喻小燕 石星云 陳鋒菊

(1、湖南信息職業(yè)技術(shù)學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙410200 2、湖南省腫瘤醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙410013 3、湖南第一師范學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙410205)

蛋白質(zhì)組(proteome)是指“1 個(gè)細(xì)胞或1 種組織其基因組所能表達(dá)的全部蛋白質(zhì)”，是1994 年由澳大利亞Macquarie 大學(xué)的Wilkins 與Williams 提出的[1-2]。蛋白質(zhì)組學(xué)是指以蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象，從整體的角度，分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成及其活動(dòng)的規(guī)律[3]。而血清蛋白質(zhì)組學(xué)是近年來眾多蛋白質(zhì)組學(xué)中非常重要的分支之一，主要是研究如惡性腫瘤患者等特定人群的血清中表達(dá)的所有蛋白質(zhì)，并在此基礎(chǔ)上建立正常蛋白表達(dá)譜（PEM），找出不同的蛋白點(diǎn)，鑒定和發(fā)現(xiàn)疾病相關(guān)蛋白，為研究疾病發(fā)生機(jī)制、早期篩選或診斷標(biāo)志物、治療靶點(diǎn)等探尋新方法。血清是血漿凝固后析出的上清，其組成非常復(fù)雜，有近萬種蛋白質(zhì)，富含各種蛋白質(zhì)和一些小分子，如鹽、脂類、氨基酸、糖等。血清中的蛋白質(zhì)能反映機(jī)體中細(xì)胞器官等運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)是否異常，蘊(yùn)含著與疾病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制、早期診斷、藥物治療靶點(diǎn)、治療效果監(jiān)測(cè)緊密相關(guān)的大量信息。生理醫(yī)學(xué)諾貝爾獎(jiǎng)獲得者Lee Hartwell 博士指出：尋找腫瘤標(biāo)志物，特別是其中的蛋白標(biāo)志是早期診斷癌癥的最新、最有效的方法，而驗(yàn)血診斷簡(jiǎn)便易行[4-5]。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步、發(fā)展和完善為尋找血清中與腫瘤相關(guān)的蛋白質(zhì)及探尋腫瘤發(fā)病機(jī)制、療效評(píng)估等提供了新的方法和技術(shù)平臺(tái)。

1 血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究的基本技術(shù)

1.1 雙向凝膠電泳- 質(zhì)譜技術(shù)(2-DE-MS)

雙向凝膠電泳簡(jiǎn)稱雙向電泳，是蛋白質(zhì)組學(xué)研究最基本最常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)[6]。它是由OFarrell 等于1975 年最早建立，其基本原理為：在相互垂直的兩個(gè)方向上，根據(jù)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和蛋白質(zhì)分子量的差異，先利用等電聚焦電泳分離不同等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)，再采用十二脘基硫酸鈉- 聚丙烯酰胺凝膠電泳，最終把不同蛋白質(zhì)徹底分離。這種技術(shù)因使用膠條不同，分離蛋白質(zhì)量也會(huì)隨之發(fā)生變化，利用PH3-10 的梯度膠條可以分離差不多一至三千個(gè)蛋白質(zhì)，而如果使用較窄的膠條PH4-7 可以分離出更多的蛋白質(zhì)。雙向電泳具有高通量、高靈敏度、較高分辨率、有一定重復(fù)性，以及能與質(zhì)譜聯(lián)用等優(yōu)點(diǎn)，在血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究中得到了廣泛的應(yīng)用。

1.2 差異凝膠電泳- 質(zhì)譜技術(shù)(2D-DIGE-MS)

