王延卓，彭江紅

（烏蘭察布職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古烏蘭察布 012000）

目前，抗生素依然被廣泛用于養(yǎng)殖業(yè)，在促進動物機體生長發(fā)育和疫病防治方面發(fā)揮著重要作用（劉磊和朱立賢，2014；蘇勇，2004）。隨著養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，抗生素的濫用、耐藥和殘留等問題日益嚴(yán)重，影響抗生素的應(yīng)用前景，也阻礙了養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展（王春蘭，2015）。同時，隨著“減抗”“限抗”時代的到來，抗生素替代品的研究迫在眉睫。目前，益生菌制劑、抗菌肽制劑和中草藥等在抗生素替代方面的研究已成為熱點，而益生菌制劑功能的研究受到更多青睞（王向榮，2013）。常用的益生菌種類多樣，其中，芽孢桿菌屬常被作為一種活菌制劑應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)，芽孢桿菌可以產(chǎn)生多種活性酶等有益物質(zhì)，在促進動物機體生長發(fā)育和能量代謝方面發(fā)揮重要作用（張雙翔等，2018；張冬梅，2016）。乳酸芽孢桿菌是一類既可以產(chǎn)生乳酸，又可以形成芽孢的桿菌。1993年，國內(nèi)首次報道了乳酸芽孢桿菌的分離鑒定研究（趙蕊蕊等，2018），隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，該菌更多的功能及特點被發(fā)掘。研究表明，乳酸芽孢桿菌在腸道中可以消耗氧氣，抑制病原菌的生長，促進益生菌增殖，維持腸道微生態(tài)的動態(tài)平衡（Busetto等，2014）；其次，乳酸芽孢桿菌可以調(diào)節(jié)腸道pH，促進多種消化酶活性的發(fā)揮，保證了機體對營養(yǎng)物質(zhì)的需求；同時，乳酸芽孢桿菌對免疫器官功能的發(fā)揮具有一定促進作用，參與調(diào)節(jié)動物機體免疫力（Hatayama等，2006）。劉磊等（2011）研究了不同水平芽孢乳桿菌對仔雞生產(chǎn)性能、腸道發(fā)育及微生物菌群的影響發(fā)現(xiàn)，不同的用量對仔雞料重比、死淘率、腸道發(fā)育、空腸大腸桿菌數(shù)量等的影響各不相同。王向榮（2013）研究了芽孢乳桿菌替代抗生素對斷奶仔豬生長性能和血清生化指標(biāo)的影響發(fā)現(xiàn)，800mg/kg的芽孢乳桿菌替代喹乙醇、吉他霉素和硫酸粘桿菌素效果較好。本研究擬以芽孢乳桿菌為研究對象，分析其在肉兔健康養(yǎng)殖中的作用。

1 材料與方法

1.1 乳酸芽孢桿菌制劑 乳酸芽孢桿菌制劑中的活菌總數(shù)≥2×1010CFU/g。

1.2 試驗動物 選取體重相近的30日齡健康肉兔40只，購自某肉兔養(yǎng)殖場。

1.3 試驗動物分組及設(shè)計 將選取的肉兔隨機分為4組，每組10只，試驗組分別為高劑量組、中劑量組、低劑量組，日糧中乳酸芽孢桿菌的添加量依次為0.08%、0.04%和0.02%，對照組不添加，正常飲水，連續(xù)飼喂30 d。

1.4 生長性能測定 分別在試驗開始和結(jié)束時稱取各組肉兔的體重，測定各組肉兔的平均日增重，統(tǒng)計各組肉兔30 d的采食量，計算各組肉兔的平均日采食量；依據(jù)各組肉兔的日采食量和日增重，計算各組肉兔的料重比，計算公式如下：

平均日增重/（g/d）=（試驗?zāi)w重-試驗初體重）/試驗天數(shù)

平均日采食量/（g/d）=總采食量/試驗天數(shù)料重比=日采食量/日增重

1.5 血液生理生化指標(biāo)測定 各組隨機抽取5只肉兔進行心臟采血，5 mL/只，取2 mL血液加入到抗凝管中制備抗凝血，用于測定血液生理指標(biāo)；取3 mL血液，3000 r/min離心10 min，收集血清，測定血清生化指標(biāo)。

1.6 屠宰性能測定 取剩余的5只肉兔進行屠宰性能測定，試驗開始前，各組肉兔需禁食12 h，并于屠宰前稱重，記錄為宰前活重；利用空氣栓塞法處死，剝離皮毛，去除內(nèi)臟，并按照胴體要求，去除頭、尾和四足，測定各組的平均胴體重；依據(jù)全凈膛重和半凈膛重要求處理肉兔，測定各組肉兔的全凈膛屠宰率和半凈膛屠宰率，同時測定肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和脾臟指數(shù)。

