陳玉秀

[摘? ? ? ? ? ?要]? 通過對近兩年參加全國職業(yè)院校中藥傳統(tǒng)技能大賽選手中藥顯微鑒別項目的培訓(xùn)，對培訓(xùn)過程中遇到的問題進(jìn)行總結(jié)和反思，圍繞中藥粉末和選手培訓(xùn)兩方面，從粉末的準(zhǔn)備過程、選手不同培訓(xùn)階段應(yīng)注意的事項等方面進(jìn)行了分析總結(jié)，以期為職業(yè)院校日常的中藥顯微鑒別教學(xué)和相關(guān)的參賽院校提供一定的參考和借鑒作用。

[關(guān)? ? 鍵? ?詞]? 技能大賽;中藥;顯微鑒別

[中圖分類號]? R282? ? ? ? ? ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號]? 2096-0603（2019）11-0192-02

全國職業(yè)院校中藥傳統(tǒng)技能大賽自2012年起至今已舉辦了6屆，這項大賽主要由中藥性狀鑒別、中藥真?zhèn)舞b別、中藥調(diào)劑（含審方）、中藥炮制四個賽項組成，分值比例分別占總分值的20%，20%，30%，30%，屬于個人賽。自2017年起，性狀鑒別和真?zhèn)舞b別合并為一項，占總分值的20%，同時新增了中藥顯微鑒別賽項，占總分值的20%。顯微鑒別是利用顯微鏡對藥材（飲片）切片、粉末、解離組織或表面制片及含飲片粉末的制劑中飲片的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行微觀分析，以確定品種和質(zhì)量的一種方法[1]。顯微鑒別作為一項比較成熟的現(xiàn)代分析枝術(shù)，在中藥真?zhèn)舞b別中顯示了強(qiáng)大的生命力[2]。2015版《中國藥典》中應(yīng)用顯微鑒別方法的中藥材和中成藥特別多。新增的顯微鑒別賽項規(guī)程要求參賽選手在45分鐘內(nèi)能正確使用生物顯微鏡，按要求正確的將混合粉末制成裝片觀察，根據(jù)觀察結(jié)果繪出顯微特征圖，并對顯微特征進(jìn)行正確描述，最后分析判斷中藥混合藥粉的組成。這一賽項操作符合目前中藥檢驗崗位顯微常規(guī)操作過程和方法。因此，大賽顯微鑒別賽項的增加也是考慮到了這項技術(shù)在生產(chǎn)實踐中的應(yīng)用，突出了對參賽選手綜合實踐能力的考核，既體現(xiàn)了中藥技能的傳承與發(fā)展理念，也符合現(xiàn)代醫(yī)藥行業(yè)對中藥類專業(yè)人才崗位技能的要求。這一賽項的增加同時也對參賽選手提出了更高的要求，選手也將面臨更大挑戰(zhàn)。筆者這兩年主要負(fù)責(zé)對我院參賽選手中藥顯微鑒別賽項的培訓(xùn)，現(xiàn)對培訓(xùn)過程中遇到的問題進(jìn)行總結(jié)和反思，主要從注意事項和培訓(xùn)方法上對中藥粉末、選手培訓(xùn)兩方面進(jìn)行闡述，希望通過技能大賽培訓(xùn)的總結(jié)與反思，能夠?qū)︶t(yī)藥高職院校中藥鑒定技術(shù)這門課程的日常顯微教學(xué)提供一定的參考或借鑒作用。

