劉自逵

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,湖南 長沙 410128；湖南加農(nóng)正和生物技術(shù)有限公司，湖南 瀏陽 410329；湖南省企業(yè)技術(shù)中心，湖南長沙 410128；北京精免大觀生物科技研究院有限公司,北京 100096）

非洲豬瘟在我國已發(fā)生一周年，到目前為止，市面上還沒有可靠的疫苗研發(fā)成功、其商品化的路還比較長，同樣沒有也不可能有特效藥的推出，唯有生物安全?！鞍倜芤皇琛保瑖婪浪朗貙⒅畵踉谪i場門外，其可能性與可靠性大受詬病。母豬顯著減少、肥豬成活率比較低、豬價也達到歷史以來的最高位，還有可能繼續(xù)漲下去，已經(jīng)嚴重影響到我們的日常生活。盡管如此，養(yǎng)豬人復(fù)養(yǎng)復(fù)產(chǎn)的積極性不高、很多敢投入的人又被牢牢套死，舉步維艱。疫苗研發(fā)遙遙有期、唯恐希望越大失望越大。中草藥是我國的瑰寶，借助非典防控的成功經(jīng)驗、經(jīng)過積極摸索、不斷探索、反復(fù)應(yīng)用，說不定也能在非瘟防控上占據(jù)“半壁江山”。

1 非洲豬瘟疫苗的研發(fā)取得了突破，但離臨床應(yīng)用還有一段距離

當(dāng)前依據(jù)P72 基因，將ASFV劃分為了24 個基因型，基于被感染的巨噬細胞表面的膜蛋白CD2v 具有吸附紅細胞的特性，又將ASFV鑒定出了8 個血清群，在我國流行的是格魯吉亞基因Ⅱ型，首次分離出來了我國哈獸研分離并鑒定了毒株P(guān)ig/CN/HLJ/2018、我國軍事科學(xué)院分離并鑒定了毒株SY18，對研究疫苗創(chuàng)造了非常有利的條件?？v觀非洲豬瘟疫苗的研究進展，目前在研的主要有減毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗和重組腺病毒四類共11 種疫苗，其中以減毒活疫苗為主導(dǎo)，如我國哈獸研（毒株P(guān)ig/CN/HLJ/2018，基因Ⅱ型）構(gòu)建的多基因家族MGF360-505R 缺失、吸附紅細胞特性膜蛋白CD2v與多基因家族MGF360-505R 聯(lián)合缺失的減毒活疫苗；我國軍事科學(xué)院（毒株SY18，基因Ⅱ型）構(gòu)建的CD2v 和MGF 基因缺失減毒活疫苗。ASFV 的結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜為雙囊膜雙股線狀DNA，基因組非常龐大170 ～190 kb（我國183 kb），基因組編碼151 ～167 種蛋白質(zhì)，弄清楚大約有三分之一。至今沒有觀察到ASFV 直接穿透細胞膜的證據(jù)，其主要靶目標(biāo)是單核-巨噬細胞系統(tǒng)，需要直接接觸巨噬細胞(M?)并觸發(fā)其內(nèi)呑作用才能入侵和感染病豬。ASFV 的免疫逃避機制特別多，這也是疫苗很難研究出來的主因，主要通過4 種方式：①調(diào)控宿主細胞蛋白表達系統(tǒng)及細胞因子的轉(zhuǎn)錄，如DP71L 和A238L 等；②抑制Ⅰ型干擾素信號通路，如多基因家族蛋白MGF360、MGF505/530和I329L 等；③調(diào)控細胞程序性死亡（凋亡），包括p54、A179L、A224L 和EP153R 等；④其他免疫抑制蛋白，如CD2v、L83L 等抑制細胞凋亡、宿主免疫應(yīng)答等策略，來逃逸宿主免疫防御系統(tǒng)的追蹤。并且疫苗開發(fā)還面臨其他許多難題，盡管基因缺失疫苗很有效、保護率比較高，但存在諸如排毒或散毒的安全隱患。有沒有其他毒力基因需要鑒定或敲除？會不會成為ASFV 野毒（如偽狂犬病基因缺失苗大量應(yīng)用以后，豬場野毒感染非常嚴重）或基因重組（如豬藍耳病疫苗度以及疫苗與野毒重組的病毒）的溫床？能否構(gòu)建穩(wěn)定的病毒表達細胞系（目前主要為SPF 豬的原代肺泡巨噬細胞系）用于疫苗的批量生產(chǎn)？即使能找到傳代細胞系后病毒是否會變異？等等問題，一一需要突破與解決。形成商品化疫苗還有漫長的注冊申報工作需要完成，因此，ASFV 疫苗離商品化、商業(yè)化還有相當(dāng)長一條路要走。