差異凝膠電泳技術(shù)是基于二維凝膠電泳的一項(xiàng)重大創(chuàng)新，其基本方法為：用不同的熒光染料對(duì)兩個(gè)樣品的蛋白質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記后混合，再進(jìn)行二維凝膠電泳。由于兩種熒光染料的波長(zhǎng)相異，兩種樣品可在同一塊膠上分離，其含量差異也能準(zhǔn)確測(cè)出。由于是在同一個(gè)二維凝膠樣品中來分離，能夠有效地減少經(jīng)典的二維凝膠電泳中的偶然性，也能在一定程度上克服重復(fù)性不夠好的缺點(diǎn)，較大程度提高了結(jié)果的準(zhǔn)確度、可靠性、重復(fù)性和工作效率[6-7]，而且此技術(shù)可檢測(cè)到100-200pg 的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)亞型也有可能檢測(cè)出來，這相對(duì)于其它蛋白質(zhì)組技術(shù)來說，具有明顯優(yōu)勢(shì)。

1.3 液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS/MS)

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用是將待分析的復(fù)雜蛋白質(zhì)樣品經(jīng)蛋白酶消化后，然后用一維或多維色譜進(jìn)行預(yù)分離，用質(zhì)譜對(duì)肽段混合物進(jìn)行鑒定分析。高效液相色譜（HPLC）質(zhì)譜聯(lián)用是以經(jīng)典的液相色譜法為基礎(chǔ)，發(fā)展起來的分離分析技術(shù)，HPLC 分離的液體多肽混合物在高壓下通過細(xì)針孔[8-9]，進(jìn)行質(zhì)譜分析。HPLC 為復(fù)雜蛋白質(zhì)的分離提供了一種高效的分離方法，依據(jù)蛋白質(zhì)生物學(xué)、理化性質(zhì)的不同，高效液相色譜具有如離子交換色譜、反相色譜、親和色譜（AC）等許多不同的分離模式。一維液相分離系統(tǒng)能較好的分離簡(jiǎn)單的生物大分子混合物，但因受到其分離模式所能提供的分辨率和峰容量等因素影響，分離較為復(fù)雜的蛋白質(zhì)、多肽混合物等還是受到一定的限制。目前，大家逐漸采用多維色譜分離技術(shù)，并將其與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)相結(jié)合，以彌補(bǔ)2-DE-MS 的不足，多維液相分離系統(tǒng)可以不做蛋白質(zhì)變性等預(yù)處理，因此在預(yù)處理過程中有些可能丟失的蛋白也可檢測(cè)出來，還能等同分離低豐度蛋白質(zhì)、高豐度蛋白質(zhì)，也能分離疏水難溶性蛋白質(zhì)、低含量蛋白質(zhì)，并且可重復(fù)性好、自動(dòng)化程度高，為發(fā)現(xiàn)、篩選新的與腫瘤相關(guān)的血清蛋白標(biāo)志物打下了良好的基礎(chǔ)。

1.4 表面增強(qiáng)激光解析離子化- 飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)（SELDI-TOF-MS）

SELDI-TOF-MS 是一種基于親和力的質(zhì)譜分析方法。其基本原理是：利用特定的探針表面或芯片直接捕獲待測(cè)樣品中的蛋白質(zhì)分子，洗脫非特定結(jié)合蛋白，利用脈沖氮激光能量將捕獲的靶蛋白從芯片表面電離出來，根據(jù)其在電場(chǎng)中飛行時(shí)間的不同，繪制成質(zhì)譜圖，樣品中各種蛋白質(zhì)的分子量、含量等信息可通過分析軟件處理其檢測(cè)結(jié)果而獲得。SELDI-TOF-MS 有許多優(yōu)點(diǎn)：可以直接檢測(cè)未經(jīng)處理的粗樣品，如血清，鑒定特異標(biāo)志物和分離蛋白質(zhì)，對(duì)樣本需要量少，分析速度快，一般幾十分鐘就能完成，可以分析2-DE 技術(shù)不能分析的蛋白質(zhì)，對(duì)含量級(jí)微的蛋白，即使含量水平為10-18，只要能夠與表面探針有效結(jié)合，都能有希望檢測(cè)到，大大提高了低豐度蛋白的檢出率[10-11]。SELDI 技術(shù)因其能夠全自動(dòng)、大規(guī)模、粗樣品、極微量、較高通量篩選蛋白質(zhì)，已被廣泛應(yīng)用于尋找特異蛋白質(zhì)或生物標(biāo)志物，尋找不同類型的組合蛋白質(zhì)質(zhì)譜，進(jìn)行相關(guān)疾病的研究和診斷。