一、關(guān)于中藥粉末

（一）確保中藥材基源的準(zhǔn)確

要保證顯微鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性，首先要保證原藥材基源的正確性?，F(xiàn)在中藥市場上出現(xiàn)了很多與正品相似的混淆品或偽品，如水半夏冒充半夏、歐當(dāng)歸充當(dāng)歸、大黃中混有土大黃等，由于這些藥外形相似，不易分辨，很容易在商品交易市場中把混淆品當(dāng)成正品或混在正品中出售，如果把這類藥材做培訓(xùn)材料，將產(chǎn)生誤導(dǎo)作用。例如，正品當(dāng)歸在顯微中會看到韌皮薄壁細(xì)胞、導(dǎo)管和油室、木栓細(xì)胞、淀粉粒以及偶可見的木纖維，而偽品歐當(dāng)歸粉末中除了有上述特征外，還可見草酸鈣方晶[3]。偽品的這一特征會增加判斷的難度。另外還需注意區(qū)分栽培藥材和野生藥材，由于生長環(huán)境和生長年限不同，往往導(dǎo)致藥材顯微特征發(fā)生改變。例如，金銀花粉末中的鑒別特征之一是花粉粒具有3孔溝，但是采用多倍體育種技術(shù)培育出的四倍體金銀花新品種—九豐一號，其花粉粒具有4個萌發(fā)孔[2]。

（二）保證中藥材粉碎前的純度

在中藥材打粉之前，必須要進(jìn)行凈選，以保證中藥材純度。中藥材在采收過程中，不可避免地會帶入一些雜質(zhì)，比如果實類的補(bǔ)骨脂中往往易混入果梗，需要挑出此類非藥用部位;又如牡丹皮用的是根皮，但現(xiàn)在市場上的牡丹皮往往帶有大量的木心（木質(zhì)部），如果不除去此類非藥用部位，可能就會在顯微鏡下觀察到不屬于牡丹皮顯微特征的導(dǎo)管而引起誤判。

（三）保證正確的中藥打粉方法

按2015版《中國藥典》四部通則2001顯微鑒別法規(guī)定，用于顯微鑒別的中藥粉末須過四號篩（篩孔內(nèi)徑250μm±9.9μm）或五號篩（篩孔內(nèi)徑180μm±7.6μm）[1]。因此，為了盡量保證中藥粉末顯微特征的完整性和觀察適宜性，在選擇利用臺式高速粉碎機(jī)打粉時要注意粉碎時間和強(qiáng)度的把握以及篩號的選擇。通常質(zhì)地輕的花葉類和干燥的果實種子類藥材打粉時間宜設(shè)定的短些;而質(zhì)地堅硬的根類和纖維性多的藥材，打粉設(shè)定時間宜稍長些。如番瀉葉和金銀花粉末的一個突出顯微特征是單細(xì)胞的非腺毛，如果把粉碎時間設(shè)定稍長，粉末會被打得很細(xì)，將長達(dá)90～350μm的非腺毛打碎，實際觀察時很難發(fā)現(xiàn)完整的非腺毛，這對結(jié)果的順利判斷顯然不利，所以設(shè)定時間宜短，且需要及時傾倒出來過四號篩，而當(dāng)歸、五味子含油脂豐富的藥材不易打碎成均勻的粉末，宜多次設(shè)定打粉時間并反復(fù)過篩，直至全部粉碎成規(guī)定的細(xì)度。

（四）確保打粉機(jī)的干凈

中藥打粉除了以上注意事項外，還要注意每打完一味藥后，打粉機(jī)必須清洗干凈，包括螺絲夾縫中都要用不繡鋼針剔除干凈，如果不注意這些細(xì)節(jié)，很可能上一味殘留的藥粉就混串到了下一味藥粉中從而影響實際觀察和判斷。另外，打好的中藥粉末裝在瓶子里，不僅要在瓶身上貼好藥名標(biāo)簽，而且連瓶蓋上也要貼上藥名標(biāo)簽才行。因為這樣做可以防止在開蓋取粉制片后發(fā)生“張冠李戴”的情況，有效避免藥粉互混的風(fēng)險。

二、關(guān)于選手培訓(xùn)

