張春寶

（山東省威海市環(huán)翠區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展中心 264200）

1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)動(dòng)物來自威海市某種禽有限公司的羅斯308 父母代肉種雞。

1.2 試驗(yàn)材料

乳酸菌制劑（干酪乳桿菌、植物乳桿菌，總菌數(shù)≥5.0×109 CFU/g，購(gòu)自青島某生物科技有限公司）、發(fā)酵料（乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌，總菌數(shù)≥2.0×109CFU/g，購(gòu)自濰坊某公司）。

2 試驗(yàn)方法

2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，體況良好，產(chǎn)蛋均勻的220 日齡羅斯308 肉種雞180 只（要求各組雞平均體重差異不顯著（＞0.05））。隨機(jī)分為3 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。即對(duì)照組、試驗(yàn)1 組和試驗(yàn)2 組。乳酸菌制劑和發(fā)酵料均采用拌料的方式進(jìn)行飼喂，具體詳見表1。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.2 基礎(chǔ)日糧組成

試驗(yàn)以玉米和豆粕為主要原料，按照羅斯308 肉種雞所需營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制基礎(chǔ)日糧，各組試驗(yàn)日糧均以粉料的形式飼喂。

2.3 乳酸菌的飼喂

整個(gè)試驗(yàn)期保持原有飼養(yǎng)管理，免疫按試驗(yàn)場(chǎng)自定免疫程序進(jìn)行、搞好環(huán)境衛(wèi)生，其他按《肉種雞飼養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》 和《肉種雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)》 進(jìn)行。

試驗(yàn)雞采用單籠飼養(yǎng)，試驗(yàn)期間，專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)，每天光照恒定16h，自然通風(fēng)，自由采食、飲水，保持籠舍清潔衛(wèi)生。預(yù)試期7d，試驗(yàn)期42d，試驗(yàn)在威海市某種禽有限公司進(jìn)行。

3 采集樣品及指標(biāo)測(cè)試

3.1 生長(zhǎng)狀況和腸道菌群數(shù)量情況

飼養(yǎng)期間觀察雞的精神狀況、生長(zhǎng)情況、糞便情況以及大腸桿菌數(shù)量和乳酸菌數(shù)量變化情況。

在試驗(yàn)期的7、20 和40d 從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1 只雞(不停飼)，稱重后放血處死，無菌操作臺(tái)上剖開腹腔，無菌采集空腸、回腸和盲腸內(nèi)容物1g 樣品加入裝有9ml 無菌生理鹽水的試管中，在振蕩器上震蕩混勻做成1:10 的混懸液(即10-1)，然后用0.9%的生理鹽水依次稀釋至10-2、10-3……10-9、10-10，選用伊紅-美蘭鑒別培養(yǎng)基和莫匹羅星鋰鹽改良MRS 培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌和乳酸桿菌，吸取3 個(gè)臨近稀釋濃度的稀釋液0.1ml 進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)，以此來檢測(cè)大腸桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量變化情況[1-3]。

4 乳酸菌對(duì)腸道菌群數(shù)量的影響

乳酸菌對(duì)肉種雞腸道菌群的影響見表2。從表2 可以看出，在空腸中，第7 天試驗(yàn)1 組中乳酸桿菌的數(shù)量比對(duì)照組和試驗(yàn)2 組略多，差異顯著(＜0.05)，對(duì)照組和試驗(yàn)2 組相比差異不顯著(＞0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2 組均能降低大腸桿菌的數(shù)量，差異不顯著(＞0.05)。20d 在空腸中試驗(yàn)1 組比對(duì)照組和試驗(yàn)2 組乳酸桿菌的數(shù)量多，但差異不顯著(＞0.05)；試驗(yàn)1、2 組均能降低大腸桿菌數(shù)量，相比差異不顯著(＞0.05)。40d 空腸中，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1 組的乳酸桿菌數(shù)量差異顯著(＜0.05)，試驗(yàn)2 組的數(shù)量下降，但差異不顯著(＞0.05)；試驗(yàn)1、2 組均能抑制大腸桿菌的數(shù)量，減少大腸桿菌數(shù)量作用較對(duì)照組差異極明顯(P＜0.01)。

在回腸中，第7 天與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2 組中乳酸桿菌數(shù)相互差異不顯著(＞0.05)；試驗(yàn)1 組中大腸桿菌數(shù)量差異不顯著(＞0.05)，試驗(yàn)2 組差異顯著(＜0.05)。第20 和40 天時(shí)，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1 組能顯著提高肉種雞回腸乳酸桿菌數(shù)量，差異顯著(＜0.05)，試驗(yàn)2 組差異不顯著(＞0.05)。在20 和40d 時(shí)與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2 組均能顯著(＜0.05) 和極顯著(＜0.01) 的減少大腸桿菌數(shù)量。

表2 乳酸菌對(duì)腸道中乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量的影響（LgN cfu/g）

在盲腸中，第7 天和對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2 組中乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量相互差異不顯著(＞0.05)。第20 天與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2 組中乳酸桿菌數(shù)量差異不顯著(＞0.05)，降低大腸桿菌的數(shù)量上差異顯著(＜0.05)。第40 天和對(duì)照組相比，試驗(yàn)1 組中能顯著提高乳酸桿菌的數(shù)量(＜0.05)，試驗(yàn)2 組中對(duì)乳酸桿菌數(shù)量的提高呈負(fù)相關(guān)。試驗(yàn)1、2 組均能顯著（＜0.05）減少大腸桿菌數(shù)量。

5 結(jié)論及分析

由以上結(jié)果表明，乳酸菌制劑能很好地在腸道內(nèi)定植，抑制大腸桿菌等致病菌的生長(zhǎng)繁殖，具有一定的代替抗生素添加劑的作用。另外，乳酸菌制劑和發(fā)酵料均能提高肉種雞腸道中乳酸桿菌的數(shù)量，并且從腸道前段到腸道后段(即空腸-回腸-盲腸) 有遞增趨勢(shì)；在20 和40d 對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)作用明顯優(yōu)于第7 天。乳酸菌制劑在腸道內(nèi)定植抑制有害菌生長(zhǎng)效果比發(fā)酵料效果明顯。由此得出，乳酸菌制劑可以很好地促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)繁殖，抑制大腸桿菌等有害菌生長(zhǎng)。