血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)種類繁多，各有優(yōu)缺點(diǎn)。單一的技術(shù)平臺(tái)已經(jīng)很難達(dá)到最佳的分離鑒定效果，即使是同一類技術(shù)平臺(tái)也必需根據(jù)樣品進(jìn)行適合的選擇，如色質(zhì)串聯(lián)進(jìn)行蛋白質(zhì)定性定量分析，就有穩(wěn)定性同位素親和標(biāo)簽法技術(shù)(ICAT)、氨基酸代謝標(biāo)記技術(shù)(AACT)、還有功能強(qiáng)大的同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量技術(shù)(iTRAQ)等，ICAT 技術(shù)在定量及差異表達(dá)檢測(cè)上有較大的優(yōu)勢(shì)，但也存在一些缺陷，如這一技術(shù)無法檢測(cè)不含半胱氨酸的蛋白質(zhì)，而iTRAQ 技術(shù)在分析不同樣品時(shí)，重復(fù)性和精確性很好，在一定程度上又彌補(bǔ)了ICAT 技術(shù)的不足，被廣泛應(yīng)用于血清差異蛋白分析疾病標(biāo)志物及醫(yī)藥領(lǐng)域[12-13]。不同技術(shù)平臺(tái)和研究策略的結(jié)合，可以最大限度地達(dá)到最佳的分離鑒定效果。例如，在選擇去除高豐度蛋白質(zhì)、樣品預(yù)分離系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、質(zhì)譜系統(tǒng)等時(shí)，進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋容^、修改和調(diào)整，以達(dá)到最佳的研究策略。

