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        硫酸頭孢喹肟佐劑在禽流感免疫效果試驗(yàn)

        2019-11-05 01:43:46熊波謝先林高青松陳鳳蘭呂慶華陳金芝
        中國畜禽種業(yè) 2019年10期
        關(guān)鍵詞:致病性頭孢禽流感

        熊波 謝先林 高青松 陳鳳蘭 呂慶華 陳金芝

        (1,湖北省荊門市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 448000;2,湖北省荊門市畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心 448000)

        禽流感是禽流行性感冒的簡稱,分為高致性、低致病性和非致病性3 大類,其中高致病性禽流感是由H5和H7亞毒株(以H5N1、H5N6和H7N9為代表)引起的。高致病性禽流感因其在禽類中傳播快、危害大、病死率高,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A 類動(dòng)物疫病,我國將其列為一類動(dòng)物疫病。家禽高致病性禽流感采用疫苗接種是最好的預(yù)防辦法,疫苗主要分為弱毒活疫苗、滅活油乳劑疫苗、基因工程疫苗3 類。從實(shí)際效果、安全性能和經(jīng)濟(jì)實(shí)用性等方面綜合考慮,主要以滅活油乳劑疫苗為主,然而此類疫苗的免疫注射家禽應(yīng)激反應(yīng)大,特別是對(duì)蛋雞的產(chǎn)蛋率影響比較大。本課題探索在實(shí)踐中改變傳統(tǒng)的疫苗免疫注射方法,在疫苗中添加硫酸頭孢喹肟佐劑,減少注射應(yīng)激反應(yīng),提升疫苗免疫效果展開試驗(yàn)和研究。

        1 試驗(yàn)情況

        長期以來,禽流感主要以H5N1免疫為主,隨著H7N9禽流感防控形勢日益嚴(yán)峻,禽流感疫苗在2017 年由原來的H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6-7-8 株)變?yōu)镠5+H7的雙聯(lián)苗。本課題于2018 年4 月至12 月,開展了疫苗中添加硫酸頭孢喹肟佐劑在禽流感免疫效果的研究。

        1.1 試驗(yàn)蛋雞場情況

        蛋雞場位于沙洋縣拾橋鎮(zhèn)東風(fēng)村8 組,遠(yuǎn)離人群密集區(qū),自然防疫條件好,地理位置優(yōu)越。該場為荊門市神羽禽業(yè)有限公司合作社的一個(gè)代養(yǎng)場,該養(yǎng)殖場為新場,沒有發(fā)生過重大動(dòng)物疫病,飼養(yǎng)能力為11000 只蛋雞,符合實(shí)驗(yàn)室所需樣品數(shù)量要求。

        附表 抗體檢測結(jié)果

        1.2 試驗(yàn)疫苗和獸藥

        禽流感二價(jià)滅活疫苗(H5+H7),吉林冠界生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào):201802012;硫酸頭孢喹肟注射液由四川恒通動(dòng)物制藥有限公司生產(chǎn),規(guī)格10ml:0.25g;包裝:10ml×2 瓶;生產(chǎn)批號(hào):20171203。

        1.3 試驗(yàn)方法

        1.3.1 試驗(yàn)動(dòng)物

        本試驗(yàn)選擇生產(chǎn)周期長的蛋雞作為研究對(duì)象,首次選擇1200 只16 日齡的蛋雞進(jìn)行免疫試驗(yàn),用同批次的1200 只蛋雞作為對(duì)照組。75 日齡進(jìn)行第二次免疫試驗(yàn),在開產(chǎn)前105 日齡進(jìn)行第三次免疫試驗(yàn)。

        1.3.2 免疫方法

        將10ml 0.25g 規(guī)格的硫酸頭孢喹肟注射液作為佐劑,按10ml 添加到每瓶500 頭份H5+H7禽流感疫苗中,充分混勻后對(duì)試驗(yàn)的1200 只蛋雞進(jìn)行免疫注射,注射部位為頸部皮下,每只注射0.3ml。對(duì)比組的蛋雞也同樣進(jìn)行免疫注射,但疫苗中不添加硫酸頭孢喹肟佐劑。第二次、第三次免疫試驗(yàn)方法同第一次免疫試驗(yàn),只是注射劑量都變?yōu)?.5ml。(疫苗操作說明規(guī)定2 周齡每只注射0.3ml,5 周齡以上雞每只0.5ml。)

        免疫后,觀察試驗(yàn)動(dòng)物有無副反應(yīng),采食量變化、發(fā)病和死淘、對(duì)產(chǎn)蛋的影響等情況,做好相關(guān)記錄。

        2 高致病性禽流感(H5+H7)滅活苗疫苗抗體檢測情況

        2.1 采血

        一次性采血器前腔靜脈采血,每份不少于2ml。采血后,將采血器活塞外拉預(yù)留血清析出空間,并塞上護(hù)針帽,去除推桿,在采血器上標(biāo)明樣品編號(hào)。在實(shí)驗(yàn)室中,靜置2h 后離心機(jī)3500G 離心6min,分離血清。

