陳超杰,鐘志鳳,何嘉莉,張水華

(1.梧州學(xué)院,化學(xué)工程與資源再利用學(xué)院,廣西 梧州 543002; 2.福建醫(yī)科大學(xué),福建省新藥安全性評(píng)價(jià)中心,福州 350122; 3.陸軍軍醫(yī)大學(xué),高原軍事醫(yī)學(xué)系高原作業(yè)醫(yī)學(xué)教研室,重慶 400038)

焦慮癥(anxiety disorders)是一類(lèi)以發(fā)作性或持續(xù)性情緒焦慮,并伴有自主神經(jīng)紊亂、肌肉緊張與運(yùn)動(dòng)不安等癥狀的精神性疾病。 近年來(lái),該病的發(fā)生率隨著社會(huì)壓力的增加而逐年上升,已經(jīng)成為影響人們生活質(zhì)量的主要精神疾病之一[1]。 焦慮癥的病因仍不明確,而在臨床中抗焦慮藥因其不良反應(yīng)較多受到限制[2]。 因此,焦慮癥以及抗焦慮新藥成為醫(yī)藥學(xué)研究的熱點(diǎn)。 焦慮癥的動(dòng)物模型是研究焦慮癥和研發(fā)抗焦慮新藥的重要載體,為該病的診斷、預(yù)防和治療提供線(xiàn)索和理論指導(dǎo)。 目前有關(guān)焦慮癥的動(dòng)物模型多達(dá)30 種,大多經(jīng)過(guò)臨床有效的抗焦慮藥物檢驗(yàn)后建立起來(lái)的[3-4]。 但部分模型在維持動(dòng)物焦慮狀態(tài)和評(píng)價(jià)不同種類(lèi)抗焦慮藥等方面存在局限性[5]。

防御行為焦慮模型最初是通過(guò)受試動(dòng)物與天敵動(dòng)物的接觸,造成受試動(dòng)物的焦慮狀態(tài),但這種方法易致使受試動(dòng)物軀體創(chuàng)傷;隨后,又發(fā)展為通過(guò)暴露天敵氣味來(lái)引起受試動(dòng)物焦慮樣行為的動(dòng)物模型[6]。 這類(lèi)模型可稱(chēng)之為天敵焦慮模型,其優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,對(duì)動(dòng)物應(yīng)激的時(shí)間短,而焦慮效應(yīng)可持續(xù)1 周以上,便于多個(gè)時(shí)間點(diǎn)和不同檢測(cè)方法對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行綜合研究[7-9]。 該類(lèi)模型可用于評(píng)價(jià)包括苯二氮卓類(lèi)和三環(huán)類(lèi)等多種抗焦慮藥,也可用于焦慮癥機(jī)制的探索[10]。 因此它可能是一類(lèi)較為全面地反映焦慮行為表現(xiàn)、作用機(jī)制及藥物治療等多方面的焦慮癥動(dòng)物模型,有利于焦慮癥的發(fā)病機(jī)制研究和新藥篩選。 然而,在實(shí)際操作中,該類(lèi)模型所需的天敵動(dòng)物(貓)在微生物控制等級(jí)難以達(dá)到動(dòng)物屏障系統(tǒng)的要求,使之在SPF 級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用帶來(lái)困難。 而天敵氣味的應(yīng)用也存在諸多不足,包括不好控制氣味的投放量,氣味投放過(guò)程失當(dāng)容易污染動(dòng)物房,從而影響其他試驗(yàn)的進(jìn)行等。