2 中藥將成為防控非洲豬瘟的有力軍

疫病的發(fā)生發(fā)展超出了我們所有人的想象，給我們的養(yǎng)豬業(yè)造成重創(chuàng)和巨大的經(jīng)濟損失，疫病暴發(fā)只有一年，卻相當(dāng)于走過了國外的一百年，國外一百年的損失還沒有我們一年的損失大。主要是因為我們的體量，我國養(yǎng)豬總量占全世界的一半以上，各種規(guī)?；⒓s化豬場和養(yǎng)豬小區(qū)比較多，只要一個豬場發(fā)生非洲豬瘟，其他豬場無一幸免。非洲豬瘟之殤教訓(xùn)太深刻，我們要深刻反思，中國養(yǎng)豬該何去何從？非洲豬瘟的防控不能因為疫苗的遲遲出現(xiàn)也停滯不前，中草藥將成為非洲豬瘟防控的主力軍。

2.1 從中草藥對非典防控效果來看，中草藥防控非洲豬瘟也是有效的

2003 年初，廣東及全國受非典侵襲，兩位中醫(yī)泰斗級人物89 歲高齡的“嶺南溫病泰斗”、“最老的抗非典功臣”劉仕昌教授（廣州中醫(yī)藥大學(xué)終身教授）最早提出中醫(yī)藥防治非典方案、87 歲高齡的鄧鐵濤教授（國家中醫(yī)藥管理局抗“非典”專家組組長）上書中央將中醫(yī)藥納入抗非主戰(zhàn)場，推動全國運用中醫(yī)理論治療非典。鄧教授認為對非典的防控，中醫(yī)自有其優(yōu)勢。他將其歸屬于中醫(yī)春溫病伏濕之證，病機以濕熱蘊毒，阻遏中上二焦，并易耗氣挾瘀，甚則內(nèi)閉喘脫為特點。據(jù)WHO 的統(tǒng)計：當(dāng)時全球共有32 個國家和地區(qū)報告了8 400 多例SARS 患者，其中中國（包括香港和臺灣）有7 700 多例。全球死亡率為11%、中國香港為17%、中國臺灣為27%、中國大陸為7%，而廣東SARS 死亡率為3.8%，其中廣州僅為3.6%，全球最低。中藥抗非典發(fā)揮了決定性作用。非典是人的惡性傳染病，西醫(yī)防控死亡率高，通過中藥調(diào)理，尚且能大大降低人的死亡率，其控制結(jié)果達到了國際領(lǐng)先水平。非洲豬瘟是家豬和野豬的一種高度致死性疫病，沒有藥物、沒有疫苗防控，疫苗研究近100 年了還沒有研究出來，不能等死，可從中藥防控非典的成功經(jīng)驗得到啟發(fā)，完全可以通過中藥來防控非洲豬瘟。

2.2 從非洲豬瘟的中醫(yī)辨證來進行中藥組方研究與應(yīng)用

豬的汗腺極少，不能通過排汗來瀉熱，內(nèi)熱不出，往往熱病多見；蹄叉間分布有少量汗腺，內(nèi)熱喜踏寒濕，往往足下生寒。由于腠理致密，外風(fēng)難侵，內(nèi)熱散發(fā)困難或內(nèi)熱不透，血熱、熱毒、津虧與高燒頻發(fā)，氣血力弱，內(nèi)風(fēng)可見；皮密膚厚，皮下脂肪厚，怕熱怕燥而不懼外寒，但內(nèi)熱內(nèi)燥，貪涼、貪飲、貪濕，內(nèi)寒證多發(fā)，脾胃虧虛肝陰不足證，即后天不足（喜甜食、貪吃皆為補脾胃），脾不運濕，濕濁內(nèi)停、內(nèi)生，精微不化、氣血不生，百病之源；妊娠母豬圍產(chǎn)期燥熱子煩，多蓄寒于內(nèi)，胎兒爭搶氣血、氣血不足；母病及仔，加之仔（乳）豬胃腸弱，仔豬消化道病頻發(fā)等。中藥調(diào)本以固本（調(diào)脾胃固肝腎，但純補易滯）；移火以養(yǎng)陰（火旺必有火虧處，不宜輕瀉火）；瀉火以瀉寒（寒傷心，心弱脾虛）；補母以救仔（母病及仔，仔病累母）；活血行血以養(yǎng)血，疏通氣機以補氣。通過對非洲豬瘟的中醫(yī)辨證來進行中藥組方研發(fā)—康之源。

