張文凱，梁麗琪，孫偉銘，黃曉芳

技術(shù)與方法

中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院生物樣本庫的建立與完善

張文凱，梁麗琪，孫偉銘，黃曉芳

生物樣本庫即標(biāo)準(zhǔn)化收集、處理、保存和使用各種離體生物樣本和表型信息，為生物醫(yī)學(xué)研究提供科研材料的資源庫[1]。生物樣本庫涵蓋了豐富的疾病臨床信息與樣本生物學(xué)信息，為疾病的研究、遺傳和健康事業(yè)發(fā)展提供了戰(zhàn)略性資源，是支撐轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和精準(zhǔn)醫(yī)療實(shí)施的前提，更是研究型醫(yī)院與學(xué)科建設(shè)的基石。

歐美國家非常重視生物樣本庫的建設(shè)，1999 年英國建立的生物信息庫（UK Biobank）是目前世界上最大的醫(yī)療資料數(shù)據(jù)庫；2005 年美國國立癌癥研究所成立了美國國家癌癥中心生物樣本庫和生物樣本研究辦公室（Office of Biorepository and Biospecimen Research，OBBR），率先推動(dòng)了生物樣本庫的規(guī)范化建設(shè)。近十年來，隨著我國政府、醫(yī)院和各大研究機(jī)構(gòu)對(duì)生物樣本庫的關(guān)注，國內(nèi)大型城市陸續(xù)建立起各自的生物樣本庫：北京市建立了臍帶血造血干細(xì)胞庫，深圳市建立了華大國家基因庫······這些樣本庫的建立和發(fā)展為研究疾病的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸提供了良好的資源平臺(tái)。

隨著粵港澳大灣區(qū)一體化進(jìn)程的加速，廣東省積極推動(dòng)生物樣本庫的建設(shè)。中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院作為大灣區(qū)西岸的大型三甲綜合醫(yī)院，擁有豐富的疾病樣本資源，并與華大基因攜手共建“中大五院-華大聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室”，致力于降低出生缺陷，加強(qiáng)腫瘤防控，助力精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)。為落實(shí)國家生物醫(yī)學(xué)發(fā)展的長期規(guī)劃，我院積極籌備建設(shè)高質(zhì)量的生物樣本庫，以期實(shí)現(xiàn)對(duì)生物樣本、臨床資料等資源的高效利用，促進(jìn)臨床、科研和教學(xué)工作。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 場地 生物樣本庫建設(shè)面積達(dá) 500 余平方米，由醫(yī)院統(tǒng)一設(shè)計(jì)、規(guī)劃和管理，各科室經(jīng)由規(guī)范化的程序可共享樣本資源。樣本庫設(shè)有辦公室、檔案室、前處理室、綜合處理室、超低溫冰箱庫和液氮庫六個(gè)功能區(qū)，預(yù)計(jì)存儲(chǔ)規(guī)模達(dá) 300 萬份以上。

1.1.2 主要設(shè)備耗材 B2 生物安全柜購自廣州杉利貿(mào)易有限公司；Eppendorf 5810R 臺(tái)式冷凍離心機(jī)購自廣州市元晞生物科技有限公司；DW-86L829BPT 超低溫立式冰箱購自海爾集團(tuán)；全自動(dòng)磁珠提取純化系統(tǒng)和超微量分光光度計(jì)購自廣東丹利科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 組織架構(gòu) 生物樣本庫組織架構(gòu)由學(xué)術(shù)委員會(huì)、倫理委員會(huì)和執(zhí)行機(jī)構(gòu)三部分組成。執(zhí)行機(jī)構(gòu)由樣本庫主任負(fù)責(zé)統(tǒng)籌管理，下設(shè)數(shù)名專職技術(shù)員，負(fù)責(zé)樣本庫日常運(yùn)行和維護(hù)工作。技術(shù)員需接受專門培訓(xùn)，熟悉操作規(guī)程、樣本處理和手術(shù)取材等。

1.2.2 收樣方式 我院采用以非選擇性連續(xù)收集和以項(xiàng)目為導(dǎo)向的樣本收集兩種方式。非選擇性連續(xù)收集即在醫(yī)院相關(guān)政策的推動(dòng)下，對(duì)新入院患者非選擇性地收集各類型的生物樣本（需與患者簽訂知情同意書）；以項(xiàng)目為導(dǎo)向的樣本收集需經(jīng)學(xué)術(shù)委員會(huì)和倫理委員會(huì)的審查。對(duì)于無項(xiàng)目導(dǎo)向計(jì)劃的科室，執(zhí)行非選擇性連續(xù)收樣，即對(duì)新入院病人均采集血樣樣本；對(duì)于手術(shù)病人，均留存組織樣本。對(duì)于有項(xiàng)目導(dǎo)向的科室，按項(xiàng)目導(dǎo)向要求進(jìn)行樣本采集。

