朱加銀，俞科廷

（溫州醫(yī)科大學(xué) 實(shí)驗動物中心，浙江 溫州 325035）

隨著國家經(jīng)濟(jì)社會的全面發(fā)展以及人民生活水平的提高，人們對生命健康越來越重視。近年來，我國對生命科學(xué)的科研投入日益增長，生命科學(xué)基礎(chǔ)研究取得了長足的進(jìn)步。實(shí)驗動物是生命科學(xué)研究的基礎(chǔ)和重要支撐條件，被稱為“活的試劑”[1-2]。 為了更好地進(jìn)行生命科學(xué)研究，大多數(shù)高校正在大力建設(shè)符合國家標(biāo)準(zhǔn)的動物實(shí)驗室，其中無特定病原體（specific pathogen free，SPF）動物實(shí)驗室是生命與醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)動物實(shí)驗室[3]。 溫州醫(yī)科大學(xué)（以下稱我校）實(shí)驗動物中心根據(jù)醫(yī)學(xué)院校的特點(diǎn)，結(jié)合學(xué)校學(xué)科建設(shè)的發(fā)展和實(shí)驗教學(xué)與科研的需求，相繼建成3 000 m2的SPF級動物實(shí)驗室，有效緩解了我校SPF級動物實(shí)驗室緊張的狀況。但如何在不斷增加的SPF級屏障系統(tǒng)的同時，重視實(shí)驗動物生物安全，落實(shí)屏障系統(tǒng)生物安全管理，防范實(shí)驗動物生物安全事故，是高校實(shí)驗動物中心面臨的重大問題，也是高校發(fā)展過程中亟待解決的突出問題[4-5]。

1 實(shí)驗動物生物安全問題

動物實(shí)驗室是從事實(shí)驗教學(xué)、科學(xué)研究、社會服務(wù)的重要場所。如果發(fā)生屏障系統(tǒng)生物安全事故，那么包括在校學(xué)生在內(nèi)的實(shí)驗人員的身體健康很可能得不到保障，甚至可能使校外人群受到感染，從而引發(fā)公眾恐慌情緒[6-9]。2010年12月，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名師生在進(jìn)行活體羊解剖實(shí)驗過程中感染了布魯氏菌病[10]。2017年5月，杭州市某小區(qū)沿街商鋪飼養(yǎng)實(shí)驗小白鼠，引起了居民恐慌。實(shí)驗動物的生物安全問題已成為大眾的敏感話題，是科學(xué)研究中不容忽視的重要因素，它與動物疫病防治、人類健康、生物武器之間的微妙關(guān)系正在引起政府的高度重視[11-15]。

2 高校SPF級動物實(shí)驗室生物安全管理舉措

我校實(shí)驗動物中心于2005年1月建成1 500 m2SPF級動物實(shí)驗室，9月投入使用至今，在實(shí)驗動物生物安全管理方面積累了一定的經(jīng)驗，提出了“三面三證，以證促管”的管理理念，即主要是從實(shí)驗室、實(shí)驗動物、人員三個方面以及相應(yīng)的三類許可證對SPF級動物實(shí)驗室生物安全進(jìn)行管理。

2.1 動物實(shí)驗室管理

2.1.1 SPF級動物實(shí)驗室行政許可：根據(jù)《實(shí)驗動物管理條例》（中華人民共和國國家科學(xué)技術(shù)委員會令第2號）與《浙江省實(shí)驗動物管理辦法》（浙江省人民政府令第263號）規(guī)定，實(shí)驗動物生產(chǎn)與使用單位應(yīng)取得許可證。陳怡等[16]的研究表明，實(shí)驗動物許可證相對集中在經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)并以企業(yè)類型機(jī)構(gòu)為主。目前，浙江省有效期內(nèi)的實(shí)驗動物許可證共有102個，其中使用許可證82個，生產(chǎn)許可證20個。由于浙江省同一機(jī)構(gòu)的所有環(huán)境設(shè)施僅頒發(fā)一個許可證，全省實(shí)驗動物環(huán)境設(shè)施共有114個，其中使用型SPF級屏障系統(tǒng)設(shè)施占53.5%（61/114）。我校實(shí)驗動物中心SPF級屏障系統(tǒng)于2005年5月取得浙江省科技廳頒發(fā)的實(shí)驗動物使用許可證（屏障系統(tǒng)），許可證號：SYXK（浙）2005-0061；并先后于2010年10 月?lián)Q領(lǐng)實(shí)驗動物使用許可證，許可證號：SYXK（浙）2010-0150；于2015年7月?lián)Q領(lǐng)實(shí)驗動物使用許可證，許可證號：SYXK（浙）2015-0009。同時，中心SPF級動物實(shí)驗室每年通過浙江省實(shí)驗動物管理辦公室的行政許可證年檢工作，有效保障了我校實(shí)驗動物中心SPF級動物實(shí)驗室的生物安全。