有研究者發(fā)現(xiàn)聲音驚嚇能誘導(dǎo)動(dòng)物焦慮樣行為的產(chǎn)生。 Kaltwasser[11]利用10 kHz、110 dB 純音對(duì)大鼠進(jìn)行刺激,成功誘導(dǎo)出動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。 但該模型的缺點(diǎn)是聲音強(qiáng)度太大,一般單調(diào)而高分貝的聲音也可誘發(fā)嚙齒類(lèi)動(dòng)物癲癇發(fā)作,提示這種方法還會(huì)引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其他神經(jīng)精神性病變[12]。 有研究人員發(fā)現(xiàn)83.9 dB 的雷鳴聲能引起比格犬產(chǎn)生焦慮狀態(tài),提示在聲音強(qiáng)度不大的情況下,利用恐嚇聲也能誘導(dǎo)出焦慮效應(yīng),為本文提供了很好的思路[13]。 結(jié)合天敵暴露和聲音驚嚇的特點(diǎn),本課題組嘗試?yán)眠m當(dāng)聲音強(qiáng)度的天敵聲音(貓叫聲)對(duì)大鼠建立焦慮癥模型。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF 級(jí)雄性SD 大鼠72 只,體重180 ～200 g,2月齡,購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司[SCXK(京)2012-0001]。 動(dòng)物在福建醫(yī)科大學(xué)新藥安全性評(píng)價(jià)中心SPF 屏蔽系統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室[SYXK(閩)2013-0001]飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)開(kāi)展前經(jīng)過(guò)福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)的審查批準(zhǔn)(批準(zhǔn)號(hào)：2017-14)。 大鼠在標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)盒內(nèi)喂養(yǎng),每盒5 只,每周換籠兩次,人工照明,明暗各12 h,室溫20℃～26℃,濕度40%～70%。 并嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R 原則給予人道的關(guān)懷。

1.2 主要試劑和儀器

地西泮注射液(天津金耀氨基酸有限公司,批號(hào)1201301);0.9%氯化鈉注射液(福州海王福藥制藥有限公司,批號(hào)：150401B21);地西泮均用生理鹽水配制到相應(yīng)濃度的溶液進(jìn)行腹腔注射給藥。 動(dòng)物視頻行為分析系統(tǒng)(Smart V2.5,Panlab 公司,西班牙);曠場(chǎng)試驗(yàn)箱(上海移數(shù)信息科技有限公司);大鼠高架十字迷宮(上海移數(shù)信息科技有限公司);音響(SPA 1312,飛利浦,荷蘭); 數(shù)字聲級(jí)計(jì)TES1350A(泰仕電子工業(yè)股份有限公司,計(jì)量鑒定號(hào)：1212130252)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 天敵聲音應(yīng)激

錄制貓叫聲音和白色噪音音頻作為天敵刺激物和參照物,兩種聲音的頻率分別是0 ～22 kHz(中心頻率：2.541 kHz)和0～8 kHz,均在大鼠可接受的聽(tīng)力范圍內(nèi)[14]。 音頻通過(guò)電腦控制音響循環(huán)播放,音響距離應(yīng)激動(dòng)物籠具1 m 遠(yuǎn),聲音強(qiáng)度通過(guò)數(shù)字聲級(jí)計(jì)控制在(60.0 ± 5.0) dB。 測(cè)試房間的背景聲音強(qiáng)度為51.2 dB。

1.3.2 曠場(chǎng)試驗(yàn)(open-field test, OFT)

大鼠放置于方形敞口的曠場(chǎng)箱(100 cm×100 cm×38 cm)內(nèi),通過(guò)動(dòng)物視頻監(jiān)測(cè)系統(tǒng)觀察和分析其在曠場(chǎng)箱內(nèi)5 min 的自主活動(dòng)情況,記錄和分析的指標(biāo)包括：平均速度、中央?yún)^(qū)(50 cm×50 cm)路程比例和中央?yún)^(qū)停留時(shí)間比例。 平均速度作為評(píng)價(jià)動(dòng)物自主活動(dòng)的指標(biāo)。 中央?yún)^(qū)的路程比例和停留時(shí)間比例則是反映動(dòng)物焦慮行為的指標(biāo),兩者的數(shù)值越小則說(shuō)明動(dòng)物的焦慮狀態(tài)越嚴(yán)重。 每測(cè)試完一只動(dòng)物需清洗曠場(chǎng)箱的底部和側(cè)壁以使之清潔無(wú)異味,測(cè)試均在上午九點(diǎn)到中午十二點(diǎn)之間進(jìn)行。

1.3.3 高架十字迷宮測(cè)試(evaluated-plus maze,EPM)