1.2.3 血液標(biāo)本的采集和處理 醫(yī)生對(duì)患者進(jìn)行評(píng)估，若符合入組標(biāo)準(zhǔn)，醫(yī)生在 HIS 系統(tǒng)中開立“樣本庫留樣”醫(yī)囑和“樣本使用告知書”，護(hù)士執(zhí)行采血；根據(jù)科室需要，可采集抗凝血或促凝血（2 ~ 3 ml/管），并及時(shí)暫存至 4 ℃冰箱；隨后冰盒運(yùn)輸至樣本庫。

血液標(biāo)本從采集到入庫的處理時(shí)限為 4 h。樣本庫人員收到血樣后，掃描采血管上條形碼進(jìn)行樣本接收、模板分裝、預(yù)打印標(biāo)簽等線上操作，打印并粘貼樣本標(biāo)簽；后對(duì)樣本進(jìn)行離心分裝處理（離心參數(shù)：4 ℃，1600 ×，10 min），根據(jù)實(shí)際分裝樣本數(shù)量執(zhí)行入庫操作，并存于–80 ℃冰箱。

1.2.4 組織標(biāo)本的采集和處理 組織標(biāo)本的采集應(yīng)在滿足臨床病理診斷的前提下，由樣本庫進(jìn)行采集和儲(chǔ)存。組織取材者通過樣本庫管理系統(tǒng)，提前獲知手術(shù)科室留樣需求及手術(shù)排班，并預(yù)打印出樣本標(biāo)簽，粘貼于凍存管上。組織離體后應(yīng)盡快處理，取材部位包括腫瘤組織、癌旁組織和正常組織，取材應(yīng)按照“正常-癌旁-腫瘤”的順序，以癌灶為中心水平向兩側(cè)取材，盡量保證組織樣本足夠大[2]；取材完成后，將樣本切割成大小約為 0.5 cm3的小塊，裝于對(duì)應(yīng)凍存管中，快速置于便攜式液氮罐里，隨后轉(zhuǎn)移至–80 ℃冰箱長期保存。需注意：①組織從離體到凍存應(yīng)在 30 min 內(nèi)完成，②取不同患者樣本時(shí)，應(yīng)更換刀片和器械。

1.2.5 尿液標(biāo)本的采集和處理 采樣流程及入庫操作參考 1.2.3，采集的尿樣暫存于 4 ℃冰箱。樣本庫人員收到尿液標(biāo)本后輕搖觀察，如尿樣渾濁，應(yīng)離心除去可見雜質(zhì)（離心參數(shù)：4 ℃，400 ×，15 min），離心后分為尿液上清和尿液沉淀兩部分，分開保存；如尿樣澄清，顛倒混勻后即可分裝[3]。尿液標(biāo)本從采集到入庫的處理時(shí)限為 2 h，樣本分裝后存于–80 ℃冰箱。

10月21日，由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳、吉林省人民政府駐北京辦事處、北京市農(nóng)村工作委員會(huì)共同主辦的“吉優(yōu)農(nóng)品·譽(yù)滿京城——2018吉林省優(yōu)質(zhì)特色農(nóng)產(chǎn)品大型宣傳推介活動(dòng)”在北京舉行，來自吉林省的60余家涉農(nóng)企業(yè)、200多種優(yōu)質(zhì)特色農(nóng)產(chǎn)品集中亮相展示。

1.2.6 樣本的信息化建設(shè) 樣本庫信息化建設(shè)包括：①樣本管理；②供體管理；③儲(chǔ)存管理；④質(zhì)控管理；⑤出庫申請(qǐng)；⑥科室出庫審批；⑦隨訪管理；⑧試劑耗材；⑨統(tǒng)計(jì)查詢等內(nèi)容。我院定制開發(fā)的樣本信息管理系統(tǒng)可與醫(yī)院信息管理系統(tǒng)（HIS）、手術(shù)室麻醉信息系統(tǒng)（AIMS）、實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIS）、電子病歷（EMR）等數(shù)據(jù)端口對(duì)接，將上述臨床診療信息和樣本生物信息進(jìn)行一體化整合，通過自動(dòng)獲取并存儲(chǔ)預(yù)設(shè)的臨床信息字段，生成樣本標(biāo)簽，實(shí)現(xiàn)樣本信息的可視化和可追溯性管理。

