李 泳，李同新

（南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南南陽 473000）

日本鰻鱺是東南亞最具傳統(tǒng)價值和養(yǎng)殖價值的淡水魚類之一，具有很高的市場價值，我國鰻鱺資源豐富，長江、錢塘江、閩江等河口地段尤多，江浙兩省的幼苗資源占到近50%。魚粉是水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料中優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源，粗蛋白質(zhì)高達(dá)66%，同時富含多種必需氨基酸。但由于魚粉資源有限且價格昂貴，開發(fā)魚粉蛋白源替代品可以使水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)對魚粉的依賴程度降到最低。但對于大多數(shù)魚類來說，價格和魚粉數(shù)量有限，希望用其他蛋白質(zhì)來源替代而不對魚生長性能產(chǎn)生負(fù)面影響（Tacon等，2011）。豆粕是最常用的植物蛋白來源，其價格相對動物源蛋白低廉、氨基酸平衡、蛋白質(zhì)含量高，但由于豆粕中存在抗?fàn)I養(yǎng)因子，如蛋白酶抑制劑、凝集素、植酸鹽、葡萄糖苷酸鹽、皂苷和單寧，限制了其在魚類日糧中的添加量。

豆粕、家禽副產(chǎn)品、血粉、皮革粉、羽毛粉等動植物蛋白源的濃縮混合物已被廣泛應(yīng)用于多種淡水魚飼料中（Kirimi等，2016）。Khan等（2003）發(fā)現(xiàn)，使用豆粕、家禽副產(chǎn)品、皮革粉、血粉和羽毛粉作為魚粉替代品對魚健康和生長沒有負(fù)面影響。本研究使用的魚粉替代品是以家禽副產(chǎn)品、皮革粉、血粉、羽毛粉、魚油和豆粕為基礎(chǔ)，添加賴氨酸和蛋氨酸后制成的混合物，試驗(yàn)?zāi)康氖翘接懭占Z添加魚粉替代物對鰻鱺生長性能的影響，以及魚粉替代品適宜添加水平。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)分為5組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)5條魚[平均初始體重（119.60±0.97）g]，試驗(yàn)日糧中分別以0、10、20、30和40%的魚粉替代品代替魚粉，試驗(yàn)共進(jìn)行10周，試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)成分分析見表1。所有的日糧都補(bǔ)充了維生素和礦物質(zhì)預(yù)混料，以玉米淀粉為粘合劑，以魚油和大豆油為油脂來源。日糧和鰻鱺機(jī)體氨基酸組分分別見表2、表5。

將干料在電動攪拌機(jī)中攪拌5～10 min，通過1 mm螺桿式制粒機(jī)成型。然后將顆粒風(fēng)干約72 h，這個過程重復(fù)一次，以創(chuàng)建第二批飼料。

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)前兩周每天喂魚兩次（早上9點(diǎn)和下午6點(diǎn)），前兩周飼喂量為濕體重的0.50%，第三周和第四周飼喂量為0.70%，試驗(yàn)結(jié)束前6周飼喂量為濕體重的1.50%。在整個試驗(yàn)期間，通過水箱加熱器將水溫維持在（25±1）℃。此外，在每個魚缸中放置供氧器，以維持氧飽和度。

表1 試驗(yàn)日糧原料組成及成分分析???%

表2 試驗(yàn)日糧氨基酸含量??????g/kg

1.3 指標(biāo)分析 試驗(yàn)結(jié)束后分析魚的生長性能。整個機(jī)體用于分析水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量。采用肝素化注射器從尾靜脈采血，3800×g離心5 min，分離血清。血清樣品-70℃保存，用于分析血液生化參數(shù)，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性、葡萄糖、總蛋白、甘油三酯、膽固醇采用商品試劑盒分析。參考Ellis（1999）的方法評估非特異性免疫反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SAS軟件單因素方差分析，檢驗(yàn)日糧魚粉替代品添加水平對鰻魚生長性能的效果。采用Tukey法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05為差異顯著性水平。同時采用折線回歸分析魚粉替代品的適宜添加水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能 由表3可知，在飼養(yǎng)試驗(yàn)10周后，對照組、10%和20%魚粉替代品組較30%和40%魚粉替代品組顯著提高了鰻鱺增速（P＜0.05）。鰻鱺末重和采食量變化趨勢與增速一致。處理組魚的特定生長率與增速呈相似趨勢，平均生長率為0.30%～0.42%/d，40%魚粉替代品組較對照組和10%魚粉替代品組顯著降低了飼料效率（P＜0.05）。各處理間的蛋白質(zhì)效率比、肝臟指數(shù)和內(nèi)臟指數(shù)無顯著差異（P＞0.05）。40%魚粉替代品組外形指數(shù)顯著低于30%組（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)束后，鰻鱺存活率在90%～100%，各組無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 體成分 由表4可知，各處理組鰻鱺機(jī)體的水分含量為59.40%～63.50%，其中40%魚粉替代品組水分較對照組顯著降低（P＜0.05）。機(jī)體粗蛋白質(zhì)含量為16.27%～16.53%，各組粗蛋白質(zhì)含量無顯著差異（P＞0.05），而機(jī)體粗脂含量為14.23%～14.83%，組間也無顯著差異（P＞0.05）。

