王 芳
(丹東市中心血站檢驗科,遼寧 丹東 118002)
隨著醫(yī)療水平和醫(yī)療技術的不斷發(fā)展,全自動酶免檢測系統(tǒng)被越來越多的應用于臨床醫(yī)學檢驗工作中,全自動酶免檢測系統(tǒng)又稱為全自動酶免分析儀和全自動酶免工作站[1]。我站在使用全自動酶免檢測系統(tǒng)對HBsAg、抗HCV等進行檢測時,常由于各類因素對檢測結果造成一定的影響,使得檢測結果出現(xiàn)不同程度的花板現(xiàn)象,導致檢測結果出現(xiàn)假陽性,降低了全自動酶免檢測系統(tǒng)的精確性[2]。本文為了探究含氯消毒液對全自動酶免檢測結果的影響,選取2018年1月至2019年1月我站收集的200例無償獻血樣本進行了研究,主要研究內(nèi)容報道如下。
1.1 一般資料:選取2018年1月至2019年1月我站收集的200例無償獻血樣本作為本次的研究對象,對其采用夾心ELISA方法進行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)以及丙型肝炎抗體(抗HCV)的檢測。儀器選用瑞士哈美頓公司生產(chǎn)的FAME24/20型號的全自動酶免分析系統(tǒng),整機包含分配、洗板、酶標判讀等所有過程。消毒液使用的為萬金消毒片,產(chǎn)自北京萬金兆元消毒技術有限公司,執(zhí)行標準為XNH 011 2017。本次研究所使用的HBsAg、抗HCV試劑均選用標準規(guī)格,并確保各類試劑在正常使用日期內(nèi)且保存良好[3]。
1.2 方法
1.2.1 實驗環(huán)境的控制:實驗室溫度和濕度均采用空調(diào)和加濕器進行控制,實驗室每次實驗結束后均需嚴格按照實驗室消毒標準對本次實驗中用到的器材、器皿、操作臺以及地面進行消毒和清潔處理,先試用消毒液對實驗器具等進行消毒,對板架等使用消毒液進行浸泡處理,處理后先用流水進行多次沖洗,之后用蒸餾水進行沖洗,沖洗后進行烘干或者晾干,確保下次實驗正常使用[4]。
1.2.2 ELISA實驗經(jīng)過:對照組采用未經(jīng)過含氯消毒液進行消毒的板架進行ELISA實驗,觀察組采用經(jīng)過含氯消毒液(使用600 mg/L含氯消毒液進行充分的浸泡)進行消毒的板架進行ELISA實驗。將觀察組經(jīng)消毒液處理過的板架采用HBsAg試劑進行實驗,操作過程嚴格按照全自動酶免分析系統(tǒng)以及手工法對本次研究的200例血清樣本進行檢測,經(jīng)過全自動酶免分析儀全過程檢測、判讀結果后,觀察出現(xiàn)花板的情況,將花板例數(shù)進行統(tǒng)計,計算花板率。
1.2.3 消除其他干擾,控制實驗變量:在使用對照組實驗時,不更換實驗的實際和洗液,觀察檢測結果未出現(xiàn)花板的情況,使用手工法進行檢測時,使用膠紙進行封板,觀察檢測結果仍然未出現(xiàn)花板的情況。在使用全自動酶免分析系統(tǒng)進行常規(guī)實驗時,應確保儀器處于正常使用狀態(tài),確保不出現(xiàn)其他交叉污染。
1.3 評價指標:對本次入選的200例無償獻血者的血漿標本分別采用對其采用未經(jīng)過含氯消毒液進行消毒的板架以及經(jīng)過含氯消毒液進行消毒的板架進行夾心ELISA實驗,對血清標本的HBsAg以及抗HCV采用自動酶免分析系統(tǒng)進行檢測,分析檢測結果,將兩組的HBsAg檢測的OD值、S/CO值以及抗HCV檢測結果出現(xiàn)的花板情況進行比較,探究含氯消毒液對全自動酶免檢測結果的影響。
1.4 統(tǒng)計學處理:采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件對本次研究100例無償獻血者的血清標本研究結果進行統(tǒng)計和分析,運用t檢驗方法,并采用χ2進行檢驗,用(%)表示組實驗結果的花板出現(xiàn)例。當P<0.05時,表示兩組數(shù)據(jù)之間的差異具有統(tǒng)計學意義。
2.1 兩組全自動酶免檢測結果花板出現(xiàn)率對比分析:由表1可知,使用含氯消毒液進行消毒處理過的板架進行ELISA實驗后的觀察組血清樣本中抗HCV花板率為26.00%(26/100),而使用未經(jīng)氯消毒液進行消毒處理過的板架進行ELISA實驗后的對照組血清樣本中抗HCV花板率為0.00%(0/100),觀察組明顯高于對照組,其中χ2=14.236,P<0.05,差異性顯著。
表1 兩組全自動酶免檢測結果花板出現(xiàn)率對比分析
2.2 兩組全自動酶免檢測結果中HBsAg陽性對照以及陰性對照檢測值中的OD值、S/CO值對比分析:將對照組和觀察組使用不同板架采用全自動酶免檢測系統(tǒng)的檢測結果進行分析后,得出:將HBsAg進行陽性以及陰性對照實驗后,觀察組血清樣本中對于HBsAg陽性對照以及陰性對照檢測值中的OD值、S/CO值明顯低于對照組,其中陽性對照,t=3.58,P<0.05,陰性對照,t=6.29,P<0.05,差異性顯著,具有統(tǒng)計學意義。
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)是指將已知的抗原或者抗體吸附于固相載體的表面,使得被酶標記后的抗原抗體余固相表面進行反應的過程,利用該技術可以對一部分常見的分子量比較大的抗原和抗體進行檢測和篩查,該技術主要的檢測原理即利用酶和特定的底物發(fā)生反應,會顯現(xiàn)出不同的顏色來進行判定[5]。本文選取2018年1月至2019年1月我站收集的200例無償獻血樣本作為本次的研究對象,使用全自動酶免檢測系統(tǒng)進行檢測時,將未經(jīng)過含氯消毒液進行消毒的實驗器材的顯色結果作為本次研究的對照組,將經(jīng)過含氯消毒液進行消毒的實驗器材的顯色結果作為觀察組。結果表明:觀察組血清樣本中抗HCV花板率為26.00%,明顯高于對照組的0.00%,P<0.05;觀察組對于HBsAg陽性對照以及陰性對照檢測值中的OD值、S/CO值明顯低于對照組,統(tǒng)計學顯示P<0.05,存在統(tǒng)計學意義。
綜上所述,在進行ELISA實驗時應將使用含氯消毒液處理過的板架等器材使用蒸餾水進行多次沖洗并晾干后,再進行實驗,能夠有效避免含氯消毒液對實驗結果造成的誤差。