2.1.2 SPF級動物實(shí)驗室規(guī)章制度及標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（standard operational procedure，SOP）：SPF級動物實(shí)驗室規(guī)章制度及SOP對于動物實(shí)驗室管理具有指導(dǎo)性意義，我校實(shí)驗動物中心從SPF級動物實(shí)驗室管理制度、SPF級動物實(shí)驗室機(jī)房控制系統(tǒng)操作程序、SPF級動物室人員及物品進(jìn)出程序、SPF級獨(dú)立通風(fēng)籠具（individually ventilate cages，IVC）操作原則和程序、SPF級動物實(shí)驗室的清掃與衛(wèi)生管理程序、SPF級實(shí)驗室日常管理記錄程序等6個方面對動物實(shí)驗室進(jìn)行規(guī)范操作管理，確保實(shí)驗動物生物安全。胡慧穎等[17]的調(diào)查表明，浙江省實(shí)驗動物許可證單位SOP比較健全，但仍有8.2%的單位沒有制定突發(fā)事件應(yīng)急預(yù)案。動物實(shí)驗室存在一定的生物安全隱患，人感染流行性出血熱等人畜共患病生物安全事件時有發(fā)生，建立包括實(shí)驗動物應(yīng)急預(yù)案在內(nèi)的SOP顯得尤為緊迫與重要。

2.1.3 SPF級動物實(shí)驗室日常維護(hù)：實(shí)驗動物生物安全來源于實(shí)驗動物生產(chǎn)與使用過程中的各個環(huán)節(jié)，醫(yī)學(xué)院校涉及實(shí)驗動物教學(xué)與科研，教學(xué)對象大多是本科生，往往對實(shí)驗動物生物安全防范意識不夠[18]。為了保證實(shí)驗動物質(zhì)量以及動物實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，SPF級屏障系統(tǒng)需要按照國標(biāo)要求，及時輸送外界空氣，排除氨氣等有害氣體，調(diào)節(jié)溫濕度控制，病原微生物。同時，需要對房間內(nèi)各部位的空氣壓力進(jìn)行控制，以避免交叉感染。因此，實(shí)驗動物中心需要定期對中央空調(diào)、高溫高壓滅菌器、自控系統(tǒng)、屏障通風(fēng)系統(tǒng)等做好日常維護(hù)檢修工作，確保SPF級動物實(shí)驗室正常運(yùn)轉(zhuǎn)，消除實(shí)驗動物生物安全隱患。

2.2 實(shí)驗動物管理

2.2.1 SPF級實(shí)驗動物質(zhì)量控制：實(shí)驗動物的質(zhì)量控制直接影響醫(yī)學(xué)院校教學(xué)與科研質(zhì)量。陳柏安 等[19]提出從實(shí)驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)的質(zhì)量控制、遺傳學(xué)質(zhì)量控制、環(huán)境質(zhì)量控制、營養(yǎng)質(zhì)量控制等4個因素入手加強(qiáng)實(shí)驗動物質(zhì)量控制。我校實(shí)驗動物中心為了加強(qiáng)實(shí)驗動物質(zhì)量控制，確保動物實(shí)驗的準(zhǔn)確性，規(guī)定所有購買的實(shí)驗動物及飼料必須提供質(zhì)量合格證。中心對所有新引進(jìn)的基因修飾動物均進(jìn)行隔離檢疫，放置哨兵鼠送第三方檢測合格后才能傳入SPF級動物實(shí)驗室。同時，中心開展自身檢測工作，對SPF級實(shí)驗動物進(jìn)行質(zhì)量檢測，均符合國家標(biāo)準(zhǔn)。中心通過實(shí)驗動物質(zhì)量控制，從源頭上避免實(shí)驗動物生物安全事故。

