史方堃

【摘 要】目的：研究microRNA表達(dá)與缺血性腦卒中所致抑郁相關(guān)性。方法：隨機(jī)選擇2018年1月到2019年1月至我院進(jìn)行腦梗死治療的80例患者進(jìn)行臨床研究。所有患者均在發(fā)病后30d給予抑郁自評(píng)量表（SDS）評(píng)價(jià)以及MiR-146a、MiR-34a檢測(cè)?；颊甙l(fā)病30d后給予抑郁自評(píng)量表（SDS）評(píng)價(jià)，按照評(píng)分<53分和≥53分分為正常組和抑郁組，比較兩組患者表達(dá)水平差異。使用Spearman等級(jí)相關(guān)分析觀察MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平與SDS評(píng)分的相關(guān)性。結(jié)果：正常組患者M(jìn)iR-146a、MiR-34a表達(dá)水平均高于抑郁組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），使用Spearman等級(jí)相關(guān)分析觀察MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平與SDS評(píng)分的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平與SDS評(píng)分具有負(fù)相關(guān)（p<0.05），其中MiR-34a的相關(guān)度最高（r=-0.842，p=0.027）。結(jié)論：MiR-146a、MiR-34a水平表達(dá)與缺血性腦卒中所致抑郁成負(fù)相關(guān)，因此上述指標(biāo)可以成為對(duì)缺血性腦卒中后是否會(huì)發(fā)生抑郁的預(yù)測(cè)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】microRNA;缺血性腦卒中;抑郁

卒中后抑郁是腦卒中后最常見的并發(fā)癥之一，患者以情緒低落、興趣缺失、認(rèn)知功能障礙為主要臨床特征[1]，MiRs是小分子非編碼RNA，通過轉(zhuǎn)錄后的水平對(duì)基因進(jìn)行調(diào)控，進(jìn)而參與細(xì)胞的生長、分化、凋亡等過程，被認(rèn)為在神經(jīng)元和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子生成等方面扮演重要的作用[2]。MiR-146a、MiR-34a是MiRs中的重要成員，為觀察其表達(dá)與缺血性腦卒中所致抑郁的相關(guān)性，我院進(jìn)行了本次研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 患者選擇

隨機(jī)選擇2018年1月到2019年1月至我院進(jìn)行腦梗死治療的80例患者進(jìn)行臨床研究。所有患者均符合全國第4屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)頭CT和頸部超聲確定診斷。其中男性患者47例，女性患者33例，年齡58-79歲，平均年齡（64.33±5.14）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：

（1）確診為缺血性腦卒中。

（2）患者發(fā)病30d后神志清楚，無交流障礙。

（3）既往無腦卒中病史。

（4）患者或者患者家屬對(duì)本次研究知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：

（1）合并其他大腦疾病的患者。

（2）既往有腦出血或者腦梗死病史的患者。

（3）既往有Alzheimer病等認(rèn)知功能障礙疾病的患者。

（4）既往有抑郁、狂躁等精神系統(tǒng)疾病的患者。

（5）不同意參與本次研究的患者。

1.2 方法

1.2.1 研究方法

所有患者均在發(fā)病后30d給予抑郁自評(píng)量表（SDS）評(píng)價(jià)以及MiR-146a、MiR-34a檢測(cè)。

抑郁自評(píng)量表（SDS）：該量表共計(jì)20分，4級(jí)評(píng)分，得分越高，抑郁程度越嚴(yán)重。原始分乘以1.25后取整數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)分。在53分以下為無抑郁，53-62分為輕度抑郁，63-72分為中度抑郁，73分以上為重度抑郁。

MiR-146a、MiR-34a檢測(cè)：取患者晨起空腹肘正中靜脈血2ml，EDTA-K2抗凝管在4℃條件下保存。在樣本采集后6h內(nèi)使用RNAiso Blood提取總RNA，分別使用超微量分光光度計(jì)和瓊脂糖凝膠電泳對(duì)RNA的純度和完整性進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試結(jié)果合格后，在-80℃條件下保存。使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒對(duì)基因組DNA消化，并完成逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)對(duì)得到的cDNA進(jìn)行定量檢測(cè)，內(nèi)參為U6，最終得到25μg的反應(yīng)體系，反應(yīng)條件：預(yù)變性經(jīng)歷1個(gè)循環(huán)，95℃、30s;PCR反應(yīng)：40循環(huán)、95℃、30s、60℃、34s。反應(yīng)結(jié)束后通過循環(huán)閾值計(jì)算表達(dá)量。每個(gè)樣本重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)，取平均值為最終結(jié)果。