2 血清蛋白質(zhì)組學(xué)在腫瘤研究中的應(yīng)用

2.1 腫瘤特異血清標(biāo)志物尋找

從蛋白質(zhì)組學(xué)的角度上講，腫瘤可以被認(rèn)為是一種蛋白質(zhì)缺陷病，其發(fā)生、發(fā)展過程中分泌的一些關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白在血清/血漿中會(huì)有量或質(zhì)的變化，這些蛋白質(zhì)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)具有高通量的特點(diǎn)，它能篩選腫瘤在發(fā)生發(fā)展各階段中基因表達(dá)的各種蛋白質(zhì)，尤其是組織與體液中與腫瘤相關(guān)的低豐度蛋白質(zhì)，從而可以發(fā)現(xiàn)與腫瘤相關(guān)的標(biāo)志性蛋白質(zhì)分子。由于血清樣本獲取相對(duì)簡(jiǎn)單，且采集過程基本上不對(duì)研究對(duì)象造成傷害，越來越多研究人員以血液為樣本，應(yīng)用蛋白組學(xué)技術(shù)尋找和篩選腫瘤特異血清標(biāo)志物。Rui 等[14]通過雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)對(duì)乳腺癌患者和健康人員血清比較分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)表達(dá)差異明顯的2 種蛋白質(zhì)，分別是在乳腺癌患者血清中表達(dá)明顯下調(diào)的14-3-3Sigma 蛋白，上調(diào)的熱休克蛋白27，而用這2 種蛋白質(zhì)對(duì)患者進(jìn)行篩查時(shí)，兩種蛋白的敏感性和特異性分別為100%和97%，提示血清蛋白質(zhì)可用于高危人群和一般人群的篩查。Kadowaki M[15]等對(duì)乳腺癌患者血清蛋白質(zhì)進(jìn)行研究時(shí)，采用不同分離分析技術(shù)，經(jīng)雙向凝膠電泳、LC-MS/MS 鑒定出33 個(gè)差異蛋白，Western blotting 結(jié)果顯示乳腺癌患者血清中玻璃粘連蛋白含量明顯升高，提示其可能是乳腺癌早期診斷的血清標(biāo)志物。張晨曦，劉曉燕等[16]收集乳腺癌患者和健康人血清各10 例，采用雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)成功分離鑒定4 個(gè)表達(dá)差異的蛋白點(diǎn)：錨蛋白-3 亞型X7、keratin、type I cyto-skeletal9 、核膜血影重復(fù)蛋白 2 亞型X 11、Dynein heavy chain10 , axonem a1iso-form X9, 這4 種與乳腺癌發(fā)生發(fā)展可能相關(guān)的差異蛋白質(zhì)，提示可能成為乳腺癌的早期診斷標(biāo)志物。Ahmed N 等[17]應(yīng)用雙向凝膠電泳聯(lián)合質(zhì)譜的方法分析卵巢癌患者與健康志愿者血清蛋白質(zhì)時(shí)，鑒定了一些表達(dá)差異的蛋白質(zhì)，如結(jié)合珠蛋白和血清轉(zhuǎn)鐵蛋白，通過檢測(cè)這兩種蛋白質(zhì)在卵巢癌各個(gè)病理分期，用化療方式治療前、治療后的表達(dá)情況，為卵巢癌的早期診斷和藥物療效監(jiān)測(cè)提供了新的生物標(biāo)志物。Ramos[18]等采用經(jīng)典雙向凝膠電泳質(zhì)譜方法鑒定了一個(gè)血清間皮相關(guān)蛋白，認(rèn)為是惡性間皮瘤的潛在腫瘤標(biāo)志物。這些研究都提示雙向凝膠電泳聯(lián)合質(zhì)譜方法是篩選血清分子標(biāo)志物的一種強(qiáng)有力的工具。Yu 等[19]利用差異凝膠電泳（2D-DIGE）比較胰腺癌患者和健康志愿者血清標(biāo)本，質(zhì)譜鑒定出差異蛋白41 個(gè)，其中24 個(gè)上調(diào)，17 個(gè)下調(diào)。并驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)載脂蛋白E，a-1- 抗胰凝乳蛋白酶、inter-a- 胰島素抑制因子這三個(gè)蛋白作為胰腺癌診斷標(biāo)志的特異性為82.4%-94.1%，但三者聯(lián)用診斷時(shí)特異性達(dá)到了100%。Huang 等[20]應(yīng)用差異凝膠電泳技術(shù)對(duì)經(jīng)用免疫親和層析的去除了高豐度蛋白的乳腺癌和健康人血清進(jìn)行分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)在乳腺癌患者血清中表達(dá)上調(diào)的轉(zhuǎn)鐵蛋白和表達(dá)下調(diào)的載脂蛋白等，經(jīng)臨床驗(yàn)證后，轉(zhuǎn)鐵蛋白的表達(dá)情況與差異凝膠電泳結(jié)果一致，結(jié)果還表明差異凝膠電泳可以檢測(cè)出蛋白質(zhì)亞型，說明與其他技術(shù)相比，差異凝膠電泳具有一定的優(yōu)勢(shì)。Yang Z 等[21]分析乳腺癌和健康人血清時(shí)，應(yīng)用多維凝集素親和色譜分離糖蛋白，HPLC-MS/MS 鑒定分離的酶解片段，不僅發(fā)現(xiàn)了在乳腺癌和健康人血清中存在差異表達(dá)的與蛋白酶抑制、細(xì)胞生長(zhǎng)、維持內(nèi)環(huán)境有關(guān)的蛋白，還檢測(cè)到了低豐度蛋白質(zhì)HER-2 的表達(dá)。Zhang Q[22-24]等篩查腎母細(xì)胞瘤患兒血清中的生物標(biāo)志物時(shí)聯(lián)用SELDI-TOF-MS、HPLC、2D-LC-LTQ-MS 等技術(shù)，發(fā)現(xiàn)了可作為兒童腎母細(xì)胞瘤中特定的標(biāo)志蛋白，分別是載脂蛋白C-I 和結(jié)合珠蛋白，它們?cè)趦和缙谀I母細(xì)胞瘤中表達(dá)均偏高。這些方法可用于大量篩選血清標(biāo)志物。最近有報(bào)道通過蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在腎透明細(xì)胞癌早期階段的血清中新的發(fā)現(xiàn)。zhang Y 等[25]在分析腎癌患者和非癌癥患者血液樣本時(shí)，應(yīng)用iTRAQ 標(biāo)記和LC-MS/MS 技術(shù)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，差異表達(dá)的30 個(gè)蛋白質(zhì)中，在腎透明細(xì)胞癌中HSC71過表達(dá)。Geissler K 等[26]研究發(fā)現(xiàn)早期腎癌與良性腫瘤、其他泌尿系腫瘤或非癌癥病人血清中，蛋白質(zhì)獨(dú)特表達(dá)的有27 種，而且與腎透明細(xì)胞癌免疫反應(yīng)失調(diào)有關(guān)的為大多數(shù)，可作為診斷腎透明細(xì)胞癌的生物標(biāo)志物。Zhang L 等[27]通過與”癌癥基因組圖譜”數(shù)據(jù)庫交叉驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)差異蛋白質(zhì)11 種，通過免疫組化驗(yàn)證證實(shí)潛在的生物標(biāo)志物可能為小型Ca2+結(jié)合蛋白S100家族S10A8 和S10A9 ，可用于診斷腎癌和作為潛在的治療靶點(diǎn)。