1.2.7 質(zhì)量控制 包括對(duì)樣本的儲(chǔ)存狀態(tài)、臨床信息和生物信息的核查和監(jiān)測。我院生物樣本庫主要采用隨機(jī)抽樣方式，每季度對(duì)新入庫樣本的 5% 進(jìn)行信息質(zhì)控，每半年對(duì)在庫樣本的 5% 進(jìn)行生物學(xué)質(zhì)量檢測，并形成各類質(zhì)控報(bào)告[4]。對(duì)于不合格樣本，執(zhí)行廢除出庫。

2 結(jié)果

2.1 建立標(biāo)準(zhǔn)化樣本操作流程

標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的樣本操作流程，是維護(hù)高質(zhì)量樣本的保障，也是樣本庫實(shí)現(xiàn)共享與利用的前提。我院前期通過實(shí)地調(diào)研、參觀國內(nèi)成熟樣本庫的管理模式，并參照國內(nèi)外權(quán)威樣本庫的建設(shè)與實(shí)踐指南[5]，建立起一套涵蓋樣本采集、處理、存儲(chǔ)、使用、質(zhì)控等各個(gè)環(huán)節(jié)的操作流程[6]（圖 1）。

2.2 樣本收集情況

生物樣本庫于 2018 年 8 月開始面向全院收集樣本，目前共存放各類樣本 8987 份，捐贈(zèng)者人數(shù) 1729 例，其中血液樣本 8511 份（包括全血、血漿、白膜層、血細(xì)胞、血清、血凝塊、PBMC 等不同成分）、組織樣本 424 份、尿液樣本 52 份；存樣科室涵蓋神經(jīng)內(nèi)科、腫瘤科、泌尿外科等 14 個(gè)科室（圖 2）。

2.3 樣本質(zhì)控情況

2.3.1 樣本信息質(zhì)控 樣本庫信息管理系統(tǒng)設(shè)置權(quán)限分配，確保信息安全和捐贈(zèng)者的隱私保護(hù)。為提高樣本信息的真實(shí)性、完整性、實(shí)時(shí)性，工作人員對(duì)新進(jìn)樣本執(zhí)行季度性信息核查：由系統(tǒng)隨機(jī)選取新進(jìn)樣本的 5%，核對(duì)樣本的標(biāo)簽信息、存儲(chǔ)位置等是否與信息系統(tǒng)中的記錄相一致；核查樣本相關(guān)的處理信息、臨床信息、隨訪信息等是否齊全。

圖 1 生物樣本庫操作流程

圖 2 2018年8月– 2019年4月樣本庫收樣情況（*表示該時(shí)期內(nèi)，腎內(nèi)科轉(zhuǎn)入生物樣本庫 876 例病人共計(jì) 4940 例血液樣本）

2.3.2 樣本質(zhì)量檢測 指從病理狀態(tài)、分子水平和其他特定指標(biāo)等對(duì)樣本進(jìn)行評(píng)價(jià)。組織或血液樣本最好的質(zhì)控指標(biāo)是檢測 DNA、RNA 和蛋白的質(zhì)量[7]。

2.3.2.1 血液樣本質(zhì)控 通過從血樣本中提取 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)，檢測其純度和完整性。抗凝血中的白膜層和促凝血中的血凝塊是體細(xì)胞核酸的主要來源。用全自動(dòng)磁珠提取純化系統(tǒng)，提取樣本中的 DNA/RNA，用超微量分光光度計(jì)檢測 DNA/RNA 的濃度，通過260/280判斷核酸的純度，比值在 1.8 ~ 2.2，表明核酸較純。對(duì)提取的 DNA/RNA 進(jìn)行 1% 瓊脂糖凝膠電泳，DNA 電泳出現(xiàn)一個(gè)清晰條帶且分子量較大，提示樣本 DNA 完整性較好；RNA 電泳出現(xiàn)清晰的 28 S 和 18 S 條帶，且 28 S 條帶亮度約是 18 S 的兩倍，提示樣本 RNA 完整性較好[8]。也可用生化分析儀直接讀取樣本的 RIN 值（RNA integrity number，RIN）來評(píng)估 RNA 的完整性[9]。