        采血試驗(yàn)蛋雞數(shù)量和對(duì)照組蛋雞數(shù)量各定為160 只。分別于37 日齡(一免后21d)、96 日齡(二免后21d)、126 日齡(三免后21d),各采血1 次,分離血清做禽流感免疫抗體檢測試驗(yàn)。

        2.2 抗體檢測方法

        按照國標(biāo) 《高致病性禽流感診斷技術(shù)》 (GB/T18936-2003)中血凝和血凝抑制試驗(yàn)(HA-HI)進(jìn)行,具體操作步驟參照試劑盒說明書。

        2.3 抗體檢測結(jié)果

        見附表。

        3 免疫抗體效果分析

        本試驗(yàn)均在免疫注射后21d 進(jìn)行抗體監(jiān)測。第一次免疫試驗(yàn)組抗體合格率為0.78,對(duì)照組抗體合格率為0.73;第二次免疫試驗(yàn)組抗體合格率為0.96,對(duì)照組抗體合格率為0.95;第三次免疫試驗(yàn)組抗體合格率為0.98,對(duì)照組抗體合格率為0.96,3 次免疫試驗(yàn)中試驗(yàn)組和對(duì)照組抗體平均合格率差異不顯著(>0.05)。

        4 試驗(yàn)期間副反應(yīng)發(fā)病死亡情況

        本試驗(yàn)第一次試驗(yàn)組1200 只蛋雞免疫后沒有應(yīng)激死亡,對(duì)照組無死亡;第二次試驗(yàn)組1200 只蛋雞免疫后沒有應(yīng)激死亡,對(duì)照組死亡4 只;第三次試驗(yàn)組1200 只蛋雞免疫后應(yīng)激死亡2 只,對(duì)照組死亡8 只。3 次試驗(yàn)中試驗(yàn)組共死亡2 只,對(duì)照組死亡12 只。通過對(duì)比觀察,3 次免疫注射后,試驗(yàn)組和對(duì)照組均出現(xiàn)采食量下降,但試驗(yàn)組3d 恢復(fù)到平時(shí)采食量,而對(duì)照組7d 恢復(fù)正常采食。添加抗生素的試驗(yàn)組達(dá)到90%的產(chǎn)蛋高峰比對(duì)照組提前了15d。

        5 結(jié)論

        (1)提高蛋雞機(jī)體抗應(yīng)激能力。通過試驗(yàn)對(duì)比,疫苗中添加抗生素的蛋雞機(jī)體抗應(yīng)激能力增強(qiáng),死亡率下降0.83%,采食量恢復(fù)較快,產(chǎn)蛋高峰期提前,蛋雞生產(chǎn)性能得到提升。

        (2)通過試驗(yàn)結(jié)果顯示,添加抗生素對(duì)抗體水平無顯著影響。但通過第二、三次強(qiáng)化免疫后,家禽能產(chǎn)生更高和持續(xù)時(shí)間更久的免疫保護(hù)效果。

        (3)禽流感疫苗由強(qiáng)毒禽流感病毒制成的滅活油乳劑疫苗,硫酸頭孢喹肟注射液也為油乳劑,只對(duì)細(xì)菌有消滅作用,對(duì)病毒性病原不產(chǎn)生影響;硫酸頭孢喹肟注射液為中性酸堿度,對(duì)疫苗的pH 不產(chǎn)生影響,所以兩者結(jié)合使用不存在排異性。3 次試驗(yàn)中抗體水平試驗(yàn)組和對(duì)照組沒有明顯區(qū)別,通過試驗(yàn)得到驗(yàn)證。

        高致病性禽流感疫苗免疫在國內(nèi)已推廣應(yīng)用多年,但疫苗免疫副反應(yīng)和免疫效果還需要進(jìn)一步探索和解決,這也是湖北省乃至全國禽類養(yǎng)殖業(yè)的重點(diǎn)研究方向。一般情況,疫苗在生產(chǎn)和使用過程中容易產(chǎn)生雜菌,在對(duì)雞群進(jìn)行免疫注射后,如果有雜菌隨疫苗進(jìn)入,增加雞群產(chǎn)生副反應(yīng)和患病的風(fēng)險(xiǎn),將硫酸頭孢喹肟一起免疫注射可將進(jìn)入家禽注射部位傷口和部分體內(nèi)的細(xì)菌消滅,減少機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)。本項(xiàng)目利用試驗(yàn)制定出科學(xué)合理的免疫程序,探索出減少機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)、繼發(fā)感染和提高蛋雞生產(chǎn)性能的有效方法,本項(xiàng)目的實(shí)施將會(huì)顯著提升蛋雞養(yǎng)殖場經(jīng)濟(jì)效益,示范推廣前景廣闊。

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