劉長秀 李靜 趙辰娜

人類是梅毒螺旋體（TP）的唯一宿主，梅毒螺旋體可通過性傳播、母嬰傳播、血液傳播。人體感染梅毒螺旋體可造成多系統(tǒng)多臟器損害，對健康造成巨大危害。臨床上選擇敏感性高、特異性強的檢測方法對及時診斷和治療梅毒具有很重要的意義［1］。當(dāng)前，有多種實驗室的方法可用于梅毒的診斷，血清學(xué)方法依然是梅毒螺旋體診斷的主要方法，常見的血清學(xué)檢測方法包括非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（TRUST、RPR）和梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（CMIA、TPPA、ELISA和RT）［2］。如果非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗和梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗同時為陽性時，可以診斷為現(xiàn)癥梅毒或見于部分晚期梅毒治愈后的病人；如果非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陰性、梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陽性，可出現(xiàn)以下三種情況：①極早期梅毒；②既往感染；③早期梅毒治愈后；如果非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陽性、梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陰性，考慮梅毒血清學(xué)假陽性。在妊娠過程中發(fā)現(xiàn)的梅毒稱妊娠梅毒，此時TP可通過胎盤或臍靜脈傳給胎兒，讓所生嬰兒患先天梅毒。梅毒孕婦極易出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎。妊娠合并梅毒患者必須要進(jìn)行規(guī)范化治療，在孕期盡早開始治療一療程，孕晚期再次治療一療程，對于既住感染的孕婦應(yīng)立即給予一個療程的治療。鑒于我國近年來妊娠合并梅毒報告病例數(shù)越來越多［3］，因此采用高敏感性和高特異性的檢驗方法對于該病的確診和治療具有重要意義。本研究運用磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法（CMIA）、明膠顆粒凝集試驗（TPPA）、甲苯胺紅血清不加熱血清試驗（TRUST）三種血清學(xué)檢測方法，對梅毒患者的標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對檢測結(jié)果進(jìn)行分析，旨在為梅毒臨床診斷檢測方法的選擇提供參考，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

材料與方法

一、材料

2018年1月1日至2018年10月31日9 480例梅毒螺旋體抗體檢測樣本，其中女性8 080例，男性1 400例；孕婦5 526例，非孕婦3 954例。

二、儀器與試劑

CMIA檢測采用AutoLumoA2000 Plus全自動化學(xué)發(fā)光測定儀及配套的梅毒螺旋體試劑盒和質(zhì)控品，TPPA法采用珠海麗珠試劑盒，TRUST法采用上海榮盛試劑盒，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

三、檢測方法

1.CMIA法：采用雙抗原夾心法進(jìn)行檢測，用TP抗原包被磁微粒，辣根過氧化物酶標(biāo)記TP抗原制備酶結(jié)合物，通過免疫反應(yīng)形成抗原-抗體-酶復(fù)合物，該復(fù)合物催化發(fā)光底物發(fā)出光子，發(fā)光強度與TP抗體的含量成正比。

2.TPPA法：將梅毒螺旋體（Nichols株）的精制菌體成分包被在人工載體明膠粒子上。這種致敏粒子和樣品中的梅毒螺旋體抗體進(jìn)行反應(yīng)發(fā)生凝集，產(chǎn)生粒子凝集反應(yīng)，由此可以檢測出血清和血漿中的梅毒螺旋體抗體，并且可用來測定抗體效價。

3.TRUST法：采用VDRL抗原重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液中制成，供在白色卡片上進(jìn)行試驗，以檢測血清或血漿中反應(yīng)素用，可作為梅毒病人的診斷和療效之參考。

