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        上皮細(xì)胞黏附因子及腫瘤相關(guān)糖蛋白-72在結(jié)腸癌中的表達(dá)及臨床意義

        2019-12-25 08:55:08佘遠(yuǎn)霞
        實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志 2019年21期
        關(guān)鍵詞:陽(yáng)性者糖蛋白結(jié)腸癌

        蔡 蕓, 佘遠(yuǎn)霞, 劉 姝

        (江蘇省如皋市人民醫(yī)院 病理科, 江蘇 如皋, 226500)

        中國(guó)每年新發(fā)結(jié)腸癌患者約為40萬(wàn),病死者多達(dá)20萬(wàn),且呈逐年上升的趨勢(shì)[1-2]。作為一種常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,結(jié)腸癌預(yù)后與臨床分期、浸潤(rùn)程度、是否轉(zhuǎn)移密切相關(guān),尋找結(jié)腸癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)因子,對(duì)于指導(dǎo)治療、評(píng)估預(yù)后非常重要。上皮細(xì)胞黏附因子(EpCAM)具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、參與腫瘤血管生成、促進(jìn)組織再生等多種生物學(xué)功能,是一種強(qiáng)致瘤性、遺傳穩(wěn)定的腫瘤標(biāo)志物[3-4]。腫瘤相關(guān)糖蛋白-72(TAG-72)屬于一種高分子量糖蛋白類化合物,其表達(dá)水平與腫瘤生物學(xué)行為及預(yù)后密切相關(guān),已成為免疫治療消化道腫瘤的合適靶位[5-6]。目前國(guó)內(nèi)有關(guān)EpCAM、TAG-72與結(jié)腸癌關(guān)系的研究并不多見(jiàn),本研究采用免疫組化的方法來(lái)分析EpCAM、TAG-72在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義,現(xiàn)報(bào)告如下。

        1 材料與方法

        1.1 病理材料

        收集2015年1月—2016年12月132例結(jié)腸癌患者組織標(biāo)本,男78例,女54例; 年齡36~72歲,平均(48.32±6.12)歲; 腫瘤直徑≥3 cm者62例, <3 cm者70例; 高分化腺癌45例,中分化腺癌52例,低分化腺癌26例,黏液腺癌9例; 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移58例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移74例。

        1.2 主要試劑

        EpCAM免抗人多克隆抗體、磷酸鹽緩沖液、免疫組化檢測(cè)試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺顯色試劑盒均購(gòu)自上海生工生物技術(shù)有限公司; TAG-72免抗人多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司, En Vision染色試劑盒購(gòu)自丹麥Dako公司。

        1.3 方法

        所有標(biāo)本均經(jīng)4%甲醛固定、脫水、石蠟包埋, 2 μm連續(xù)切片,根據(jù)免疫試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行免疫組化檢測(cè)。EpCAM抗體、TAG-72抗體稀釋濃度均為1∶100, 檸檬酸鹽緩沖液抗原修復(fù),二氨基苯胺顯色。磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照,使用已知陽(yáng)性標(biāo)本作為陽(yáng)性對(duì)照。

        1.4 結(jié)果判斷

        以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核呈棕黃色或棕褐色判斷EpCAM及TAG-72陽(yáng)性細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分、陽(yáng)性細(xì)胞率評(píng)分判斷陽(yáng)性、陰性患者。細(xì)胞染色評(píng)分: 無(wú)染色計(jì)0分,淡黃色計(jì)1分,棕黃色計(jì)2分,棕褐色計(jì)3分。陽(yáng)性細(xì)胞率評(píng)分: <5%計(jì)0分, 5%~<10%計(jì)1分, 10%~<20%計(jì)2分, 20%~<50%計(jì)3分, ≥50%計(jì)4分。細(xì)胞染色評(píng)分與陽(yáng)性細(xì)胞率評(píng)分之和≥3分者判為陽(yáng)性,≤2分者判為陰性。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        2 結(jié) 果

        2.1 免疫組化檢查結(jié)果

        EpCAM及TAG-72免疫組化染色陽(yáng)性表達(dá)主要定位于細(xì)胞質(zhì),以棕黃色或棕褐色為主。132例結(jié)腸癌組織標(biāo)本中, EpCAM表達(dá)陽(yáng)性率為65.91%(87/132),平均評(píng)分(2.48±0.54)分; TAG-72表達(dá)陽(yáng)性率為70.45%(93/132),平均評(píng)分(2.56±0.62)分。EpCAM陽(yáng)性并TAG-72陰性10例, EpCAM陽(yáng)性并TAG-72陽(yáng)性77例, EpCAM陰性并TAG-72陰性19例, EpCAM陰性并TAG-72陽(yáng)性16例。

        2.2 EpCAM及TAG-72表達(dá)與結(jié)腸癌病理特征

        的關(guān)系

        不同性別、年齡的結(jié)腸癌患者EpCAM及TAG-72陽(yáng)性率、評(píng)分比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); 而腫瘤直徑>3 cm、低分化/黏胰腺、TNM分期(Ⅲ、Ⅳ期)、T3~4浸潤(rùn)深度、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者EpCAM表達(dá)陽(yáng)性率及TAG-72表達(dá)陽(yáng)性率、評(píng)分顯著高于腫瘤直徑≤3 cm、高中分化、TNM分期(Ⅰ、Ⅱ期)、T1~2浸潤(rùn)深度、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05或P<0.01)。見(jiàn)表1。