2.2.2 實(shí)驗動物倫理審查：實(shí)驗動物為生命科學(xué)發(fā)展作出重大犧牲，善待實(shí)驗動物是人類文明的道德體現(xiàn)，也是人與自然和諧發(fā)展的需要[20]。為了進(jìn)一步加強(qiáng)我校實(shí)驗動物生物安全與動物實(shí)驗規(guī)范管理工作，保障師生員工身體健康和校園環(huán)境安全，實(shí)驗動物中心要求所有涉及實(shí)驗動物的實(shí)驗，必須向?qū)W校實(shí)驗動物倫理委員會提出申請，提交實(shí)驗動物倫理審查表，經(jīng)審批許可后，給予批準(zhǔn)編號，方可進(jìn)行實(shí)驗。動物實(shí)驗要遵循“減少（reduction）、替代（refinement）、優(yōu)化（replacement）”的3R原則，優(yōu)化實(shí)驗方案，根據(jù)實(shí)驗需要合理使用動物。動物實(shí)驗結(jié)束后必須麻醉，采用安樂死處死，尸體統(tǒng)一打包回收，焚燒處理，任何單位和個人不得隨意丟棄實(shí)驗結(jié)束后或正常死亡的動物尸體，動物尸體處理應(yīng)能夠追溯。有文獻(xiàn)報道浙江省有4.9%的單位實(shí)驗動物尸體及廢棄物處理不規(guī)范[17]。我校實(shí)驗動物中心通過動物實(shí)驗相關(guān)的倫理審查，避免動物實(shí)驗過程中出現(xiàn)實(shí)驗動物生物安全事件。

2.3 人員管理

2.3.1 SPF級動物實(shí)驗室從業(yè)人員管理：SPF級動物實(shí)驗室從業(yè)人員是指從事SPF級動物實(shí)驗室相關(guān)工作的各類工作人員。宋志剛等[21]認(rèn)為人們普遍關(guān)注動物實(shí)驗的結(jié)果，缺乏對實(shí)驗動物從業(yè)人員的健康與安全的研究，因此應(yīng)對實(shí)驗動物從業(yè)人員進(jìn)行生物安全培訓(xùn)。實(shí)驗動物中心高度重視人才培養(yǎng)，制定了人才隊伍建設(shè)的規(guī)劃，所有SPF級動物實(shí)驗室從業(yè)人員均參加浙江省實(shí)驗動物行業(yè)協(xié)會主辦的全省實(shí)驗動物技術(shù)人員培訓(xùn)班，全部取得“實(shí)驗動物從業(yè)人員培訓(xùn)合格證”，并定期參加全省實(shí)驗動物從業(yè)人員繼續(xù)教育培訓(xùn)班。同時積極參加各類實(shí)驗動物學(xué)術(shù)交流會，及時獲取實(shí)驗動物生物安全最新動態(tài)，促進(jìn)我校SPF級動物實(shí)驗室實(shí)驗動物生物安全工作的有效開展。