試驗(yàn)日糧的氨基酸組成（表2）與機(jī)體氨基酸含量（表5）在氨基酸組成上沒有顯著變化（P＞0.05）。鰻鱺機(jī)體組織中天冬氨酸是氨基酸中主要的非必需氨基酸，而亮氨酸和賴氨酸是主要的必需氨基酸。

表3 試驗(yàn)日糧對鰻鱺生長性能的影響

表4 試驗(yàn)日糧對鰻鱺體成分的影響????????????????????????????%

表5 試驗(yàn)日糧對鰻鱺機(jī)體氨基酸組成的影響????????????????????g/kg

表6 試驗(yàn)日糧對鰻鱺血清生化指標(biāo)的影響

表7 試驗(yàn)日糧對鰻鱺非特異性免疫反應(yīng)的影響

2.3 血清生化指標(biāo) 由表6可知，30%和40%魚粉替代品組較其他組顯著提高了血清AST和ALT水平（P＜0.05）。同樣，與對照組相比，30%和40%魚粉替代品組鰻鱺血清葡萄糖含量顯著提高（P＜0.05）。10%魚粉替代品組較20%組顯著提高了血清總蛋白含量（P＜0.05）。對照組與各處理組間對血清膽固醇含量無顯著影響（P＞0.05）。對照組血清甘油三酯含量最低（P＜0.05），而40%魚粉替代品組較對照組、10和20%組顯著提高了血清甘油三酯含量（P＜ 0.05）。

2.4 非特異性免疫反應(yīng) 由表7可知，40%魚粉替代品組SOD水平最高，10%魚粉替代品組最低，但各組無顯著差異（P＞0.05）。同樣，溶菌酶活性也表現(xiàn)出與SOD相似的趨勢。

3 討論

本研究結(jié)果表明，日糧添加10%、20%魚粉替代品、對照組對鰻鱺生長性能無顯著影響，但添加水平超過20%時對生長性能有負(fù)面影響，這說明較高水平不同蛋白質(zhì)來源的魚粉替代品的局限性，以及由于日糧中某些氨基酸、維生素和礦物質(zhì)的缺乏會對魚生長性能產(chǎn)生不利影響。因此，大多數(shù)魚飼料中添加包括蛋氨酸、賴氨酸、植酸酶、牛磺酸、引誘劑等可以促進(jìn)魚生長、飼料利用、身體組成和生理健康的氨基酸和添加劑（Jo等，2016）。本研究中添加魚粉替代品后對魚機(jī)體成分的影響有一定差異，其中40%魚粉替代品組與對照組相比機(jī)體水平含量顯著降低。

血液生化指標(biāo)是評價魚類健康和應(yīng)激水平的重要指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，日糧添加0～20%魚粉替代品對AST和ALT水平無顯著影響，但30%～40%魚粉替代品顯著提高這兩種酶的水平。同樣，與對照組相比，日糧添加魚粉替代品有提高血清葡萄糖和甘油三酯含量的趨勢，這可能是由于魚粉替代品中含有豆粕，而豆粕的胰蛋白酶抑制劑、植酸酶、皂苷、鞣質(zhì)等抗?fàn)I養(yǎng)因子水平升高的影響，最終可能導(dǎo)致腸道組織受損（Moniruzzaman等，2018）。相反，盡管血清膽固醇含量很高，但其不受試驗(yàn)日糧影響，而且膽固醇值在許多淡水鰻魚種常見的范圍內(nèi)（Nates，2016）。

非特異性防御機(jī)制是微生物入侵過程中需要的一種高效的清除系統(tǒng)和降解系統(tǒng)，否則會導(dǎo)致嚴(yán)重的炎癥，最終導(dǎo)致動物死亡，它包括中性粒細(xì)胞活化、過氧化物酶、氧化自由基、蛋白酶、賴氨酸、凝集素的產(chǎn)生，以及其他炎癥因子的啟動，如黏膜分泌作為魚的第一道防線，這些機(jī)制通過控制免疫細(xì)胞釋放和清除活性氧在感染的所有階段發(fā)揮重要作用（Park等，2016）。隨著日糧魚粉替代品添加水平的升高，SOD活性并未顯著升高，這與Jo等（2016）的研究結(jié)果一致。與SOD一樣，溶菌酶也是一種重要的防御機(jī)制酶，它為細(xì)菌裂解提供動力，激活補(bǔ)體系統(tǒng)的吞噬細(xì)胞的作用（Jo等，2016）。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果通過回歸分析表明，鰻鱺日糧中魚粉替代品的適宜添加水平為15.4%～20%。魚粉替代品可以作為淡水魚（鰻鱺）潛在的飼料蛋白原料。