樣本蛋白質(zhì)質(zhì)量評(píng)估主要從濃度與完整性兩方面考慮。Georgiou 等[10]報(bào)道考馬斯亮藍(lán)法是目前檢測蛋白質(zhì)靈敏度最高的方法。蛋白與染料結(jié)合后，通過讀取樣本在 595 nm 的吸光度表征蛋白質(zhì)濃度，通過聚丙烯酰胺凝膠電泳上條帶數(shù)目、清晰度和條帶分子量，評(píng)估蛋白質(zhì)的完整性。

2.3.2.3 隨機(jī)抽樣質(zhì)控結(jié)果 通過隨機(jī)抽取不同時(shí)期收集的血液樣本，提取總 DNA 進(jìn)行純度和完整性檢測，以評(píng)估此階段樣本的存儲(chǔ)質(zhì)量。用超微量分光光度計(jì)讀取樣本260/280，比值均在 1.8 ~ 2.2（表 1）；對(duì)總 DNA 進(jìn)行 1%瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果如圖 3，各樣本 DNA 電泳條帶清晰，完整性良好。上述結(jié)果表明，我院樣本庫建立的操作流程可靠，能夠?yàn)榛A(chǔ)和臨床科研提供合格樣本。

表 1 樣本庫隨機(jī)樣本的 DNA 純度檢測

圖 3 樣本庫隨機(jī)樣本的 DNA 電泳圖

2.4 樣本數(shù)據(jù)返還

數(shù)據(jù)返還有助于樣本庫管理人員更加全面、有效地掌握存儲(chǔ)樣本的質(zhì)量信息和應(yīng)用價(jià)值。樣本使用者在樣本出庫后一定期限內(nèi)，執(zhí)行樣本數(shù)據(jù)返還，返還的數(shù)據(jù)有：①樣本的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)：包括樣本的深加工產(chǎn)物，如 DNA、RNA、蛋白的濃度、純度、完整性等參數(shù)，以及切片的病理學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)如“腫瘤百分比”等；②樣本的研究數(shù)據(jù)或成果：包括利用樣本進(jìn)行研究得到的研究結(jié)果、可以共享的一些分子標(biāo)記物、發(fā)表的文章、完成或申報(bào)的課題、獲得的專利及研發(fā)的產(chǎn)品等；③樣本返還：樣本出庫使用后，若樣本仍有剩余且樣本質(zhì)量良好，應(yīng)再行入庫附加至庫存樣本，以支持二次利用，提高樣本價(jià)值。

3 討論

3.1 生物樣本庫建設(shè)意義

隨著大數(shù)據(jù)時(shí)代的來臨，建設(shè)開放共享的生物樣本庫，是實(shí)現(xiàn)重大課題的多中心合作研究和區(qū)域生物樣本庫網(wǎng)絡(luò)化融合的必然要求，也是樣本庫發(fā)展的整體趨勢(shì)和理想方向[12]。美國 Anderson 癌癥中心建立的胰腺癌組織庫，下設(shè) 25 個(gè)衛(wèi)星組織庫，形成了完備的生物信息網(wǎng)[13]；國內(nèi)在上海市建立的“臨床與生物樣本信息整合平臺(tái)”對(duì)促進(jìn)上海的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究有巨大的推進(jìn)作用。

粵港澳大灣區(qū)人口基數(shù)龐大，外來人口增長迅速，疾病背景和遺傳資源多樣，同時(shí)擁有嶺南地域特性，為建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)化、開放共享的生物樣本庫奠定了良好基礎(chǔ)。我院地處大灣區(qū)西岸核心城市，毗鄰港澳，依托于大灣區(qū)強(qiáng)大的人口基數(shù)和地理優(yōu)勢(shì)，我院建設(shè)的生物樣本庫，可在較短時(shí)間內(nèi)積累大量樣本，并為特種?。ū茄拾?、食管癌等）、罕見病的醫(yī)學(xué)研究提供樣本儲(chǔ)備。利用本樣本庫資源，2018 年，Pang等[14]在上首次發(fā)現(xiàn)并命名了多器官靜脈-淋巴管畸形綜合征。建設(shè)高水平的生物樣本庫，對(duì)粵港澳大灣區(qū)的生命科學(xué)研究和生物醫(yī)藥發(fā)展，以及提高我院承擔(dān)區(qū)域及國家重大科研項(xiàng)目的能力有著深遠(yuǎn)意義。