大鼠EPM 是由兩個(gè)開(kāi)臂(50 cm×10 cm)和兩個(gè)相對(duì)閉臂(50 cm×10 cm×50 cm)及中央平臺(tái)區(qū)(10 cm×10 cm)連接而成,裝置離地面高度為50 cm。 放置大鼠于中央平臺(tái)區(qū),頭朝開(kāi)臂,通過(guò)動(dòng)物視頻監(jiān)測(cè)系統(tǒng)觀察和分析記錄其在5 min 內(nèi)平均速度、開(kāi)臂區(qū)路程比例和開(kāi)臂停留時(shí)間比例。 平均速度作為評(píng)價(jià)動(dòng)物自主活動(dòng)的指標(biāo)。 開(kāi)臂區(qū)路程比例和停留時(shí)間的比例則是反映動(dòng)物焦慮行為的指標(biāo),兩者的數(shù)值越小則說(shuō)明動(dòng)物的焦慮狀態(tài)越嚴(yán)重。 每測(cè)試完一只動(dòng)物需清洗實(shí)驗(yàn)裝置以使之清潔無(wú)異味,測(cè)試均在上午九點(diǎn)到中午十二點(diǎn)之間進(jìn)行。

1.3.4 單次天敵聲音應(yīng)激

大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照組(CON)、白色噪音刺激10 min(WN10) 和60 min 處理組(WN60)、天敵聲音刺激10 min(PS10)和60 min 處理組(PS60),每組8 只。 各組動(dòng)物在應(yīng)激前(D0),應(yīng)激后第1(D1)和第3 天(D3)進(jìn)行OFT 測(cè)試,以及第7 天(D7)進(jìn)行EPM 測(cè)試,行為學(xué)測(cè)試安排見(jiàn)如圖1。

1.3.5 重復(fù)天敵聲音應(yīng)激

大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照組(CON)、白色噪音處理組(RWN60)、天敵聲音處理組(RPS60)和天敵聲音+陽(yáng)性對(duì)照處理組(RPS60+DZP),每組8 只。 動(dòng)物經(jīng)連續(xù)5 d,每天1 次60 min 的應(yīng)激后,分別于第1 天(D1)和第7 天(D7)進(jìn)行EPM 測(cè)試,第3 天(D3)OFT 測(cè)試,行為學(xué)測(cè)試安排見(jiàn)如圖2。其中,RPS60+DZP 組的動(dòng)物是在D7 測(cè)試前1 h 給予1 mg/kg 的DZP,其余處理同RPS60 組。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

通過(guò)Graph Pad Prism 7.0 軟件,采用單因素方差分析處理數(shù)據(jù),結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,P＜0.05 為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠單次天敵聲音應(yīng)激的行為學(xué)變化

在單次聲音應(yīng)激前的OFT 結(jié)果(圖3A)提示,各組大鼠在平均速度(圖3B)、中央?yún)^(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例(圖3C)和停留時(shí)間比例(圖3D)均未見(jiàn)顯著性差異(P＞0.05)。 由此可見(jiàn),各組大鼠的總體運(yùn)動(dòng)情況相似,未見(jiàn)顯著的焦慮樣行為,以此推斷同一批購(gòu)進(jìn)的SD 大鼠在行為學(xué)上未見(jiàn)明顯的個(gè)體差異。 因?yàn)橹貜?fù)應(yīng)激測(cè)試的動(dòng)物與單次應(yīng)激為同一批次,因此重復(fù)應(yīng)激試驗(yàn)未進(jìn)行類(lèi)似的驗(yàn)證。

圖1 大鼠單次應(yīng)激的行為學(xué)測(cè)試安排示意圖Figure 1 Schematic diagram of behavior experimental procedures for rats by single stress

圖2 大鼠重復(fù)應(yīng)激的行為學(xué)測(cè)試安排示意圖Figure 2 Schematic diagram of behavior experimental procedures for rats by repeated stresses

圖3 單次應(yīng)激前大鼠在OFT 中的活動(dòng)情況Figure 3 Activity of rats the before single stress in OFT