全凈膛屠宰率/%=全凈膛重/宰前活重×100

半凈膛屠宰率/%=（全凈膛＋心臟重＋肝臟重＋腎臟重）/宰前活重×100

肝臟指數(shù)/%=肝臟重/宰前活重×100

腎臟指數(shù)/%=腎臟重/宰前活重×100

脾臟指數(shù)/%=脾臟重量/宰前活重×100

1.7 數(shù)據(jù)分析 用SPSS20.0進行統(tǒng)計分析，統(tǒng)計結(jié)果“X±SD”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能測定結(jié)果 通過對各組肉兔的生長性能測定（表1），發(fā)現(xiàn)各組的平均日增重存在差異性，而平均日采食量和平均料肉比均差異不顯著（P＞0.05）。其中，高劑量組和中劑量組平均日增重較對照組顯著提高了51.06%和33.27%（P＜0.01）。

表1 生長性能測定結(jié)果

2.2 血液生理生化指標(biāo)測定 通過測定各組肉兔的血液生理生化指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)各組生理指標(biāo)中僅白細(xì)胞數(shù)目（WBC）存在差異性，其他指標(biāo)均差異不顯著（P＞0.05），其中，高劑量組、中劑量組和低劑量組的白細(xì)胞數(shù)目均與對照組差異顯著，分別提高了70.71%、61.22%和57.14%（P＜0.05），結(jié)果見表2；表3生化指標(biāo)測定結(jié)果表明，僅谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和葡萄糖（GLU）存在差異性，其中，高劑量組和中劑量組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力較對照組分別提高了35.77%和29.53%（P＜0.01），高劑量組、中劑量組和低劑量組的葡萄糖濃度較對照組分別提高了122.4%、113.6%和89.6%（P＜0.05），其他指標(biāo)均差異不顯著（P＞0.05）。

表2 血液生理指標(biāo)測定結(jié)果

2.3 屠宰性能測定結(jié)果 由表4可知，乳酸芽孢桿菌的劑量對全凈膛率和半凈膛率的影響較大，隨著劑量的增加，試驗組的全凈膛率和半凈膛率均先增加后降低，其中，低劑量組的全凈膛率和半凈膛率最高，且均與對照組和高劑量組差異顯著（P＜0.05）；各組間的肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和脾臟指數(shù)差異均不顯著（P＞0.05）。

表3 血清生化指標(biāo)檢測結(jié)果

3 討論

乳酸芽孢桿菌憑借其產(chǎn)乳酸、產(chǎn)芽孢的特性，已成為當(dāng)前益生菌開發(fā)領(lǐng)域的重點研究對象，飼料添加劑替代抗生素具有良好的研究價值（Mishra等，2013）。首先，乳酸芽孢桿菌是一種兼性厭氧菌，在增殖過程中可以產(chǎn)生乳酸、乙酸等多種有機酸，可以對腸道中的大腸桿菌和沙門氏菌等病原菌產(chǎn)生抑制作用，從而防止疫病發(fā)生。其次，乳酸芽孢桿菌可以產(chǎn)生活性較高的蛋白酶、脂肪酶等活性物質(zhì)，在機體能量代謝方面起到調(diào)節(jié)作用。同時，乳酸芽孢桿菌具有良好的耐受性，在工業(yè)生產(chǎn)中具有較好的應(yīng)用前景（Thamacharoensuk,等，2015）。動物的平均日增重、平均日采食量和平均料重比是衡量其生長性能的重要指標(biāo)，本研究發(fā)現(xiàn)，高劑量組和中劑量組的肉兔平均日增重較高，且均與對照組差異顯著（P＜0.05），此外，各組間平均料重比雖然差異不顯著，但試驗組均低于對照組，這表明，乳酸芽孢桿菌制劑在一定程度上提高了飼料利用率。白細(xì)胞主要包括淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等，可以間接反映動物機體的免疫力水平（Zheng等，2017），筆者發(fā)現(xiàn)，食用乳酸芽孢桿菌的肉兔白細(xì)胞數(shù)目會增高，乳酸芽孢桿菌可以調(diào)節(jié)機體的免疫水平。通過測定屠宰性能發(fā)現(xiàn)，組間全凈膛率和半凈膛率存在差異，隨著劑量的增加，試驗組全凈膛率和半凈膛率均先增加后降低，其中，低劑量組的全凈膛率和半凈膛率最高，且均與對照組和高劑量組差異顯著（P＜ 0.05）。

表4 屠宰性能測定結(jié)果??????????????????????????????%

4 結(jié)論

通過分析乳酸芽孢桿菌在肉兔上的臨床應(yīng)用效果及生產(chǎn)成本發(fā)現(xiàn)，選用0.04%的乳酸芽孢桿菌可以有效提高肉兔平均日增重，促進機體能量代謝，用量為0.02%時有利于提高屠宰性能。