3.2 現(xiàn)階段運(yùn)行困難及解決方案

綜合型生物樣本庫的建設(shè)是一個(gè)系統(tǒng)化工程，需要統(tǒng)籌和調(diào)動(dòng)醫(yī)院各個(gè)科室的力量。我院生物樣本庫在建設(shè)初期遇到的困難主要有：①臨床重視度不夠、前瞻性欠佳。部分臨床科室習(xí)慣于隨機(jī)收樣，樣本質(zhì)量參差不齊。我們通過不斷推廣樣本庫的開放共享理念，將醫(yī)院散亂的樣本庫高效整合，統(tǒng)一管理；并建立以科主任為主要負(fù)責(zé)人，包括手術(shù)醫(yī)生、護(hù)士在內(nèi)的樣本收集任務(wù)，鼓勵(lì)各科室建立“課題導(dǎo)向的子樣本庫”，大大提高了臨床科室留樣的積極性。②收樣流程不規(guī)范。在初始收樣階段，由于臨床醫(yī)護(hù)人員不熟悉樣本收集流程，常出現(xiàn)知情同意書的漏簽、樣本運(yùn)送延遲等問題；通過關(guān)聯(lián) HIS 系統(tǒng)，將知情同意書抓取到樣本信息管理系統(tǒng)，并不斷優(yōu)化收樣流程，這些問題得以改善。

3.3 生物樣本庫的機(jī)遇與挑戰(zhàn)

2016 年，我國正式啟動(dòng)精準(zhǔn)醫(yī)療計(jì)劃，旨在籌建人類遺傳資源庫、國家生物信息中心等核心平臺(tái)，生物樣本庫迎來了快速發(fā)展的黃金時(shí)代[15]；2019 年，國務(wù)院出臺(tái)《粵港澳大灣區(qū)發(fā)展規(guī)劃綱要》，全力打造國際一流灣區(qū)。作為大灣區(qū)西岸的核心醫(yī)院，我院同時(shí)也是國際醫(yī)療救援的定點(diǎn)單位和西岸最大的感染病治療專區(qū)。建設(shè)規(guī)范化、高質(zhì)量的生物樣本庫，將打破粵港澳地區(qū)醫(yī)療發(fā)展種種壁壘，匯集香港、澳門以及外籍居民豐富的疾病譜，為廣泛開展不同人種的大規(guī)模組學(xué)研究、前瞻性隊(duì)列研究等提供大數(shù)據(jù)樣本資源。

在快速發(fā)展的同時(shí)，我院樣本庫建設(shè)也面臨著一些挑戰(zhàn)：①可持續(xù)發(fā)展受限。目前樣本庫的建設(shè)資金主要來源于醫(yī)院扶持，投入大、產(chǎn)出少、缺乏資源有償服務(wù)機(jī)制。為解決這一問題，政府需做好頂層設(shè)計(jì)，給予政策和經(jīng)費(fèi)支持；醫(yī)院也應(yīng)與科研機(jī)構(gòu)、高新企業(yè)等積極探索聯(lián)合共建模式，開發(fā)資源平臺(tái)的自我造血功能。②捐贈(zèng)者認(rèn)知度不足。相較于國外，我國民眾對(duì)于生物樣本捐贈(zèng)的總體意愿較低，嚴(yán)重制約生物樣本庫的規(guī)模發(fā)展[16]。基于此，我們應(yīng)加強(qiáng)倫理法規(guī)建設(shè)，并通過媒體宣講、地區(qū)走訪等途徑，普及民眾對(duì)生物樣本使用和臨床研究意義的認(rèn)知。

綜上，本研究初步建立了一個(gè)規(guī)范有效的生物樣本庫。未來，我們希望能拓寬樣本渠道，爭取納入更多珠三角地區(qū)醫(yī)院的疾病樣本而形成更大的樣本資源平臺(tái)；進(jìn)一步完善樣本的信息化管理系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)信息數(shù)據(jù)的高效錄入、安全存儲(chǔ)、互惠共享等；爭取將我院樣本庫建設(shè)成為一流的生物樣本資源與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)高地，并助力粵港澳大灣區(qū)精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)研究和醫(yī)療健康發(fā)展。

[1] Liu A, Pollard K. Biobanking for personalized medicine. Adv Exp Med Biol, 2015, 864:55-68.

[2] Carter A, Betsou F. Quality assurance in cancer biobanking. Biopreserv Biobank, 2011, 9(2):157-163.