經(jīng)過(guò)單次聲音應(yīng)激1 d 后(圖4),各組大鼠在曠場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)速度相似(P＞0.05,圖4B)。 10 min和60 min 天敵聲音應(yīng)激的大鼠在中央?yún)^(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例均顯著低于空白對(duì)照組和白色噪音處理組(P＜0.01,圖4C、4D),而這兩組不同時(shí)長(zhǎng)天敵聲音應(yīng)激處理組之間則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P ＞0.05)。 由此可見(jiàn),不同時(shí)長(zhǎng)的天敵聲音刺激在不影響大鼠的總體運(yùn)動(dòng)情況下,經(jīng)過(guò)1 d 后均能有效引起它們的焦慮樣行為,而相同時(shí)長(zhǎng)的白色噪音則無(wú)焦慮樣行為的變化。

經(jīng)過(guò)單次聲音應(yīng)激3 d 后(圖5),各組大鼠在曠場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)速度相近(P＞0.05,圖5B)。 10 min和60 min 天敵聲音應(yīng)激的大鼠在中央?yún)^(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例均顯著低于空白對(duì)照組和白色噪音處理組(P＜0.01,圖5C、5D),而這兩組不同時(shí)長(zhǎng)天敵聲音應(yīng)激處理組之間則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P ＞0.05)。 由此可見(jiàn),經(jīng)過(guò)天敵聲音刺激3 d 后,大鼠仍處于焦慮狀態(tài)。

圖4 單次應(yīng)激后第1 天(D1)大鼠在OFT 中的活動(dòng)情況Figure 4 Activity of the rats at day 1 (D1) after single stress in OFT

經(jīng)過(guò)單次聲音應(yīng)激7 d 后(圖6),各組大鼠在EPM 中的運(yùn)動(dòng)速度一致(P＞0.05,圖6B)。 10 min和60 min 天敵聲音應(yīng)激的大鼠在開(kāi)臂區(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例均顯著低于空白對(duì)照組和白色噪音處理組(P ＜0.01,圖6C、6D),而這兩組不同時(shí)長(zhǎng)天敵聲音應(yīng)激處理組之間則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P ＞0.05)。 由此可見(jiàn),經(jīng)過(guò)單次天敵聲音刺激的大鼠能持續(xù)焦慮狀態(tài)不少于7 d。

2.2 大鼠重復(fù)天敵聲音應(yīng)激的行為學(xué)變化

單次天敵聲音應(yīng)激能使大鼠持續(xù)呈現(xiàn)焦慮樣行為,但重復(fù)刺激是否仍能保持這種效應(yīng)? 反復(fù)應(yīng)激是否會(huì)使大鼠對(duì)天敵聲音產(chǎn)生耐受呢? 由圖7 的結(jié)果可見(jiàn),經(jīng)過(guò)重復(fù)聲音應(yīng)激1 d 后,各組大鼠在EPM 中的運(yùn)動(dòng)速度類(lèi)似(P＞0.05,圖7B)。 重復(fù)天敵聲音應(yīng)激的大鼠在開(kāi)臂區(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例均顯著低于空白對(duì)照組和白色噪音處理組(P＜0.01,圖7C、7D)。 由此可見(jiàn),重復(fù)天敵聲音刺激在不影響大鼠的總體運(yùn)動(dòng)情況下,經(jīng)過(guò)1 d后能有效引起它們的焦慮樣行為。 同樣條件下的白色噪音則無(wú)焦慮樣行為的改變。

經(jīng)過(guò)重復(fù)聲音應(yīng)激3 d 后(圖8),各組大鼠在曠場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)速度相似(P＞0.05,圖8B)。 重復(fù)天敵聲音應(yīng)激的大鼠在中央?yún)^(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例均顯著低于空白對(duì)照組和白色噪音處理組(P＜0.01,圖8C、8D)。 由此可見(jiàn),經(jīng)過(guò)重復(fù)天敵聲音刺激3 d 后,大鼠仍處于焦慮狀態(tài)。

