馮連第
摘要:蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法因其操作簡(jiǎn)單、成本較低、快速方便等優(yōu)點(diǎn),被企業(yè)、批發(fā)市場(chǎng)、農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)部門廣泛使用。闡述蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)的原理、優(yōu)缺點(diǎn)、抑制率異常情況的原因分析和應(yīng)對(duì)辦法,分析檢測(cè)過(guò)程中易出現(xiàn)的問(wèn)題,并針對(duì)這些問(wèn)題提出相應(yīng)對(duì)策,以減少誤差,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
關(guān)鍵詞:蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè);原理;影響因素;對(duì)策
中圖分類號(hào):S481.8? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? 文章編號(hào):1674-1161(2019)05-0064-02
農(nóng)藥是防治蔬菜病蟲害、提高產(chǎn)量及實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)機(jī)械化的主要手段。由于農(nóng)藥的特性、使用方式和安全間隔期,蔬菜上或多或少都存在一些農(nóng)藥殘留。當(dāng)農(nóng)藥使用過(guò)量或未達(dá)到安全間隔期就進(jìn)入銷售環(huán)節(jié),就會(huì)造成中毒事件,嚴(yán)重危害百姓的身體健康。因此,加強(qiáng)對(duì)蔬菜農(nóng)藥殘留的監(jiān)管已迫在眉睫,而蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)是對(duì)蔬菜農(nóng)藥殘留監(jiān)管的一個(gè)重要手段。
蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)是一種最為簡(jiǎn)單和普遍的生化檢測(cè)法,蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法根據(jù)乙酰膽堿酯酶被抑制的程度(抑制率)來(lái)檢測(cè)蔬菜上的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類這兩類農(nóng)藥的殘留,具有方便快捷、成本低、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),可用于半定量測(cè)定和現(xiàn)場(chǎng)定性檢測(cè),適合在蔬菜生產(chǎn)基地、大型蔬菜交易市場(chǎng)及政府檢測(cè)部門開展快速檢測(cè)工作。這種快速檢測(cè)方法可以對(duì)含有有機(jī)磷和氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥的蔬菜進(jìn)行篩選,將食用蔬菜中農(nóng)藥殘留超標(biāo)的產(chǎn)品控制在交易之前,避免流入百姓的餐桌。
1 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)的原理
目前,國(guó)內(nèi)食用蔬菜中毒主要是由有機(jī)磷和氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥引起的。這兩類農(nóng)藥會(huì)使人體中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿酯酶活性降低,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿非正常積累,導(dǎo)致急性中毒。
農(nóng)藥殘留速測(cè)法利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)動(dòng)物體內(nèi)乙酰膽堿酶具有抑制作用這一昆蟲毒理學(xué)原理,在乙酰膽堿酯酶及其底物(乙酰膽堿)的共存體系中加入農(nóng)產(chǎn)品樣品提取液(樣品中含有水)。如果樣品中不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥,酶就會(huì)正常與其他試劑發(fā)生反應(yīng),乙酰膽堿被酶水解,水解產(chǎn)物與加入的顯色劑產(chǎn)生反應(yīng)出現(xiàn)顏色變化;如果試樣提取液中含有的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標(biāo),酶的活性就會(huì)降低,試樣中加入的底物就不能被酶水解,顏色也就不會(huì)發(fā)生變化。用農(nóng)殘速測(cè)儀測(cè)定吸光度值,3 min后速測(cè)儀自動(dòng)計(jì)算出抑制率,當(dāng)抑制率小于70%時(shí)為合格,反之判定為不合格,以此判斷食用蔬菜中農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)。
2 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)
1) 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法的優(yōu)點(diǎn)是:農(nóng)殘速測(cè)儀體積小、便于攜帶,原理通俗易懂,操作簡(jiǎn)單上手快,運(yùn)行成本低廉,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需3 min左右,可作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補(bǔ)充,適用于現(xiàn)場(chǎng)定性檢測(cè),特別適合針對(duì)未進(jìn)入交易環(huán)節(jié)的生產(chǎn)基地、批發(fā)市場(chǎng)開展快速檢測(cè)工作,同時(shí)也是農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)部門對(duì)蔬菜農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)的一種快速判定方法。該方法可對(duì)含有有機(jī)磷和氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥殘留的蔬菜進(jìn)行快速粗篩,將一部分農(nóng)藥殘留超標(biāo)的蔬菜控制在流通之前,保證上市蔬菜的相對(duì)安全性,避免農(nóng)藥超標(biāo)的蔬菜流入百姓的餐桌。