[3] Working Group on Standardization of Biobank of Kidney Disease, National Technical Committee on Standardization of Biobank. Technical specification and management for bio-specimen in renal biobank. Chin J Nephrol Dial Transplant, 2017, 26(4):355-359. (in Chinese)

全國生物樣本標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)腎臟病生物樣本標(biāo)準(zhǔn)化工作組. 腎臟疾病生物樣本庫的管理及操作規(guī)范. 腎臟病與透析腎移植雜志, 2017, 26(4):355-359.

[4] Yu YY. Retrospect of 15-year construction and progress of biobank for gastrointestinal cancer in China. Chin J Clin Oncol, 2016, 43(1):6-10. (in Chinese)

于穎彥. 我國胃腸道腫瘤生物樣本庫建設(shè)與發(fā)展15年回顧. 中國腫瘤臨床, 2016, 43(1):6-10.

[5] Furuta K, Allocca CM, Schacter B, et al. Standardization and innovation in paving a path to a better future: an update of activities in ISO/TC276/WG2 biobanks and bioresources. Biopreserv Biobank, 2018, 16(1):23-27.

[6] Shi YC, Wang ZK, Yang YS. Consensus on standardized sample base of digestive tract microecology. Chin J Gastroenterol, 2018, 23(6): 356-362. (in Chinese)

史以超, 王子愷, 楊云生. 消化道微生態(tài)標(biāo)準(zhǔn)化樣本庫共識(shí). 胃腸病學(xué), 2018, 23(6):356-362.

[7] Dou WJ, Zheng CX. Quality control of biobank. J Med Postgrad, 2018, 31(1): 92-97. (in Chinese)

竇為娟, 鄭春霞. 生物樣本庫的質(zhì)量控制. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào), 2018, 31(1):92-97.

[8] Zhang JN, Ji J, Liu BY, et al. Quality control of nucleic acids andprotein of freeze-preserving gastric cancer samples. Chin J Clin Oncol, 2016, 43(1):27-34. (in Chinese)

張佳年, 計(jì)駿, 劉炳亞, 等. 深低溫凍存胃癌樣本的核酸與蛋白質(zhì)質(zhì)量控制研究. 中國腫瘤臨床, 2016, 43(1):27-34.

[9] Brisco MJ, Morley AA. Quantification of RNA integrity and its use for measurement of transcript number. Nucleic Acids Res, 2012, 40(18):e144.

[10] Georgiou CD, Grintzalis K, Zervoudakis G, et al. Mechanism of Coomassie brilliant blue G-250 binding to proteins: a hydrophobic assay for nanogram quantities of proteins.Anal Bioanal Chem, 2008, 391(1):391-403.

[11] Sandusky GE, Teheny KH, Esterman M, et al. Quality control of human tissues-experience from the Indiana University Cancer Center-Lilly Research Labs human tissue bank. Cell Tissue Bank, 2007, 8(4):287-295.

[12] Xu Y, Fan P, Hu X. Key issues and strategies in the construction of biobank. West China Med J, 2018, 33(6):651-654. (in Chinese)

徐艷, 樊萍, 胡迅. 生物樣本庫建設(shè)的關(guān)鍵問題及解決策略. 華西學(xué), 2018, 33(6):651-654.

[13] Hwang RF, Wang H, Lara A, et al. Development of an integrated biospecimen bank and multidisciplinary clinical database for pancreatic cancer. Ann Surg Oncol, 2008, 15(5):1356-1366.

[14] Pang PF, Hu XJ, Zhou B, et al. DDX24 mutations associated with malformations of major vessels to the viscera. Hepatology, 2019, 69(2):803-816.

[15] Zheng PY, Yang JH, Zhao R, et al. Consideration on the construction of biobank in China. Chin Health Resources, 2014, 17(2):87-89, 67. (in Chinese)

鄭培永, 楊佳泓, 趙蓉, 等. 我國生物樣本庫建設(shè)的思考. 中國衛(wèi)生資源, 2014, 17(2):87-89, 67.

[16] Ding WB, Ma Y, Wang Y, et al. Cross-sectional survey of attitudes of patients towards biosample donation. J Shanghai Jiaotong Univ (Med Sci), 2014, 34(10):1497-1502. (in Chinese)

丁文彬, 馬逸, 王曄, 等. 患者對(duì)于生物樣本捐贈(zèng)態(tài)度的橫斷面調(diào)查研究. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2014, 34(10):1497-1502.

519000 珠海，中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院廣東省生物醫(yī)學(xué)影像重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

黃曉芳，Email：huang20180101@outlook.com

2019-08-07

10.3969/j.issn.1673-713X.2019.06.017