四、統(tǒng)計學(xué)處理

用SPSS 18.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

9 480例梅毒螺旋體抗體磁微?；瘜W(xué)發(fā)光（CMIA）檢測結(jié)果顯示，TP抗體陽性214例，其中194例TPPA確認(rèn)為陽性，CMIA和TPPA進(jìn)行比較，假陽性率0.21%，陽性預(yù)測值90.6%，CMIA的S／CO值越大，TP確認(rèn)率越高，S／CO值＜5的陽性標(biāo)本確認(rèn)率僅為50.0%，S／CO值＞9的標(biāo)本，陽性確認(rèn)率為98.3%（表1）。比較各S／CO組TPPA獲得陽性率，S／CO值＝7～9和＞9的兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（表1）。對于CMIA篩查陽性的，TPPA陰性的20例人員進(jìn)行隨訪，13例生產(chǎn)三月后CMIA和TPPA均檢測為陰性，2例新生兒和1例兒童一月后CMIA和TPPA均檢測為陰性，2例人流術(shù)后三月CMIA和TPPA均檢測為陰性，1例老年婦女半年后仍然為CMIA陽性，TPPA陰性，還有一例失去聯(lián)系，未繼續(xù)隨訪。9 480例梅毒螺旋體抗體檢查結(jié)果顯示，孕期的假陽性率為0.27%，非孕期的假陽性率為0.13% （P＝0.114）（表2），這些結(jié)果表明孕期的假陽性率比起非孕期更高，但這些差異并無統(tǒng)計學(xué)意義。9 480例樣本中，TPPA陽性194例，TRUST陽性46例（均未曾治療）。經(jīng)過規(guī)范治療后，TPPA轉(zhuǎn)陰0例，TRUST轉(zhuǎn)陰44例，其中有2例雖未轉(zhuǎn)陰，但TRUST滴度分別從1∶64和1∶32降至1∶1，這些數(shù)據(jù)表明，TRUST的滴度檢測對于梅毒的診斷和療效評價有重要的臨床意義。

表1 194例TPPA陽性樣本在CMIA法不同S／CO值組的分布

表2 孕期與非孕期假陽性率的差異

討 論

CMIA為梅毒螺旋體特異性抗體定性檢測試驗，臨界值為1，檢測結(jié)果S／CO＜1為梅毒螺旋體特異性抗體陰性，檢測結(jié)果S／CO≥1為梅毒螺旋體特異性抗體陽性，陽性樣本需加做非梅毒螺旋體特異性抗體檢測（TRUST），如果非梅毒螺旋體特異性抗體（TRUST）為陽性，再進(jìn)一步檢測非梅毒螺旋體特異性抗體（TRUST）滴度，對于梅毒的診斷和療效的觀察有重要的臨床意義。梅毒螺旋體特異性抗體（CMIA）出現(xiàn)陽性結(jié)果時，要用TPPA復(fù)檢，報告結(jié)果要綜合考慮患者的年齡、病史以及臨床表現(xiàn)，如果兩者均為陽性才可給出陽性報告，這樣可大大減少假陽性的發(fā)生［4］。CMIA陽性結(jié)果的S／CO值＜5的陽性標(biāo)本確認(rèn)率僅為50%，而S／CO值＞9的標(biāo)本，TPPA 確認(rèn)率為98.3%。CMIA 陽性結(jié)果的S／CO值越大，TPPA的確認(rèn)陽性符合率也相應(yīng)增加，該結(jié)果符合先前的研究報道［5］。某些疾?。ㄈ鐞盒阅[瘤、心血管疾病、肝炎、自身免疫性疾病等）患者體內(nèi)含有異嗜性抗體、自身抗體、類風(fēng)濕因子、甲胎蛋白等，這些物質(zhì)會與試劑中的抗原成分非特異結(jié)合，產(chǎn)生假陽性［6］；還有一些特殊人群（如孕婦、嬰幼兒、老年人）因為生理和免疫的因素，產(chǎn)生的抗體和蛋白質(zhì)也易導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)假陽性［7］，因此要考慮患者的年齡、病史、臨床信息等進(jìn)行綜合分析。