朱光來，齊富剛 ，王東博，陸 丹 ，胡繼悅，蔡朝霞

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300；2.泰州市海陵區(qū)鑫潤特種水產(chǎn)專業(yè)合作社，江蘇泰州 225300）

益生菌是保護(hù)宿主免受疾病侵害的有益微生物，在水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)（無論是在孵育和生長的水平上）中發(fā)揮著非常重要和關(guān)鍵的作用，因?yàn)槲⑸锏幕钚钥梢灾苯佑绊懰|(zhì)和水產(chǎn)動(dòng)物的疾病防控（邱寶生等，2004）。用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的益生菌包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌、酵母和單細(xì)胞藻類。已有研究報(bào)道了益生菌被成功應(yīng)用于無脊椎動(dòng)物的飼養(yǎng)中，且大多數(shù)益生菌可以添加在飼料中，它們可以通過胃在腸道中存活（郭慧玲等，2015）。目前，關(guān)于益生菌的作用模式還存在爭議，但其中有益菌群對(duì)病原菌的競爭排斥被很多學(xué)者接受（Gomez-Gill等，2000；Fuller，1992）。一些研究把促進(jìn)動(dòng)物生長歸因于益生菌的營養(yǎng)益處，如提高礦物質(zhì)和微量元素活性、產(chǎn)生重要的消化酶和維生素等（Holzapfel等，1998）。此外有研究表明，溶藻弧菌可能具有一些特點(diǎn)，能在幼蝦孵化過程防御疾病的感染（Gomez-Gill等，2000）。利用乳酸菌作為益生菌和非特異性免疫抑制劑，除了可以改善水質(zhì)和營養(yǎng)消化率外，還可以增加幼蟲存活率和水產(chǎn)動(dòng)物屠體重（Anderson，1992）。近年來，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中利用乳酸菌及其代謝產(chǎn)物作為潛在益生菌的應(yīng)用越來越多，因?yàn)樗梢源龠M(jìn)幼苗生長，提高存活率和營養(yǎng)價(jià)值。此外，在日糧中添加益生菌可以促進(jìn)牡蠣幼蟲的生長（Douillet和 Langdon，1994）。雖然益生菌已被證明是有效的，但目前在羅氏沼蝦養(yǎng)殖過程中使用的報(bào)道較少。因此，本研究旨在評(píng)估益生菌對(duì)羅氏沼蝦生長性能和屠體成分的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 對(duì)照組和各處理組日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。將250只蝦苗[平均體重（0.01±0.002）g]分為 5組，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25只，試驗(yàn)共進(jìn)行12周。除了益生菌比例變化外，試驗(yàn)日糧的主要營養(yǎng)水平相同，處理組在飼料中分別添加1%、2%、3%、4%益生菌。試驗(yàn)用益生菌含0.25 M蒜素，6×107cfu/g枯草芽孢桿菌以及3690 U/g酵素水解酶。5種日糧蛋白水平約為35%，能量為4.4 kcal/g。將干燥的原料粉碎成均勻的混合物，然后將混合后的飼料通過制粒機(jī)進(jìn)行加工。每日按照幼苗體重的10%進(jìn)行投喂，分別在早上9點(diǎn)和下午2點(diǎn)飼喂兩次。

表1 羅氏沼蝦日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 飼養(yǎng)管理 每個(gè)魚缸飼養(yǎng)大小均勻[（0.01±0.002）g]的羅氏沼蝦幼苗25只。在整個(gè)試驗(yàn)期間，每個(gè)魚缸的總水量保持在20 L。利用氧氣瓶為所有水族箱提供連續(xù)氧氣。試驗(yàn)開始前對(duì)幼蟲進(jìn)行為期一周的馴化，以便適應(yīng)飼料。水族箱隔日進(jìn)行清洗，更換約30%的水，每隔2 d用去氯自來水清洗一次。

1.3 生長性能 每隔2周對(duì)幼苗進(jìn)行稱重，計(jì)算相關(guān)指標(biāo)，計(jì)算公式如下：

特定生長速度/%=（末重-初重）/試驗(yàn)天數(shù)×100；

歸一化生物指數(shù)/%=（末重×幼苗數(shù)量-初重×幼苗數(shù)量）×100；

蛋白效率=幼苗增重×幼苗數(shù)量/蛋白攝入量。

每天記錄幼苗的死亡數(shù)量，計(jì)算死亡數(shù)和存活數(shù)及存活率。

1.4 化學(xué)分析及水質(zhì) 試驗(yàn)期間測定水質(zhì)常規(guī)指標(biāo)（溫度、pH、溶解氧、亞硝酸鹽、磷酸鹽），試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)蝦進(jìn)行屠宰，分析屠體蛋白質(zhì)、水分、脂肪和灰分含量。

