少氮肥的浪費(fèi)和損失，以達(dá)到節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境的目的。作為一種新型緩釋氮肥，目前關(guān)于草酰胺含量分析檢測方法研究得較少。筆者通過試驗(yàn)建立了一種快速穩(wěn)定分析草酰胺含量的高效液相色譜法，以期為草酰胺緩釋氮肥的推廣和研究提供理論和技術(shù)支撐。

1 主要儀器和試劑

主要儀器：島津高效液相色譜儀，LC-20AT；高速中藥粉碎機(jī)，XRB-500，吉首市中湘制藥機(jī)械廠；電子天平，F(xiàn)A2004，上海上平儀器公司；超聲波清洗器，KQ3200DE，昆山超聲儀器有限公司；GWA-UN-F10型超純水機(jī)、TU-1810型分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限公司。

主要試劑：草酰胺標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99%，麥考林；甲醇、乙腈，HPLC級，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；磷酸二氫鈉、磷酸、硫酸，AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；草酰胺樣品，江蘇金聚合金材料有限公司。

標(biāo)準(zhǔn)品制備：稱取(10±2)mg草酰胺于容量瓶中，在常溫下用水溶解，定容至100 mL，搖勻，1 mL此溶液含草酰胺0.1 mg，作為儲備液。按外標(biāo)法要求，分別配制不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2 測試條件

高效液相色譜檢測條件：色譜柱為InertSustain C18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm)；流動相為乙腈+水(含硫酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%)，乙腈與水體積比為1∶19；流速為0.8 mL/min；檢測波長205 nm；柱溫25 ℃；進(jìn)樣量20 μL。

3 結(jié)果與討論

3.1 檢測波長的選擇

取一定量草酰胺儲備液，用水稀釋至質(zhì)量濃度20.0 μg/mL，以水為空白，用分光光度計(jì)掃描，掃描波長范圍190～800 nm。綜合考慮樣品響應(yīng)及干擾組分的影響，選擇205 nm作為檢測波長。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用流動相配制質(zhì)量濃度分別為1、2、10、15和20 μg/mL的草酰胺系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按測試條件依次測出峰面積作為因變量，以草酰胺質(zhì)量濃度作為自變量，繪制得到如圖1所示的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，其回歸方程為y=22 344x-3 255，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 86，說明曲線的線性良好。

圖1 草酰胺標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

3.3 回收率和精密度測試

取相同草酰胺樣品，加入不同量的草酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，其余按分析步驟操作，將得到的峰面積代入線性回歸方程計(jì)算相應(yīng)的回收率，結(jié)果(表1)表明回收率在98.5%～101.4%。對樣品進(jìn)行精密度試驗(yàn)，進(jìn)樣標(biāo)樣的草酰胺質(zhì)量濃度為10 μg/mL，重復(fù)進(jìn)樣測量3次，3次測定結(jié)果分別為9.86、9.88和9.93，RSD為0.36%。

表1 高效液相色譜法測定草酰胺含量的精密度及加標(biāo)回收率

3.4 樣品含量測試

按照上述測定方法進(jìn)行草酰胺樣品檢測，草酰胺樣品出峰如圖2所示。將峰面積代入線性回歸方程，結(jié)果表明該樣品含草酰胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%。

圖2 草酰胺樣品色譜圖

4 結(jié)語

利用高效液相色譜分析技術(shù)，建立了草酰胺標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，其相關(guān)系數(shù)R2為0.999 86，說明線性關(guān)系良好。通過加標(biāo)回收率試驗(yàn)及精密度試驗(yàn)，結(jié)果加標(biāo)回收率為98.5%～101.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.36%，表明該方法具有較高的回收率及精密度，能準(zhǔn)確地對草酰胺產(chǎn)品進(jìn)行定量分析，方法切實(shí)可行。