2.2 腫瘤的發(fā)病機(jī)制、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后評(píng)估以及靶向治療

過去，應(yīng)用血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究腫瘤主要集中在發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物和診斷上，近些年，越來越多的研究人員逐漸向探索腫瘤發(fā)病機(jī)制、治療靶點(diǎn)邁進(jìn)，以此檢測(cè)、分析標(biāo)志蛋白和靶蛋白，作為腫瘤療效評(píng)價(jià)、預(yù)后判斷及其藥物篩選研究中最新并且最強(qiáng)有力的技術(shù)手段。朱敬華等[28]收集晚期肺腺癌患者培美曲塞聯(lián)合順鉑方案化療進(jìn)展組和非進(jìn)展組的血液，以2-DE-MS 技術(shù)成功鑒定到19 個(gè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，其中丙酮酸激酶M 2 、腺苷酸激酶5 、a-2 抗纖維蛋白溶酶的前體，r 纖維蛋白、氧化固醇結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白3 等可能為化療療效預(yù)測(cè)的生物標(biāo)志物。趙冠華等[29]取81 例肺鱗癌患者以應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）檢測(cè)初治晚期SCC患者接受紫杉醇類聯(lián)合鉑類化療前血清多肽, 并分析其與化療療效的相關(guān)性，靈敏度為90.0%,特異性為80.0%。伊力亞爾等[30]應(yīng)用SELDI-TOF-MS 蛋白質(zhì)芯片技術(shù)分析腎癌手術(shù)前后血清蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化，并與SVM等生物信息學(xué)相結(jié)合，最終篩選出5 種具有臨床意義的蛋白質(zhì)，Bel-2 家族細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白、WAP 二硫化四物核心蛋白、Krueppel 樣因子8、單核細(xì)胞趨化蛋白、血清β- 淀粉樣蛋白4，這五種蛋白質(zhì)作為生物標(biāo)志物，預(yù)測(cè)腎透明細(xì)胞癌的靈敏度為87.5%(35/40)，特異度為86.8%(46/53)，這些蛋白在腎癌發(fā)病以及進(jìn)展過程起著致病角色。通過術(shù)后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)這些差異性蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)他們可作為早期預(yù)測(cè)、術(shù)后復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物，在腎透明細(xì)胞癌的療效評(píng)價(jià)、預(yù)后評(píng)估以及靶向治療方面有一定參考價(jià)值。Lin 等[31]通過2D-DIGE 比較及質(zhì)譜鑒定分析胰腺癌患者手術(shù)前后血液樣本以及術(shù)后一年內(nèi)病情惡化的患者和未惡化的患者的血液樣本，發(fā)現(xiàn)它們之中有候選預(yù)后標(biāo)志蛋白等差異蛋白，對(duì)胰腺癌的治療和預(yù)后觀察的研究很有幫助。Yang F 等[32]以肺鱗癌的血清蛋白質(zhì)組分析了腫瘤相關(guān)抗原，鑒定出與肺鱗癌相關(guān)的抗原有14 種，并驗(yàn)證了在肺鱗癌中上調(diào)的有6 種，提示了他們?cè)诜西[癌的診斷和治療中的潛在應(yīng)用價(jià)值。馬曉麗[33]等收集52 例診斷明確的局部晚期和晚期食管鱗癌患者治療前、后血清，利用蛋白質(zhì)技術(shù)同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量技術(shù)（iTRAQ 技術(shù)）篩選食管癌放化療療效相關(guān)的篩選出與腫瘤相關(guān)、具有核心作用且介導(dǎo)腫瘤相關(guān)通路的優(yōu)勢(shì)血清差異蛋白，共篩選出17 個(gè)有顯著差異的差異蛋白，其中TF、ADIPOQ、PIGR、CD14 等與食管癌療效相關(guān)的重要蛋白質(zhì)分子群和分子信號(hào)通路，為食管癌的精準(zhǔn)治療提供新靶點(diǎn)和新策略。FU 等[34]應(yīng)用蛋白質(zhì)組技術(shù)研究表明，在肝癌組織中，HSP90a 的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、療效監(jiān)測(cè)密切相關(guān)。