1.5 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS軟件單因素方差模型對(duì)各組測定指標(biāo)的平均值進(jìn)行分析，采用Turkey法進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 水質(zhì) 由表2可知，整個(gè)試驗(yàn)期間，對(duì)照組和處理組對(duì)水溫、溶解氧、pH、總堿度、亞硝酸鹽和磷酸鹽無顯著差異（P＞0.05），且各組水質(zhì)均符合羅氏沼蝦的生長需求。

2.2 生長性能 由表3可知，益生菌組較對(duì)照組顯著提高了羅氏沼蝦試驗(yàn)的末重、特定生長率和歸一化生物指數(shù)（P＜0.05），其中處理2組的末重、特定生長率和歸一化生物指數(shù)在第6周最高（P＜0.05），處理3組在第8周直到試驗(yàn)結(jié)束均最高（P ＜ 0.05）。

表2 各處理試驗(yàn)期間的水質(zhì)

表3 益生菌對(duì)羅氏沼蝦生長性能的影響

表4 益生菌對(duì)羅氏沼蝦飼養(yǎng)效率的影響

2.3 飼養(yǎng)效率 由表4可知，與其他組相比，日糧添加2%和3%益生菌顯著降低羅氏沼蝦的料重比，顯著提高蛋白效率比（P＜0.05）。試驗(yàn)前4周，各組對(duì)羅氏沼蝦的采食量無顯著影響（P＞0.05）。

2.4 存活率 由表5可知，處理2組和處理3組羅氏沼蝦存活率最高，分別達(dá)到76%和78%（P＜ 0.05）。

表5 益生菌對(duì)羅氏沼蝦存活率的影響

2.5 體成分 由表6可知，對(duì)照組和處理組羅氏沼蝦屠體水分和灰分含量無顯著差異（P＞0.05）。處理2組和處理3組羅氏沼蝦屠體蛋白組含量最高，處理4組最低（P＜0.05）。與處理2和處理3組相比，對(duì)照組、處理1和處理4組羅氏沼蝦屠體脂肪含量顯著提高（P＜0.05）。

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在大多數(shù)處理組中，添加益生菌顯著提高了蝦的存活率。由于日糧中添加益生菌顯著改變腸道菌群中芽孢桿菌的比例，蝦存活率的提高可能是由于益生菌降低了其他細(xì)菌（尤其是有害細(xì)菌）的數(shù)量，特別是在幼苗生長后期芽孢桿菌占優(yōu)勢。在蝦機(jī)體中，作為益生菌的芽孢桿菌可以同時(shí)在養(yǎng)殖水體和蝦的消化道中定植，芽孢桿菌也可以代替弧菌進(jìn)入蝦的腸道，從而提高蝦的存活率，同時(shí)，芽孢桿菌能在營養(yǎng)和空間上超過其他細(xì)菌，并且能抑制其他細(xì)菌的繁殖（Rengpipat等，1998）。

表6 益生菌對(duì)羅氏沼蝦體成分的影響???????????????????????%

本研究中，所有添加益生菌的日糧，蝦生長速度均高于對(duì)照組，說明添加益生菌可提高蝦的生長性能和飼料利用率?？莶菅挎邨U菌可以產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等消化酶，提高腸道消化酶濃度，同時(shí)還可以通過合成維生素和輔助因子，或通過酶促反應(yīng)提高消化酶活性（Lee和Lee，1990）。接種芽孢桿菌后，對(duì)蝦的生長有顯著促進(jìn) 作 用（Gullian等，2004）。El-Dakar和 Goher（2004）發(fā)現(xiàn)，接種枯草桿菌后，蝦的生長通常得到增強(qiáng)，因?yàn)橐嫔梢允瓜柑禺愋曰钚栽黾?，可能促進(jìn)飼料消化和吸收，進(jìn)而促進(jìn)蝦的生長和存活，包括飼料轉(zhuǎn)化率和特定生長速率。相反，Shariff等（2001）發(fā)現(xiàn)，益生菌對(duì)南美對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦的存活率和生長無顯著提高作用，這可能是由于物種間差異造成的。

試驗(yàn)日糧添加益生菌可降低蝦的料重比，改善蛋白效率，這與Haroun等（2006）的研究結(jié)果一致。通過以上試驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，在羅氏沼蝦幼苗日糧中添加益生菌后，其生長速度和料比均有顯著改善，與Shelby等（2006）先前的研究數(shù)據(jù)相一致，表明使用益生菌生物原料為作為羅氏沼蝦飼料添加劑可以促進(jìn)生長性能和營養(yǎng)利用率。但益生菌對(duì)羅氏沼蝦消化率的作用模式及其對(duì)免疫反應(yīng)和應(yīng)激抵抗的影響還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

日糧添加2%或3%益生菌可以提高羅氏沼蝦的生長性能。