李炳玉
【摘 要】目的:研究兒童在接種麻疹、風(fēng)疹疫苗之后,體內(nèi)IgG抗體的情況及影響因素。方法:將本市某區(qū)縣的0~15歲適齡兒童納為研究兒童,在2016年和2017年分別對該區(qū)縣的兒童進(jìn)行了麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gG抗體的檢測。結(jié)果:2016年的麻疹、風(fēng)疹的IgG的陽性率各年齡組間對比差異顯著,2017年的麻疹、風(fēng)疹的IgG的陽性率各年齡組間對比差異顯著。結(jié)論:在進(jìn)行檢測的過程中,要對實驗室溫濕度實驗的條件進(jìn)行嚴(yán)格控制,還要做好實驗室的內(nèi)部質(zhì)量控制工作,加強(qiáng)實驗操作培訓(xùn)、提高專業(yè)人員技術(shù)水平、加大疫苗接種的覆蓋率及及時性。
【關(guān)鍵詞】麻疹;風(fēng)疹;IgG抗體;影響因素
【中圖分類號】R272.22【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1005-0019(2019)20--01
麻疹、風(fēng)疹均是兒童常見急性呼吸道傳染病之一[1],該兩種疾病不僅會對兒童身體造成較大的傷害,而且在臨床上均有極強(qiáng)的傳染性[2],病毒通過呼吸道飛沫傳播,而通過注射疫苗來進(jìn)行疾病的預(yù)防是最效的手段[3-4]。因此,對IgG抗體的檢測分析,是對兒童注射疫苗后是否起預(yù)防疾病作用的有效途徑。本次研究將本市某區(qū)縣的0~15歲適齡兒童納為研究兒童,研究兒童在接種麻疹、風(fēng)疹疫苗之后,體內(nèi)IgG抗體的情況及影響因素。
1 資料與方法
1.1 一般資料 本次研究將本市某區(qū)縣的0~15歲適齡兒童納為研究兒童,在2016年和2017年分別對該區(qū)縣的兒童進(jìn)行了麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gG抗體的檢測。2016年接受檢測的適齡兒童共312例,2017年接受檢測的適齡兒童共302例。
1.2 方法 取10ul樣本,1:100稀釋,取稀釋好的樣本100ul置入微孔板,標(biāo)準(zhǔn)品各2孔各100ul,空白孔不加樣品和酶標(biāo)記物,置溫度為37°C±1°C孵育30分鐘,使用300ul洗液沖洗3次,用凈拍干加酶標(biāo)記物50ul,空白孔除外、置溫度37°C±1°C,孵育30分鐘,用凈拍干同上洗板3次,拍干后加顯色液A、顯色液B各50 ul,置溫度為37°C±1°C避光15分鐘,每孔加入終止液50 ul,輕微震蕩微孔板以混合均勻。
單波長檢測:以空白調(diào)零,用酶標(biāo)儀讀取450nm處的A值。
雙波長檢測:用酶標(biāo)儀讀取450nm和630nm處A值,以450nm-630nm計算A值。
上述實驗所采用的實驗設(shè)備以及儀器如下:試劑盒:麻疹病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)、風(fēng)疹病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)、酶標(biāo)儀:Stat Fax○R-2100;數(shù)字移液器:10-100ul;洗板機(jī):Stat Fax○R2600。
1.3 觀察指標(biāo) 將兒童麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gG抗體的陽性率作為觀察指標(biāo)[5]。
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 在本次研究結(jié)果的處理中,均采用SPSS20.0對結(jié)果進(jìn)行處理,檢驗方法如下。計數(shù)資料檢驗方法:以卡方()值作為評價指標(biāo)進(jìn)行檢驗;計量資料檢驗方法:以t值作為評價指標(biāo)進(jìn)行檢驗;組間統(tǒng)計學(xué)差異檢驗方法:以P值作為評價指標(biāo)進(jìn)行檢驗,當(dāng)P值<0.05時,研究結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
將麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gG抗體結(jié)果通過A值進(jìn)行判定,結(jié)果顯示實驗均符合質(zhì)量控制要求,證明實驗成立,研究可行。
2016年接受檢測的適齡兒童共312例,麻疹、風(fēng)疹的IgG抗體陽性率分別為89.4%、92.67%,2017年接受檢測的適齡兒童共302例,麻疹、風(fēng)疹的IgG抗體陽性率分別為90.48%、89.91%,統(tǒng)計學(xué)處理顯示,2016年的麻疹、風(fēng)疹的陽性率各年齡組間對比差異顯著,2017年的麻疹、風(fēng)疹的IgG的陽性率各年齡組間對比差異顯著。
3 討論
一直以來,檢驗的工作都受到廣泛關(guān)注,除了通過檢驗分析了解患者病情外,還通過檢測人群抗體水平了解和掌握本地區(qū)免疫規(guī)劃疫苗接種情況,因此要注意影響檢測結(jié)果的因素。1)抽樣數(shù)量差異。本次研究中,2016年檢測適齡兒童312例,0~2歲的兒童僅88例,0~2歲年齡組的IgG抗體陽性率偏低。2017年檢測適齡兒童302例,0~2歲的兒童僅75例,0~2歲年齡組的IgG抗體陽性率約偏低。2)樣本個體差異。兒童的個體差異導(dǎo)致檢測結(jié)果存在差異的主要原因,兒童年齡不同、個體的抵抗力不同、兒童接種疫苗次數(shù)不同,所產(chǎn)生IgG抗體存在差異,進(jìn)而對IgG抗體陽性率造成影響,導(dǎo)致檢測結(jié)果存在差異。3)實驗室條件溫濕度控制。檢測環(huán)境的溫度、濕度最佳分別為20~25℃和50%~80%之間,2016年對血液的處理溫度為22.5℃,濕度為71%,2017年對血液的處理溫度為19℃,濕度為62%;試劑盒各組分從冷藏環(huán)境中取出時,應(yīng)在室溫平衡至無潮氣方可使用,嚴(yán)格遵守規(guī)定的孵育時間和溫度,如果第一孔與最后一孔加樣之間的時間間隔太長,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育”時間,從而影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。4)人員操作技術(shù)。實驗人員對檢測過程的嚴(yán)謹(jǐn)度不足,實驗人員對檢測過程的不嚴(yán)謹(jǐn)會導(dǎo)致檢測結(jié)果存在較大差異。靜脈血的采集及處理過程不嚴(yán)謹(jǐn),會導(dǎo)致溶血污染標(biāo)本導(dǎo)致檢測結(jié)果存在明顯差異。5)試劑盒和方法的選擇使用。檢測血液標(biāo)本的試劑對檢測結(jié)果亦有影響,試劑的選擇會影響血液的吸光度,如果血液處理試劑中含有的蛋白質(zhì)量較高,就會導(dǎo)致血液的吸光度過高,進(jìn)而出現(xiàn)假陽性,導(dǎo)致IgG抗體陽性率過高。6)樣品的采集和處理。靜脈血的采集及處理過程不嚴(yán)謹(jǐn),采集時間過長,血液在空氣中暴露時間過長,導(dǎo)致血液中水分揮發(fā)。采集血液標(biāo)本操作不當(dāng)導(dǎo)致溶血、污染標(biāo)本導(dǎo)致檢測結(jié)果存在明顯差異。全血標(biāo)本應(yīng)及時處理、分離血清,血清標(biāo)本應(yīng)放于2-8°C,如果樣本7天內(nèi)不測定,需將血清置-20°C保存,避免樣本的反復(fù)凍融。。
本次研究在回顧性分析的基礎(chǔ)上展開,將本市某區(qū)縣的0~15歲適齡兒童納為研究兒童,在2016年和2017年分別對該區(qū)縣的兒童進(jìn)行了麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gG抗體的檢測,研究結(jié)果顯示,檢測結(jié)果存在差異的原因主要有:抽樣數(shù)量、樣本個體差異、實驗室條件溫濕度控制、人員操作技術(shù)、試劑盒和方法的選擇使用、樣品的采集和處理、實驗操作等。因此在進(jìn)行樣本檢測的時,要嚴(yán)格做好實驗前的質(zhì)量控制,樣品的采集和處理,對抽樣數(shù)量進(jìn)行控制,做好實驗室質(zhì)量控制工作、加大實驗人員的技術(shù)培訓(xùn)、提升檢驗技術(shù)水平、加強(qiáng)實驗室條件的控制,達(dá)到實驗所需條件,盡量減少實驗誤差,同時加強(qiáng)疫苗接種的覆蓋率及及時性。
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