付寶慧

摘 要：目的：利用課堂教材上的經(jīng)典提取方法-pH梯度萃取法，提取中藥大黃中的游離蒽醌組分（大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚），并計(jì)算其含量，考察課堂教學(xué)實(shí)驗(yàn)中提取大黃游離蒽醌中各組分總含量是否符合中國(guó)藥典規(guī)定。方法：利用pH梯度萃取法提取并計(jì)算各組分含量。結(jié)果：大黃酸0.018%、大黃素0.48%、蘆薈大黃素0.38%、大黃酚0.76%、大黃素甲醚0.38%，結(jié)論：大黃游離蒽醌組分的總含量為2.02%，符合中國(guó)藥典不低于1.5%的規(guī)定。

關(guān)鍵詞：大黃;pH梯度萃取法;游離蒽醌;大黃酸;大黃素

大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.、唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。具有瀉下攻積，清熱瀉火，涼血解毒，逐淤通經(jīng)，利濕退黃等功效。大黃中含有多種游離羥基蒽醌組分及其苷類成分，已知的游離羥基蒽醌主要有大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚。pH梯度萃取法是提取中藥大黃中游離蒽醌的經(jīng)典方法，也是學(xué)校實(shí)驗(yàn)室中常用方法，其原理是改變?nèi)軇┫到y(tǒng)pH，進(jìn)而改變組分的存在狀態(tài)，也就是改變了組分在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)。根據(jù)蒽醌中各組分酸性的大小，使用不同pH值的堿液依次從有機(jī)溶劑中萃取出蒽醌類組分，再分別酸化堿液，蒽醌類成分即可析出沉淀。本實(shí)驗(yàn)旨在考察課堂實(shí)驗(yàn)中的中藥大黃提取產(chǎn)物中的游離蒽醌總量是否符合中國(guó)藥典的規(guī)定。本次實(shí)驗(yàn)由本校三年制中專學(xué)生來(lái)完成，中專學(xué)生有如下特點(diǎn)：知識(shí)基礎(chǔ)相對(duì)薄弱，掌握的知識(shí)點(diǎn)不牢固;思維敏捷，動(dòng)手能力強(qiáng)，愿意完成實(shí)驗(yàn)類項(xiàng)目的“挑戰(zhàn)”;愿意接受新事物、新現(xiàn)象，尋求創(chuàng)新。

1 實(shí)驗(yàn)儀器

水浴鍋、抽濾瓶、布氏漏斗、真空泵、燒杯、玻璃棒、三角瓶、試管、pH試紙、毛細(xì)管、色譜柱。

2 實(shí)驗(yàn)材料

大黃粗粉、20%硫酸水溶液、氯仿、5%氫氧化鈉溶液、濃鹽酸、pH為8的緩沖溶液（自制）、pH9.9的緩沖溶液（自制）、5%碳酸鈉-5%氫氧化鈉（9：1）緩沖溶液（自制）、5%氫氧化鈉溶液（自制）、蒸餾水（校實(shí)訓(xùn)車間提供）。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 緩沖液的配制

（1）pH8緩沖溶液的配制。精密稱取Na2HPO4·12H2O（0.2 mol/L）35.3200 g，加入到500 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液①。精密稱取枸櫞酸·1 H2O（0.1 mol/L）10.5050 g，加入到500 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液②。精密量取溶液①389 ml，精密量取溶液②11 ml，混勻即得到pH8緩沖溶液。

（2）pH9.9緩沖溶液的配制。稱取Na2CO3 2.12 g，加入到200 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液①。稱取NaHCO3 1.68 g，加入到200 ml蒸餾水中，使之溶解，得到溶液②。溶液①和溶液②直接混合，即得到pH99緩沖溶液。

3.2 提取工藝流程圖

pH梯度萃取法提取中藥大黃中的游離蒽醌組分流程圖

3.3 大黃酚和大黃素甲醚的柱層析分離

5 討論

從表2中可以看出，實(shí)驗(yàn)課堂中的3個(gè)小組在大黃酸、大黃素提取上的平行性不好，有可能是因?yàn)檩腿r(shí)乳化層混入，而在蘆薈大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的提取上差異較小，組2中的大黃酸未提取成功，可能是因?yàn)樵谧龅谝徊捷腿〉倪^(guò)程中，緩沖液配制未完全溶解，致使大黃酸提取的量為痕量。大黃游離蒽醌中的大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚五個(gè)組分的總量為2.02%，符合中國(guó)藥典中不低于1.50%的規(guī)定。下次帶其他班級(jí)再做大黃游離蒽醌組分分離的時(shí)候，要注意以下幾點(diǎn)：其一，要充分考慮到如何在萃取時(shí)消除乳化層;其二，緩沖液的配制要現(xiàn)用現(xiàn)配，防止有沉淀析出，有沉淀析出后會(huì)導(dǎo)致緩沖液的pH值不準(zhǔn)確，給后續(xù)實(shí)驗(yàn)帶來(lái)影響。