李成偉

敗血癥是鯉魚最常見的疾病之一，常引起鯉魚大規(guī)模死亡造成嚴重經(jīng)濟損失。2019年7月，四川眉山洪雅某養(yǎng)殖場養(yǎng)殖鯉魚成魚發(fā)生急性敗血癥，發(fā)病初期鯉魚攝食明顯減少，無明顯外觀癥狀；3天后攝食進一步減少，部分魚停食，且出現(xiàn)個別魚游邊，反應(yīng)遲鈍，打撈起后發(fā)現(xiàn)體表褪色，鰭條基部、腹部充血、出血，泄殖孔紅腫、外凸（圖1），鰓絲發(fā)白；剖解后有血樣腹水，肝胰臟、脾臟、腎臟淤血、出血、質(zhì)地變脆，膽囊腫大，腸壁及腸系膜充出血嚴重，腸內(nèi)黏液增多（圖2），魚類開始出現(xiàn)個別死亡，隨著時間推移死亡數(shù)量上升，7天后死亡數(shù)量達到80～100尾/天（5畝大小池塘），采集患病典型鯉魚進行實驗室相關(guān)診斷。

1 寄生蟲檢測

通過采集血液制作血涂片，鰓絲、體表黏液、腸道黏液水浸片顯微鏡檢測，均未發(fā)現(xiàn)寄生蟲。

2 病原細菌的分離鑒定

無菌環(huán)境接種病魚的腹水、肝胰臟、腎臟、脾臟，劃線到BHI平板，28℃培養(yǎng)24小時，分離、純化后得到一株細菌（編號CW1908），其菌落形態(tài)為淡黃色、圓形凸起、半透明，革蘭氏染色后為陰性、無芽孢的短桿菌。按照細菌基因組DNA提取試劑盒提取DNA作為PCR模板，采用16S rRNA細菌通用引物進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物純化后送生工生物工程（上海）有限公司進行序列測定。將分離菌株的16S rRNA基因序列于GenBank中已知核酸序列進行比對分析，結(jié)果顯示菌株CW1908與嗜水氣單胞菌同源性高達99%，初步判斷為嗜水氣單胞菌。

3 藥物敏感性實驗及治療

采用藥敏紙片法對分離菌株進行藥敏實驗，結(jié)果表明：菌株CW1908對氟苯尼考、氟哌酸、丁胺卡那霉素敏感；對強力霉素、慶大霉素、多粘菌素B介于敏感和耐藥之間；對氨芐西林、青霉素、鏈霉素、新霉素、阿奇霉素、克拉霉素、多西四環(huán)素、恩諾沙星、諾氟沙星、氧氟沙星耐藥。

根據(jù)藥敏實驗結(jié)果，選取水產(chǎn)常用藥物氟苯尼考粉20mg/kg，加上Vk粉20mg/kg進行拌料投喂，每天一次，連用7天，用藥4天后鯉魚死亡數(shù)量明顯減少，7天后停止死亡，該病得到有效控制。

4 討論

嗜水氣單胞菌是水產(chǎn)典型的條件性致病菌，當水質(zhì)惡化，魚類免疫力下降，水溫22～28℃時，在水體中一直存在的病原菌容易感染魚類，大量繁殖，相互傳染。在此次病例中，發(fā)病池塘的NH4+為1.2mg/L，NO2-為0.4mg/L，均嚴重超標，主要原因是該塘在上一輪養(yǎng)殖結(jié)束后未進行清塘就直接投放的鯉魚種魚，底質(zhì)積累的糞便和飼料殘渣過多，分解產(chǎn)生大量氨氮，魚類在長期氨氮超標的水體中免疫力下降，引起感染，而該養(yǎng)殖場其他三個塘的水質(zhì)NH4+＜0.5mg/L，則未發(fā)病。對于此次鯉魚發(fā)病池塘，病情得到控制后，應(yīng)進一步進行水體消毒、底質(zhì)改良，使用EM菌微生態(tài)制劑培養(yǎng)池塘優(yōu)勢菌群，抑制病原菌生長，防止疾病復(fù)發(fā)。

圖1 患病鯉魚體表褪色，鰭條基部、腹部充出血，泄殖孔紅腫外凸

圖2 肝胰臟、腸道、腎臟淤血、出血，腸道內(nèi)分泌物增多