        表1 EpCAM及TAG-72表達(dá)與結(jié)腸癌病理特征的關(guān)系

        EpCAM: 上皮細(xì)胞黏附因子; TAG-72: 腫瘤相關(guān)糖蛋白-72。與同一病理特征的另一亞項(xiàng)比較, *P<0.05, **P<0.01。

        2.3 EpCAM及TAG-72表達(dá)與結(jié)腸癌生存期的

        關(guān)系

        EpCAM表達(dá)陽(yáng)性、TAG-72表達(dá)陽(yáng)性、EpCAM表達(dá)并TAG-72表達(dá)陽(yáng)性者評(píng)分顯著高于表達(dá)陰性者,生存時(shí)間顯著短于表達(dá)陰性者(P<0.01); EpCAM表達(dá)陽(yáng)性并TAG-72表達(dá)陽(yáng)性者評(píng)分顯著高于EpCAM表達(dá)陽(yáng)性者、TAG-72表達(dá)陽(yáng)性者(P<0.01), 生存時(shí)間顯著短于EpCAM表達(dá)陽(yáng)性者、TAG-72表達(dá)陽(yáng)性者(P<0.01)。見(jiàn)表2。

        表2 EpCAM及TAG-72表達(dá)與結(jié)腸癌生存期的關(guān)系

        EpCAM: 上皮細(xì)胞黏附因子; TAG-72: 腫瘤相關(guān)糖蛋白-72。

        與陰性比較, **P<0.01; 與EpCAM表達(dá)并TAG-72表達(dá)陽(yáng)性比較, ##P<0.01。

        3 討 論

        結(jié)腸癌是指發(fā)生于結(jié)腸部位的消化道惡性腫瘤,早期根治術(shù)患者5年生存率高達(dá)90%, 發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者5年生存率不足10%[7]。結(jié)腸癌侵襲轉(zhuǎn)移是由多因素共同作用的結(jié)果,尋找特異性標(biāo)志物用于早期診斷、靶向治療、預(yù)后評(píng)估至關(guān)重要。EpCAM是由腫瘤相關(guān)鈣蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因編碼的一種跨膜糖蛋白,具有加快細(xì)胞周期及促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化、遷移、免疫逃逸等多種生物學(xué)功能[8-9]。作為一種腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物, EpCAM與β-連環(huán)蛋白(β-catenin)、Wnt信號(hào)通路密切相關(guān),被視為Wnt-β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的靶基因,其表達(dá)水平與β-catenin呈正相關(guān)性[10-11]。本研究中,不同腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者EpCAM表達(dá)水平存在差異,且EpCAM陽(yáng)性表達(dá)患者細(xì)胞染色評(píng)分、陽(yáng)性細(xì)胞率評(píng)分明顯高于陰性表達(dá)者,中位生存時(shí)間明顯短于陰性表達(dá)者,與周逢強(qiáng)等[12]研究報(bào)道基本相似,說(shuō)明EpCAM可作為鑒別診斷結(jié)腸癌的特異性標(biāo)志物。

        TAG-72是一種分子量約為100 kDa的黏糖蛋白,主要表達(dá)于乳腺癌、結(jié)腸癌等腺癌中,人體其他組織很少表達(dá)[13]。作為一種從乳腺癌轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物,TAG-72具有特異性高、靈敏度高的特點(diǎn)[14]。TAG-72屬于消化道惡性腫瘤的腫瘤相關(guān)抗原,為早期惡性腫瘤標(biāo)志物[15-16]。陳紅等[17-19]研究報(bào)道,隨著腺瘤級(jí)別的升高,TAG-72表達(dá)呈幾何級(jí)數(shù)式增加,高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變、結(jié)腸腺癌陽(yáng)性表達(dá)分別為88.89%、100.00%。本研究中,腫瘤直徑大于3 cm(80.65%)、低分化/黏胰腺(94.29%)、TNM分期(Ⅲ、Ⅳ期)(84.21%)、T3~4浸潤(rùn)深度(85.71%)、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(96.55%)患者EpCAM表達(dá)陽(yáng)性率及TAG-72表達(dá)陽(yáng)性率、評(píng)分均較高,且TAG-72表達(dá)陽(yáng)性結(jié)腸癌腫瘤中位生存時(shí)間為(16.25±3.42)個(gè)月,明顯短于陰性者,說(shuō)明TAG-72表達(dá)可作為判斷結(jié)腸癌嚴(yán)重程度及預(yù)后的指標(biāo)。

        綜上所述, EpCAM、TAG-72表達(dá)均與結(jié)腸癌腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等密切相關(guān), EpCAM、TAG-72均為陽(yáng)性表達(dá)者生存時(shí)間更短,提示EpCAM、TAG-72聯(lián)合應(yīng)用在鑒別診斷、靶向治療、預(yù)后評(píng)估中有很重要的臨床意義[20-21]。

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