經(jīng)過(guò)重復(fù)聲音應(yīng)激7 d 后(圖9),各組大鼠在EPM 中的運(yùn)動(dòng)速度保持一致(P ＞0. 05,圖9B)。 重復(fù)天敵聲音應(yīng)激的大鼠在開(kāi)臂區(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例均顯著低于空白對(duì)照組和白色噪音處理組(P ＜0. 01),而1 mg/kg 地西泮能顯著提高天敵聲音應(yīng)激大鼠在開(kāi)臂區(qū)的運(yùn)動(dòng)路程比例和停留時(shí)間比例(P ＜0. 01,圖9C、9D)。 由此可見(jiàn),重復(fù)天敵聲音刺激仍能引起大鼠持續(xù)的焦慮樣行為,而且大鼠不會(huì)對(duì)此聲音產(chǎn)生耐受。

圖5 單次應(yīng)激后第3 天(D3)大鼠在OFT 中的活動(dòng)情況Figure 5 Activity of the rats at day 3 (D3) after single stress in OFT

圖6 單次應(yīng)激后第7 天(D7)大鼠在EPM 中的活動(dòng)情況Figure 6 Activity of the rats at day 7 (D7) after single stress in EPM

圖7 重復(fù)應(yīng)激后第1 天大鼠在EPM 中的活動(dòng)情況Figure 7 Activity of the rats at D1after repeated stresses in EPM

圖8 重復(fù)應(yīng)激后第3 天大鼠在OFT 中的活動(dòng)情況Figure 8 Activity of the rats at D3 after repeated stresses in OFT

圖9 重復(fù)應(yīng)激后第7 天大鼠在EPM 中的活動(dòng)情況Figure 9 Activity of the rats at D1after repeated stresses in EPM

3 討論

OFT 和EPM 是評(píng)價(jià)動(dòng)物焦慮情緒的經(jīng)典測(cè)試方法[15]。 OFT 是由Hall 于1934 年最先提出用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行為學(xué)評(píng)價(jià),后經(jīng)發(fā)展為評(píng)價(jià)動(dòng)物自主行為活動(dòng)和焦慮行為的經(jīng)典方法[16]。 嚙齒類(lèi)動(dòng)物單獨(dú)進(jìn)入曠場(chǎng)后,由于脫離了以往的群居生活,而且曠場(chǎng)面積要比飼養(yǎng)環(huán)境更為寬廣,從而導(dǎo)致動(dòng)物產(chǎn)生恐懼,尤其是在曠場(chǎng)的中間區(qū)域相比外周區(qū)域更容易受到威脅或攻擊;鑒于嚙齒類(lèi)動(dòng)物對(duì)曠場(chǎng)中間區(qū)域的好奇探索特性與其顧慮情緒的矛盾沖突,從而使其產(chǎn)生焦慮樣行為,通過(guò)記錄動(dòng)物在曠場(chǎng)中央?yún)^(qū)的行為變化,可以作為動(dòng)物焦慮情緒的評(píng)價(jià)指標(biāo)[17]。 EPM 源于高架Y 字型迷宮(elevated Y maze),經(jīng)改進(jìn)后正式用于焦慮研究[14]。 EPM 用于動(dòng)物焦慮評(píng)價(jià)的原理是,EPM 裝置距離地面的高度能使嚙齒類(lèi)動(dòng)物在開(kāi)臂區(qū)產(chǎn)生畏懼情緒,基于嚙齒類(lèi)動(dòng)物對(duì)高架十字迷宮開(kāi)臂區(qū)的好奇探索和在開(kāi)臂區(qū)的危險(xiǎn)意識(shí)而產(chǎn)生恐懼逃避的心理沖突,而產(chǎn)生焦慮行為的改變,通過(guò)記錄動(dòng)物在EPM 開(kāi)臂區(qū)的行為變化,可以作為動(dòng)物焦慮情緒的評(píng)價(jià)指標(biāo)[18]。需要明確指出的是,這兩種測(cè)試方法有時(shí)會(huì)被誤以為是“焦慮動(dòng)物模型”,但它們僅能在測(cè)試過(guò)程中反映動(dòng)物自身的焦慮行為變化,不能使動(dòng)物表現(xiàn)出持續(xù)性的焦慮狀態(tài),也不能造成相應(yīng)的病理改變,即焦慮癥的發(fā)生。 因此OFT 和EPM 可用于監(jiān)測(cè)動(dòng)物的焦慮行為變化或評(píng)價(jià)藥物的抗焦慮效果,但并不能作為探究焦慮癥的發(fā)病機(jī)制和針對(duì)焦慮癥治療藥物評(píng)價(jià)的動(dòng)物模型[5]。 焦慮癥動(dòng)物模型應(yīng)該是在一定外界刺激條件下產(chǎn)生持續(xù)性的焦慮情緒、相關(guān)的行為學(xué)指征和生化指標(biāo)的變化,而且能被抗焦慮藥所驗(yàn)證。 本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),60 dB 天敵聲音刺激能引起SD 大鼠的焦慮樣行為的增加和血漿中ACTH 和皮質(zhì)酮水平的升高,由此提示天敵聲音誘導(dǎo)動(dòng)物焦慮癥模型的可行性[19]。 然而這個(gè)模型還有很多影響因素有待進(jìn)一步探索,例如天敵聲音的刺激時(shí)長(zhǎng)和反復(fù)刺激是如何影響該模型的焦慮樣行為變化等。 故本課題組對(duì)此進(jìn)行了探索。

