司百會 劉海霞 司 凡 萬 輝

1.河北省承德市中心醫(yī)院婦科 067000；2.河北省承德市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科 067000

宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤，其發(fā)病率逐年遞增[1]。國內(nèi)每年新發(fā)病例為13 萬～14 萬例，死亡病例在3000 例以上[2]。性生活開始的2 年內(nèi)，超過50%的女性會感染人乳頭瘤病毒（HPV），且性生活頻率越高的女性感染率越高[3]。HPV 持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要和必需因素，與其相關(guān)的HPV 亞型高達(dá)100 余種[4]。較多研究認(rèn)為宮頸癌是目前唯一有望消滅的惡性腫瘤。而臨床發(fā)現(xiàn)不同亞型HPV 導(dǎo)致宮頸細(xì)胞學(xué)異常的風(fēng)險不同[5]。除HPV 感染外，微量元素等潛在危險因素也參與癌前病變及宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展[6]。本研究分析了不同宮頸疾病患者HPV 感染分型和血清微量元素水平，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年12 月～2018 年12 月河北省承德市中心醫(yī)院（以下簡稱為“我院”）收治的宮頸細(xì)胞學(xué)異?；颊?00 例作為研究組，年齡23～78 歲，平均（49.65±10.32）歲，妊娠（2.78±0.82）次；另取同期收治的慢性宮頸炎患者360 例作為對照組，年齡27～76 歲，平均（50.15±9.79）歲，妊娠（2.73±0.95）次。研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：病理檢查明確診斷為宮頸細(xì)胞學(xué)異常者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)后行進(jìn)一步補(bǔ)充治療者；②既往采用化療或放療治療者；③既往治療后未控制或復(fù)發(fā)者；④服用激素類藥物或避孕藥者；⑤合并其他惡性腫瘤者；⑥有金屬接觸史。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中華婦產(chǎn)科學(xué)》[7]中慢性宮頸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查未見異常者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無性生活史；②既往診斷為宮頸病變后接受治療者；③合并其他惡性腫瘤；④未服用激素類藥物或避孕藥者；⑤有金屬接觸史。兩組患者年齡及妊娠次數(shù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方案

1.2.1 HPV 分型檢測 標(biāo)本采集前24 h 內(nèi)禁止陰道內(nèi)用藥或性生活，患者取截石位，充分消毒宮頸外口和外陰，將宮頸表面分泌物擦拭干凈，隨后用細(xì)胞刷在宮頸外口上方10～12 mm 處旋轉(zhuǎn)1 周，將細(xì)胞刷在采集管中洗脫，提取HPV-DNA，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增基因，按HPV 核酸分型檢測試劑盒（上海透景生命科技股份有限公司，生產(chǎn)批號：20171132）說明書進(jìn)行核酸分子快速雜交，檢測HPV6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83 等23 種亞型。

1.2.2 微量元素檢測 入組后24 h 內(nèi)采集患者空腹靜脈血5 mL，血清分裝后，-20℃保存，按微量元素鑒定標(biāo)準(zhǔn)測定，標(biāo)準(zhǔn)品由國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢測中心提供，檢測儀器為電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀（Integra XL）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。多因素相關(guān)性分析采用Logistic 回歸分析，相關(guān)性分析采用Spearman 分析法。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者HPV 感染分型情況

研究組516 例（86.00%）患者為HPV 陽性，對照組162 例（45.00%）患者為HPV 陽性，兩組HPV 陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=182.311，P＜0.05）。研究 組 患 者HPV 類 型 為HPV18、16、31、33、52、58、59和HPV6，對照組患者HPV 類型為HPV33、52、58、66、68 和HPV6、11、43。研究組高危型HPV 陽性共452 例（87.60%），對照組高危型HPV 陽性共68 例（41.98%），兩組HPV 感染分型比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=235.446，P＜0.05）。見表1。Spearman 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，宮頸細(xì)胞學(xué)異常與HPV 感染及高危型HPV 感染均呈正相關(guān)（r=0.403、0.468，P＜0.05）。

2.2 兩組患者感染情況

研究組單一感染陽性率高于對照組，多重感染陽率低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=135.776，P＜0.05）。見表2。

表1 兩組患者HPV 感染分型情況[例（%）]

表2 兩組患者感染情況[例（%）]

2.3 兩組患者血清微量元素比較情況

研究組血清鎘元素、鎳元素、砷元素、銅元素水平高于對照組，血清鋅元素和硒元素水平低于對照組，差異均有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。見表3。

表3 兩組患者血清微量元素比較（）

表3 兩組患者血清微量元素比較（）

2.4 Logistic 回歸分析結(jié)果

Logistic 回歸分析發(fā)現(xiàn)銅元素≥28.73 μmol/L是宮頸細(xì)胞學(xué)異常的獨(dú)立危險因素，而鋅元素≥71.96 μmol/L 和硒元素≥36.47 μg/L 對機(jī)體起到保護(hù)作用（P＜0.01）。見表4。