2) 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法的缺點(diǎn)是:只能檢測(cè)氨基甲酸酯和有機(jī)磷這兩類農(nóng)藥,不能檢測(cè)其他類農(nóng)藥;酶試劑的活性容易降低,導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定;人員操作上不嚴(yán)謹(jǐn)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果誤差較大,重復(fù)性不好;存在檢測(cè)盲區(qū),不適合檢測(cè)蔥蒜類、香菜、韭菜、食用菌類農(nóng)產(chǎn)品,易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
3 檢測(cè)結(jié)果異常情況分析與對(duì)策
農(nóng)藥殘留速測(cè)儀檢測(cè)方法是利用分光光度計(jì)測(cè)定樣品吸光值隨時(shí)間變化而變化的情況,通過(guò)酶試劑被抑制的程度(即抑制率)來(lái)判定農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)。抑制率的正常范圍是-10%~110%,對(duì)照組樣本的吸光值在3 min后與3 min前的差值(ΔAc/ΔAs)范圍是0.4~0.8。
1) 抑制率偏小。出現(xiàn)抑制率值偏小的原因:一是由于不適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存使酶在參加反應(yīng)前就已經(jīng)失去活性。酶這種生物催化劑容易失去活性、比較脆弱,一般要在常溫、常壓、接近中性酸堿度的環(huán)境中才能發(fā)揮正常的作用。酶在恒溫箱中的最適溫度是37.5~38.5 ℃,提取液的pH值控制在8.0。粉狀的酶應(yīng)儲(chǔ)存在冷凍室內(nèi)(約-18 ℃),用時(shí)用提取劑溶解,溶解后的酶液分成若干個(gè)小瓶,暫時(shí)不用的儲(chǔ)存在冷凍室內(nèi),用時(shí)解凍;用后的酶液儲(chǔ)存在冷藏室內(nèi)(0~5 ℃),在一周內(nèi)用完。酶液反復(fù)解凍最多不能超過(guò)2次,在試驗(yàn)過(guò)程中,酶液可暫時(shí)置于室內(nèi)的冰盒上。二是操作不當(dāng)導(dǎo)致底物與酶未反應(yīng)完全。應(yīng)熟練掌握操作流程,取底物時(shí)用移液槍快速直接加到比色皿內(nèi),不要濺到比色皿壁上,加完底物后立即震蕩片刻,再放入農(nóng)殘速測(cè)儀中,否則將影響判定結(jié)果。
2) 抑制率偏大。出現(xiàn)抑制率值偏大的原因:主要是由于檢測(cè)人員操作不當(dāng),導(dǎo)致在上機(jī)比色前酶就已經(jīng)與底物發(fā)生反應(yīng)。應(yīng)熟練快速地完成樣品培養(yǎng)及上機(jī)比色,盡可能在1 min內(nèi)完成。培養(yǎng)時(shí)間要固定,不能超過(guò)30 min。認(rèn)真清洗比色皿,保持比色皿潔凈,使比色皿有較好的透光性。
4 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤判的常見原因與對(duì)策
蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法對(duì)生化反應(yīng)條件要求比較嚴(yán)格。由于在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)一些環(huán)境因素和人為因素的影響,導(dǎo)致同一批次蔬菜樣品的檢測(cè)結(jié)果不同或出現(xiàn)較大的誤差,需要采取相應(yīng)的辦法加以解決。
1) 檢測(cè)室內(nèi)要配備空調(diào)、恒溫箱等設(shè)備,以確保試劑保存在最適宜的環(huán)境中。尤其是酶試劑及底物要在特定的溫度條件下保存,保持乙酰膽堿酯酶的活性。
2) 配置藥品時(shí)要嚴(yán)格按照藥劑說(shuō)明書的比例配置。要使用蒸餾水或純凈水,不可使用礦物質(zhì)水或自來(lái)水,以免造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。
3) 速測(cè)儀分光光度計(jì)要定期進(jìn)行較準(zhǔn)調(diào)試,以確保儀器的測(cè)試準(zhǔn)確度。保持比色皿潔凈是減少判定結(jié)果出現(xiàn)誤差的一個(gè)重要因素,可在熱水浸泡后用洗滌劑清洗比色皿。
4) 不能使用同一個(gè)移液器吸取不同的試劑,要確保一個(gè)移液器配一種試劑,避免試劑發(fā)生交叉,影響判定結(jié)果。堅(jiān)持“只吸不進(jìn)”的原則,防止試劑污染。定量加液器的加液量誤差較大,建議使用量筒來(lái)稱量提取試劑。
5) 蔬菜自身的影響。蔥蒜類、香菜、韭菜、食用菌類、花椒等農(nóng)產(chǎn)品的汁液中含有的物質(zhì)會(huì)對(duì)判定結(jié)果產(chǎn)生影響,出現(xiàn)假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí),可采用整株或大塊蔬菜浸出提取液的方法。
6) 對(duì)蔬菜樣品進(jìn)行前處理時(shí),要正確使用合適的采樣工具,控制好取樣時(shí)間、取樣位置、取樣量。注意不要將樣品搗爛而使得提取液中蔬菜色素過(guò)多,以免影響分光光度計(jì)的測(cè)定結(jié)果。
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Rapid Detection Technology, Common Problems and Countermeasures
of Pesticide Residues in Vegetables
FENG Liandi
(Liaoning Agricultural Products Processing and Circulation Promotion Center, Shenyang 110001, China)
Abstract: The rapid detection of pesticide residues in vegetables is widely used by enterprises, wholesale markets and agricultural products detection departments because of its advantages of simple operation, low cost, rapid convenience and so on. This paper expounds the principle, advantages and disadvantages of rapid detection of pesticide residues in vegetables and analyzation of the causes and countermeasures of abnormal inhibition rate, analyzes the problems that are easy to occur in the detection process, and puts forward corresponding countermeasures to reduce errors and improve the accuracy of detection results.
Key words: rapid detection of pesticides residues in vegetables; principles; influencing factors; countermeasures