本研究的結(jié)果提示,大鼠在單次天敵聲音刺激后,能維持較高的焦慮效應(yīng)至少7 d,而且10 min 和60 min 的刺激時(shí)長(zhǎng)引起的焦慮效應(yīng)無(wú)差異,從實(shí)驗(yàn)人員便捷省時(shí)的角度來(lái)看,天敵聲音10 min 刺激的造模條件似乎更佳。 相同條件下的白色噪音則無(wú)法增加大鼠的焦慮樣行為。 此外,為了考察天敵聲音刺激的次數(shù)和每次刺激的時(shí)長(zhǎng)兩方面對(duì)模型的影響,本研究進(jìn)一步通過(guò)每天天敵聲音60 min 刺激,持續(xù)5 d 的造模條件,觀察大鼠對(duì)刺激源的耐受性。 在重復(fù)天敵聲音刺激5 d 后,大鼠仍能產(chǎn)生焦慮樣行為,其效應(yīng)可持續(xù)至少7 d,相同條件下的白色噪音則無(wú)此效應(yīng)。 地西泮作為經(jīng)典的抗焦慮藥,可用于驗(yàn)證焦慮動(dòng)物模型[20]。 本研究發(fā)現(xiàn),地西泮能有效抑制重復(fù)天敵聲音應(yīng)激7 d 后大鼠的焦慮效應(yīng),進(jìn)一步證明天敵聲音大鼠模型的有效性,并提示該模型可用于抗焦慮藥療效和機(jī)制探索的可能性。

由此可見(jiàn),天敵聲音的強(qiáng)度僅在60 dB、應(yīng)激10 min 內(nèi)即可起焦慮樣行為,其效應(yīng)能持續(xù)至少7 d,而且重復(fù)應(yīng)激不耐受。 因此,天敵聲音誘導(dǎo)的大鼠焦慮模型具有以下優(yōu)勢(shì)：(1)操作簡(jiǎn)便。 天敵聲音可以直接在籠具旁或測(cè)試的動(dòng)物房?jī)?nèi)播放,避免天敵動(dòng)物及其氣味進(jìn)入動(dòng)物房造成污染,可同時(shí)對(duì)多只動(dòng)物進(jìn)行應(yīng)激。 (2)天敵聲音應(yīng)激的指標(biāo)可控性強(qiáng)。 包括天敵聲音的強(qiáng)度和頻率均可檢測(cè),其強(qiáng)度和播放時(shí)長(zhǎng)亦易于人為控制。 (3)對(duì)操作者和動(dòng)物的損害較小。 高分貝噪音長(zhǎng)時(shí)間的刺激會(huì)對(duì)機(jī)體造成損傷,尤其是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可能會(huì)有癲癇、耳聾等的損害[12,21];而因天敵聲音的聲響低和播放的時(shí)長(zhǎng)較短,不會(huì)引起操作者的不適,對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生器質(zhì)性病變的風(fēng)險(xiǎn)也能有所降低。 鑒于以上,本課題組利用天敵聲音誘導(dǎo)建立了一種便捷可靠的大鼠焦慮模型,可能為焦慮癥的認(rèn)識(shí)和抗焦慮新藥篩選提供便利有效的模型工具。