1.2.2 分析指標(biāo)

患者發(fā)病30d后給予抑郁自評(píng)量表（SDS）評(píng)價(jià)，按照評(píng)分<53分和≥53分分為正常組和抑郁組，比較兩組患者表達(dá)水平差異。使用Spearman等級(jí)相關(guān)分析觀察MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平與SDS評(píng)分的相關(guān)性。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理軟件處理研究中所有相關(guān)數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，并采用 t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用（n，%）表示，采用X2檢驗(yàn)，以 p<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者基線資料比較

兩組患者性別、年齡、梗死面積、基礎(chǔ)疾病以及NIHSS評(píng)分均無統(tǒng)計(jì)學(xué)異（p>0.05），詳見表1。

2.2 兩組患者M(jìn)iR-146a、MiR-34a表達(dá)水平比較

正常組患者M(jìn)iR-146a、MiR-34a表達(dá)水平均高于抑郁組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），詳見表2。

2.3 MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平與SDS評(píng)分的相關(guān)性比較

MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平與SDS評(píng)分具有負(fù)相關(guān)（p<0.05），其中MiR-34a的相關(guān)度最高（r=-0.842，p=0.027），詳見表3。

3 討論

腦卒中所致抑郁的發(fā)病率在腦卒中發(fā)病后30d內(nèi)達(dá)到17-52%。缺血性腦卒中在全部腦卒中的發(fā)病率占60-80%，這部分患者的卒中后抑郁發(fā)病率更高，嚴(yán)重的影響了患者的身體和心理健康，同時(shí)也不利于疾病的恢復(fù)[3]。

MiRS被認(rèn)識(shí)為與抑郁癥發(fā)生具有相關(guān)性的RNA，其異常表達(dá)會(huì)引起相應(yīng)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)發(fā)生紊亂，從而引起疾病的發(fā)生[4]。因?yàn)镸iRS在血清中含量較高，且表達(dá)穩(wěn)定，因此隨著研究的深入，部分成員已經(jīng)成為疾病的診斷標(biāo)志。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，MiR-146a可以作為亞洲人口的中風(fēng)預(yù)后的診斷標(biāo)志物，而MiR-34a能夠作為預(yù)測(cè)缺血性腦卒中的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。但是在實(shí)際研究中，MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平在阿爾茲海默患者中也會(huì)出現(xiàn)異常改變，考慮上述RNA與大腦的中樞神經(jīng)病變相關(guān)。在本次研究中，正常組患者M(jìn)iR-146a、MiR-34a表達(dá)水平均高于抑郁組，說明發(fā)生抑郁的患者，MiR-146a、MiR-34a表達(dá)水平出現(xiàn)降低，且其水平與SDS評(píng)分負(fù)相關(guān)，這可能與MiR-146a所調(diào)節(jié)的通路具有緩解炎癥的作用，MiR-34a所具有的調(diào)節(jié)細(xì)胞質(zhì)代謝的功能相關(guān)。

綜上所述，MiR-146a、MiR-34a水平表達(dá)與缺血性腦卒中所致抑郁成負(fù)相關(guān)，因此上述指標(biāo)可以成為對(duì)缺血性腦卒中后是否會(huì)發(fā)生抑郁的預(yù)測(cè)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]吳江，賈建平，等.神經(jīng)病學(xué)（第2版）[M].人民衛(wèi)生出版社，2010：150-153.

[2]TaylorWD，AizensteinHJ，AlexopoulosGS.The vasculardepression hypothesis： mechanisms linki ng vascular disease with depression[J].Mol Psychiatry，2013， 18：963-974.

[3]楊瓊，楊侃，李安瑩，等.MicroRNA-21 在缺血再灌注損傷早期大鼠心肌的表達(dá)及抗細(xì)胞凋亡作用[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，38（5）.

[4]姚珊，沈霞，岳炫燁.SLC6A4基因rs2020939多態(tài)性與卒中后抑郁相關(guān)性的研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，34：689.