2.3.2 SPF級動物實(shí)驗室實(shí)驗人員管理：醫(yī)學(xué)院校SPF級動物實(shí)驗室實(shí)驗人員不僅有醫(yī)學(xué)專業(yè)教師，而且包括各類本科生、研究生。但是部分實(shí)驗動物操作人員的生物專業(yè)知識缺乏。彭華松等[22]的調(diào)查分析表明，至少20%的師生不具備基本的生物安全知識，因而需要對實(shí)驗人員進(jìn)行全面系統(tǒng)的生物安全教育與培訓(xùn)。我校實(shí)驗動物中心是浙江省衛(wèi)生與計劃生育委員會醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物與動物實(shí)驗培訓(xùn)基地的五個基地之一，省城杭州之外的唯一的培訓(xùn)基地，定期舉辦實(shí)驗動物培訓(xùn)班。實(shí)驗人員要進(jìn)入中心的SPF級動物實(shí)驗室，必須持有培訓(xùn)合格證。實(shí)驗人員通過培訓(xùn)，能夠認(rèn)識到動物實(shí)驗規(guī)范操作的重要性，最大可能降低SPF級屏障系統(tǒng)生物安全狀況的概率。

3 討論

SPF級屏障系統(tǒng)實(shí)驗動物生物安全不僅關(guān)乎實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性、實(shí)驗人員的健康，也是國家安全的基本內(nèi)容。為此，我校實(shí)驗動物中心制定了《實(shí)驗動物突發(fā)事件應(yīng)急預(yù)案》，本著以積極預(yù)防為主要目標(biāo)，時刻保持高度警惕的態(tài)度，成立實(shí)驗動物中心突發(fā)生物安全事故應(yīng)急小組，負(fù)責(zé)應(yīng)急預(yù)案的啟動和實(shí)施，以應(yīng)對實(shí)驗動物生物安全問題。SPF級動物實(shí)驗室是一個動態(tài)的多功能系統(tǒng)，特別是具有公共服務(wù)平臺性質(zhì)的醫(yī)學(xué)院校SPF級屏障系統(tǒng)動物實(shí)驗室，涉及實(shí)驗動物的日常飼養(yǎng)與實(shí)驗人員由于實(shí)驗需要的正常進(jìn)出，由此可能產(chǎn)生的多方面的實(shí)驗動物生物安全隱患，這對于SPF級動物實(shí)驗室的生物安全管理提出新的更高要求。嚴(yán)格準(zhǔn)入制度，規(guī)范實(shí)驗要求，加強(qiáng)教育培訓(xùn)，確保生物安全，是我校實(shí)驗動物中心SPF級動物實(shí)驗室生物安全管理的一貫準(zhǔn)則[23]。陳通克等[24]提出醫(yī)學(xué)院?！?+1”實(shí)驗動物管理模式，即“旅館式”管理模式和“實(shí)驗動物分類控制”管理模式及一站式服務(wù)有機(jī)結(jié)合，提高實(shí)驗動物管理水平，充分發(fā)揮實(shí)驗動物中心在醫(yī)學(xué)院校教學(xué)科研中的公共服務(wù)職能。

實(shí)驗動物的生物安全問題，日益引起各級政府部門的高度重視。時而發(fā)生的動物實(shí)驗感染事件不斷地給我們上了一堂堂嚴(yán)肅的實(shí)驗動物生物安全公開課，必須引起足夠的重視。徐慶華等[25]通過篩選11項綜合評價指標(biāo)，運(yùn)用層次分析法確定實(shí)驗動物生物安全管理評價指標(biāo)體系中各指標(biāo)的權(quán)重系數(shù)，發(fā)現(xiàn)環(huán)境設(shè)施檢測符合要求和實(shí)驗動物有質(zhì)量合格證所占權(quán)重系數(shù)最大。然而，如何運(yùn)用科學(xué)客觀有效的評價方法，建立合理的綜合評價實(shí)驗動物生物安全管理體系，仍然有待進(jìn)一步研究。

總之，我校實(shí)驗動物中心在SPF級動物實(shí)驗室生物安全管理過程中，明確提出“三面三證，以證促管”，即：動物實(shí)驗室必須獲得實(shí)驗動物使用許可證，實(shí)驗動物必須提供質(zhì)量合格證，實(shí)驗人員必須具備動物實(shí)驗培訓(xùn)合格證，通過這三個方面三個證入手，提升我校SPF級動物實(shí)驗室生物安全管理水平，但是實(shí)驗動物生物安全管理永遠(yuǎn)在路上，永不松懈，任重而道遠(yuǎn)。