2.3 從非洲豬瘟的現(xiàn)代研究成果來強化中藥組方的功能設(shè)計

從非洲豬瘟的疫苗研究來看，減毒疫苗或稱為基因缺失疫苗不失為一種有效的非洲豬瘟防控方法，哈獸研與軍事醫(yī)學(xué)研究院的研究成果看，敲除的毒力基因主要是MGF與CD2v 兩類，前者的主要作用是抑制干擾素的分泌，而后者的主要作用是抑制血管中紅細胞的聚集，與抑制血栓的形成有關(guān)。從非洲豬瘟發(fā)病機理來看，ASFV 通過消化道與呼吸道、誘導(dǎo)TNF-α、IL-1 等炎癥趨化因子的過分表達來激活單核-巨噬細胞系統(tǒng)、觸發(fā)巨噬細胞內(nèi)吞作用、在扁桃體、全身淋巴結(jié)與脾臟等臟器進行大量復(fù)制與產(chǎn)生大量非中和抗體，通過大量的免疫逃避機制如抑制干擾素與防御素產(chǎn)生、基因變異與重組、抑制被感染細胞的凋亡逃避免疫系統(tǒng)的追蹤，迅速引發(fā)大量白細胞與淋巴細胞的凋亡而造成免疫系統(tǒng)的崩潰，引發(fā)機體的急性感染、持續(xù)性的病毒血癥等。從非洲豬瘟的致死機理來看，造成非洲豬瘟死亡的主要原因是Ⅲ型超敏反應(yīng)引發(fā)的可溶性抗原抗體復(fù)合物堆積血管引發(fā)廣泛性血管內(nèi)皮細胞損傷、多種器官組織的微血管內(nèi)凝血與破裂，病毒性心肌炎與栓塞性大葉性肺炎引發(fā)的機體各組織器官嚴重缺氧，以及高血壓引起巨脾癥、凝血過量消耗血小板、造成外周大出血等出血性休克，病豬迅速發(fā)病與死亡。中藥除了從清熱解毒、養(yǎng)胃健脾、除濕化痰、補氣養(yǎng)血、活血化瘀、固本培元、扶正祛邪、平衡陰陽等方面組方以外，還要借助現(xiàn)代中藥工藝技術(shù)等強化對炎癥趨化因子的抑制消除心肺炎癥與血管炎癥、強化免疫雙向調(diào)節(jié)作用抑制超敏反應(yīng)、強化干擾素與β-防御素的產(chǎn)生，提高機體的抗囊膜病毒的作用、強化活血化瘀作用防止紅細胞聚集與加強血栓溶解等方面、消除氧自由基與抗應(yīng)激作用防止敗血癥發(fā)生。

總之，非洲豬瘟已發(fā)生一年，盡管沒有疫苗，但通過“八仙過海各顯神通”的防控技術(shù)，已見成效，特別是在清熱解毒、調(diào)節(jié)免疫、抗病毒、提高疫苗效價和抗應(yīng)激等方面，中草藥明顯具有優(yōu)勢，必將對非洲豬瘟防控產(chǎn)生深遠影響。今后，即使非洲豬瘟疫苗研發(fā)成功并得到廣泛應(yīng)用，還是離不開中草藥?？抵淳褪抢霉诺渲兴幊煞健⒔?jīng)過定向生物發(fā)酵技術(shù)與結(jié)構(gòu)修飾技術(shù)研發(fā)而成的中草藥復(fù)方制劑，必將成為非洲豬瘟防控的主力軍。