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        宮頸癌組織EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)及意義

        2019-10-22 07:04:58林敏秀曹珊珊張隆英陳崇陽阮正英
        浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志 2019年10期
        關(guān)鍵詞:水平

        林敏秀 張 琴 曹珊珊 張隆英 陳崇陽 阮正英

        宮頸癌是預(yù)后較差的一種常見惡性腫瘤,5 年生存率較低[1]。宮頸癌缺乏明確的標(biāo)志物來判定其不良預(yù)后,成為目前研究的熱點(diǎn)之一。紅細(xì)胞膜蛋白配體4.1 樣3(EPB41L3)是4.1 蛋白家族中一個新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的功能[2-3]。骨膜蛋白為細(xì)胞外基質(zhì)蛋白,與多種腫瘤的血管生成、細(xì)胞的惡性分化和不良預(yù)后相關(guān)[4-5]。EPB41L3 及骨膜蛋白是否參與宮頸癌的發(fā)病機(jī)制至今尚未清楚。本研究檢測宮頸癌組織EPB41L3 及骨膜蛋白表達(dá)水平,探討EPB41L3 和骨膜蛋白在宮頸癌發(fā)病機(jī)制中的作用,報道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2013 年5 月—2018 年3 月期間在浙江省臺州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院(23 例)和浙江省臺州市中心醫(yī)院(47 例)手術(shù)切除的宮頸癌組織標(biāo)本70 份為宮頸癌組,術(shù)后通過病理均確診為宮頸癌[6]。其中伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31 例,不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39 例。選擇取同期慢性宮頸炎活檢組織(臺州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院和臺州市中心醫(yī)院各25 份)50 份為慢性宮頸炎組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過,并取得患者知情同意。

        1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合宮頸癌診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)術(shù)前未接受放療或化療;(3)均行宮頸癌切除術(shù)+盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù);(4)有完整的病理資料。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)患有急性婦科炎癥或其他急性疾病;(2)1 個月內(nèi)使用過免疫抑制劑。

        1.3 主要試劑及方法 EPB41L3 和骨膜蛋白多克隆IgG 抗體均購自英國biorbyt 公司(批號A5790、E11788)。SP 免疫組化法測定EPB41L3 和骨膜蛋白的表達(dá)(抗體工作濃度為1:100)。結(jié)果判定:光鏡下觀察細(xì)胞著色情況,陽性細(xì)胞的胞漿呈棕黃色表達(dá),陽性率=陽性例數(shù)/總例數(shù),陽性強(qiáng)度參考文獻(xiàn)[7]得出光密度(OD)值。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,兩組間比較采用成組資料t 檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組一般資料比較 宮頸癌組患者年齡24~73歲,平均(46.50±13.16)歲。慢性宮頸炎組患者年齡23~67 歲,平均(43.60±10.11)歲。兩組間年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        2.2 兩組EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)水平比較 宮頸癌組EPB41L3 陽性率和表達(dá)強(qiáng)度均顯著低于慢性宮頸炎組(P<0.05 或P<0.01),骨膜蛋白陽性率和表達(dá)強(qiáng)度均顯著高于慢性宮頸炎組(P 均<0.01),見表1、插頁圖1-2。

        圖1 免疫組化法檢測宮項(xiàng)組織EPB41L3 的表達(dá)(DAB 染色,200 倍)

        圖2 免疫組化法檢測宮項(xiàng)組織骨膜蛋白的表達(dá)(DAB 染色,200 倍)

        表1 慢性宮頸炎和宮頸癌患者EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)水平比較(±s)

        表1 慢性宮頸炎和宮頸癌患者EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)水平比較(±s)

        注:EPB41L3:紅細(xì)胞膜蛋白配體4.1 樣3;OD:光密度

        表2 宮頸癌伴或不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)水平比較(±s)

        表2 宮頸癌伴或不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)水平比較(±s)

        注:EPB41L3:紅細(xì)胞膜蛋白配體4.1 樣3;OD:光密度

        2.3 宮頸癌組織EPB41L3 和骨膜蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組患者骨膜蛋白陽性率和表達(dá)強(qiáng)度均高于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P 均<0.05),EPB41L3 陽性率和表達(dá)強(qiáng)度在伴有與不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表2。

        3 討論

        EPB41 相關(guān)基因由四類基因組成,包括EPB41、EPB41L1、EPB41L2 和EPB41L3,在C-末端具有高度同源的特性,共同編碼一組細(xì)胞支架蛋白質(zhì)類(依次編碼4.1R、4.1N、4.1G 和4.1B)[8]。EPB41L3 定位于人染色體18p11.3 區(qū)域,編碼與細(xì)胞膜相關(guān)的4.1 蛋白家族,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長的功能[2]。研究發(fā)現(xiàn),EPB41L3 在癌組織表達(dá)下調(diào)或缺失,可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),被認(rèn)為是一種抑癌基因[9-10]。

        本研究發(fā)現(xiàn),在宮頸癌及慢性宮頸炎組織均有EPB41L3 呈陽性表達(dá)的細(xì)胞,提示EPB41L3 均可表達(dá)于宮頸癌和慢性宮頸炎細(xì)胞。宮頸癌組織EPB41L3 的陽性表達(dá)率,還是其表達(dá)強(qiáng)度,均低于慢性宮頸炎組,提示在宮頸癌組織EPB41L3 表達(dá)下調(diào),筆者推測可能由于EPB41L3 表達(dá)下調(diào),其抑癌功能被減弱,從而誘發(fā)宮頸組織癌變。探討EPB41L3與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性發(fā)現(xiàn),EPB41L3 表達(dá)水平在伴有與不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間無差別,提示EPB41L3 表達(dá)水平可能與宮頸癌的腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。這與其他學(xué)者的報道不相同,其原因可能與不同組織的腫瘤有關(guān)[11],腫瘤組織不同EPB41L3 表達(dá)也不盡相同;此外,還可能與腫瘤的標(biāo)本來源有關(guān),本研究使用宮頸癌組織標(biāo)本,而其它大多的研究使用細(xì)胞株并采用甲基化修飾方法來研究細(xì)胞的侵襲[12-13]。

        骨膜蛋白為一種分泌型細(xì)胞粘附蛋白,屬于成束蛋白家族成員之一,在促進(jìn)細(xì)胞生長、細(xì)胞存活、上皮-間質(zhì)的轉(zhuǎn)變、侵入、腫瘤血管發(fā)生及轉(zhuǎn)移方面起著重要的作用,涉及腫瘤組織的發(fā)生及發(fā)展[14-15]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),宮頸癌組織骨膜蛋白表達(dá)水平高于慢性宮頸炎組織,表明過度表達(dá)的骨膜蛋白可能與宮頸癌組織的惡性分化相關(guān);骨膜蛋白表達(dá)水平還與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),它在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組織表達(dá)水平高于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織,提示骨膜蛋白可能是宮頸癌預(yù)后不良的標(biāo)志物。高表達(dá)的骨膜蛋白也見于子宮內(nèi)膜癌組織,支持過表達(dá)的骨膜蛋白可能促進(jìn)子宮組織的癌變[16]。

        綜上所述,宮頸癌組織EPB41L3 表達(dá)下調(diào),骨膜蛋白表達(dá)增強(qiáng),可能與宮頸癌的惡性分化相關(guān),共同起到促進(jìn)組織癌變的作用,有望成為一種治療腫瘤的新靶點(diǎn)。

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