表4 Logistic 回歸分析結(jié)果

3 討論

本研究對960 例宮頸疾病患者HPV 感染分型進(jìn)行觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有678 例患者檢出HPV，陽性率為70.63%。同時發(fā)現(xiàn)，研究組HPV 陽性率高于對照組，提示宮頸細(xì)胞學(xué)異常與HPV 感染有關(guān)；研究組HPV 亞型以高危型為主，對照組以低危型為主；統(tǒng)計學(xué)分析也證實(shí)，研究組高危型HPV 陽性率高于對照組。Spearman 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，宮頸細(xì)胞學(xué)異常分別與HPV 感染及高危型HPV 感染呈正相關(guān)性，提示HPV 感染及高危型HPV 感染與患者發(fā)生宮頸細(xì)胞學(xué)異常密切相關(guān)[8]。

HPV 亞型高達(dá)100 余種，且各亞型間基本無交叉保護(hù)抗體，二重或多重感染在臨床上極為常見[9-10]。研究發(fā)現(xiàn)，研究組單一感染陽性率高于對照組，多重感染陽性率低于對照組。與Wentzensen 等[11]研究結(jié)果一致，宮頸病變患者多以高危HPV 亞型單一感染為主。研究組單一感染主要為高危HPV 亞型，占比高達(dá)85.13%，提示單純高危型HPV 感染導(dǎo)致宮頸細(xì)胞學(xué)異常的風(fēng)險更高。也有研究認(rèn)為高危型HPV 和低危型HPV 對宮頸致病的潛伏時間不同可能是導(dǎo)致多重感染與單一感染分布差異的重要原因[12]。

微量元素有助于維持機(jī)體各器官的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。微量元素處于健康濃度時，經(jīng)相應(yīng)的酶消除體內(nèi)自由基；平衡狀態(tài)打破后，常導(dǎo)致正常細(xì)胞損傷及病毒感染[13]。鋅元素缺乏可引起外陰部、肛門及口眼等部位發(fā)生丘疹、發(fā)紅、濕疹；鐵元素缺乏可引起缺鐵性貧血。目前關(guān)于微量元素變化對宮頸細(xì)胞學(xué)異常的影響機(jī)制尚無定論?？梢悦鞔_的是，微量元素對核酸和細(xì)胞的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、機(jī)體免疫力均有重要影響[14-15]。微量元素可能通過影響HPV 感染、機(jī)體免疫反應(yīng)等過程影響宮頸細(xì)胞學(xué)異常的發(fā)生、發(fā)展。徐又先等[16]研究發(fā)現(xiàn)，年輕女性宮頸癌致病因素中，硒和鋅等微量元素水平低時效應(yīng)微弱，一旦與高危型HPV 感染或其他強(qiáng)致癌因素結(jié)合時，將出現(xiàn)明顯增效作用。有研究發(fā)現(xiàn)，維吾爾族女性高危型HPV 感染率低于漢族女性，而宮頸癌發(fā)病率和病死率均顯著高于漢族婦女，推測與維吾爾族女性體內(nèi)微量元素水平異常有關(guān)[17]。

本研究發(fā)現(xiàn)，銅≥28.73 μmol/L 是宮頸細(xì)胞學(xué)異常的獨(dú)立危險因素，而鋅≥71.96 μmol/L 和硒≥36.47 μg/L 對機(jī)體起到保護(hù)作用。銅是金屬酶的必要元素，介導(dǎo)神經(jīng)、內(nèi)分泌、呼吸等多個生理過程，對促進(jìn)多種酶合成并維持其活性有著重要作用。目前已知卵巢癌、肝癌、胃腸道癌及乳腺癌等多種惡性腫瘤中銅元素均表現(xiàn)為異常增高，且隨病情惡性程度的增高而增高[18]。銅元素對DNA 的G-C 堿基對有直接破壞和致突變作用，也可產(chǎn)生自由基導(dǎo)致部分腫瘤抑制基因失活或消失，因此其水平異常增高可能導(dǎo)致宮頸細(xì)胞學(xué)異常的發(fā)生[19]。硒元素是自由基捕獲劑，有助于抑制致癌物引起的染色體斷裂。此外，硒元素對腫瘤細(xì)胞的增殖過程也有一定抑制作用[20]。HPV 感染率會隨著血清硒元素含量的升高呈現(xiàn)下降趨勢，兩者間存在劑量反應(yīng)關(guān)系[21]。鋅元素是基因表達(dá)的關(guān)鍵元素，其含量降低可導(dǎo)致p53 基因等促腫瘤生物信號過表達(dá)，影響DNA 的完整性，進(jìn)而促發(fā)腫瘤[22]。同時，鋅元素對T 細(xì)胞輔助因子合成過程具有抑制作用也可導(dǎo)致機(jī)體免疫監(jiān)視功能紊亂，無法逆轉(zhuǎn)癌變生物信號，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生[23]。而鋅元素和硒元素血清水平增高時，以上癌變過程均可得到有效控制，提示鋅元素和硒元素血清水平增高是宮頸細(xì)胞學(xué)異常保護(hù)因素的主要原因。陶華等[24]的研究發(fā)現(xiàn)對高危型HPV 感染患者的全身血細(xì)胞和微量元素的變化檢測同時進(jìn)行早期干預(yù)，可能是臨床上預(yù)防宮頸癌行之有效的方法。

綜上所述，宮頸疾病患者宮頸細(xì)胞學(xué)異常與HPV 感染分型、血清鋅、硒和銅元素水平異常密切相關(guān)，但宮頸細(xì)胞學(xué)異常與以上因素間的因果關(guān)系有待進(jìn)一步研究。