3 小結(jié)與展望

蛋白質(zhì)組學(xué)研究開辟了蛋白質(zhì)功能和人類疾病研究的新領(lǐng)域，應(yīng)用血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在腫瘤研究應(yīng)用取得了一些進(jìn)展，但相對(duì)于蛋白質(zhì)組學(xué)研究誘人的前景來說，目前的研究還很不夠，盡管有很多種血液腫瘤標(biāo)志物被用于腫瘤的研究臨床上，，如甲胎蛋白（AFP）用于的篩查肝癌高危人群；糖類抗原125（CA125）應(yīng)用于篩查卵巢癌早期；前列腺特異性抗原（PSA）應(yīng)用于篩查前列腺癌的早期等。但這些標(biāo)志物也不是絕對(duì)理想的血液腫瘤標(biāo)志物，他們對(duì)特定類型的癌癥并不完全具有特異性，敏感度也不能達(dá)到100%，有些標(biāo)記物水平變化沒有早于臨床診斷，敏感性低，假陽性率低，在臨床應(yīng)用中，經(jīng)得住時(shí)間與實(shí)踐考驗(yàn)的標(biāo)志物亦是少之又少?，F(xiàn)在還有多種惡性腫瘤如腎癌等沒有可應(yīng)用于臨床的血清特異性標(biāo)志物，等待更多研究人員的發(fā)現(xiàn)、探尋，或者即使有些腫瘤已有研究人員應(yīng)用血清蛋白質(zhì)組開展了不少研究，發(fā)現(xiàn)或認(rèn)為找到了一些腫瘤特異性標(biāo)志物的蛋白質(zhì)，但有些標(biāo)志物特異性差，仍缺乏臨床驗(yàn)證，應(yīng)用于作為腫瘤療效評(píng)價(jià)、預(yù)后判斷及其藥物篩選研究也不夠多。應(yīng)用蛋白組技術(shù)發(fā)現(xiàn)、尋找腫瘤血清標(biāo)志物并應(yīng)用于療效評(píng)價(jià)、藥物篩選還有巨大潛力和研究空間，隨著血清蛋白質(zhì)組技術(shù)的不斷完善和發(fā)展，受高豐度蛋白影響低豐度的測(cè)定以及極酸堿性和難溶的蛋白質(zhì)檢測(cè)等的局限減少，多種蛋白質(zhì)組技術(shù)方法的聯(lián)用，應(yīng)用血清蛋白組學(xué)技術(shù)尋找到腫瘤理想的血清標(biāo)志物、研究發(fā)現(xiàn)腫瘤新的標(biāo)記物，探索腫瘤治療靶點(diǎn)、探明腫瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制、仍具有有難以估量的前景。