（一）培訓(xùn)初期

在培訓(xùn)初期，指導(dǎo)老師先要按照國家技能競賽顯微賽項的規(guī)程將30味中藥粉末的顯微資料編輯成冊發(fā)給選手，讓選手提前熟悉并背誦相應(yīng)的內(nèi)容。對選手進(jìn)行必要理論知識的講解、示教并指導(dǎo)顯微鏡的操作方法、粉末臨時裝片的制作方法（包括水裝片、水合氯醛加熱透化片和水合氯醛不加熱片），之后對30味競賽范圍內(nèi)的中藥粉末進(jìn)行逐一的顯微觀察，指導(dǎo)參賽選手尋找并認(rèn)識顯微鏡下每味藥的顯微特征。培訓(xùn)初期，一定要對選手進(jìn)行嚴(yán)格要求，按規(guī)范的程序進(jìn)行操作，不能觸碰任何賽項規(guī)程上的扣分點，比如顯微鏡低倍鏡和高倍鏡的正確使用和切換、制作水合氯醛透化片時注意不要烤焦燒糊、顯微鏡下尋找目標(biāo)物時以“之”字走向進(jìn)行玻片的移動觀察、顯微觀察結(jié)束后要及時清場、整理桌面等，以此培養(yǎng)選手良好的習(xí)慣，養(yǎng)成按賽項規(guī)程進(jìn)行操作的好習(xí)慣。最后，在制作每味藥的顯微裝片之前，要讓選手多觀其顏色、聞其氣味，加深對每味中藥的熟悉與理解程度。這一階段是選手最困難也是指導(dǎo)老師最辛苦的階段，需要多花時間和精力進(jìn)行培訓(xùn)指導(dǎo)。

（二）培訓(xùn)中期

在經(jīng)過初期的培訓(xùn)學(xué)習(xí)后，選手對每味藥的顯微特征和顯微鏡下各味藥的組織、細(xì)胞及內(nèi)含物已經(jīng)有了一定的認(rèn)識，因此培訓(xùn)中期可以模擬競賽時的兩兩混合粉末來進(jìn)行觀察并在模擬試卷上作答，指導(dǎo)老師認(rèn)真評閱試卷，對學(xué)生的顯微描述和繪圖給予評價與指導(dǎo)。這一階段對不同中藥粉末中所具有的相同的組織特征進(jìn)行歸納對比是非常重要的。例如，石細(xì)胞類，黃連、黃芩、白術(shù)、天花粉、肉桂、厚樸、黃柏、五味子、檳榔等均含有石細(xì)胞，但各有特點，所以需要從顏色、形態(tài)、壁的特征以及排列集散程度等方面綜合比較，再結(jié)合其他特征來加以判斷。比如，黃連、黃芩、黃柏的石細(xì)胞是鮮黃色或淡黃色的;肉桂的石細(xì)胞是三面增厚，一面菲薄的;厚樸的石細(xì)胞則多呈分枝狀;五味子的石細(xì)胞則多密集成群。再比如，花粉粒類，丁香、洋金花、金銀花、紅花都含有花粉粒，然而丁香花粉粒極面觀三角形;洋金花花粉粒類球形、表面有條狀雕紋;金銀花花粉粒類圓形、表面具細(xì)密的短刺;紅花花粉粒類圓形，具有3個萌發(fā)孔，外壁有齒狀突起等。所以在顯微繪圖時，一定要注意將這些區(qū)別于其他藥的突出特征繪出來，避免在繪圖準(zhǔn)確性上丟分。

經(jīng)過這一階段的培訓(xùn)學(xué)習(xí)，選手已具備一定的理論知識和操作技能了，但對顯微繪圖其實仍處于“知其然而不知其所以然”的狀態(tài)，只是按照資料圖片進(jìn)行“依葫蘆畫瓢式”的顯微繪制，因而畫出來的顯微圖會感覺牽強(qiáng)附會，比較別扭，但是如果此時指導(dǎo)老師再把相應(yīng)的一些細(xì)胞、組織、內(nèi)含物的形成演化過程給選手講一講，在捋清結(jié)構(gòu)的來龍去脈后，選手不僅容易記住特征，而且繪出來的圖也更能精準(zhǔn)地體現(xiàn)粉末的本質(zhì)特征。比如石細(xì)胞，在給選手講解了紋孔和紋孔溝的形成過程后，選手明白了為什么要在石細(xì)胞的胞腔中間繪上小圓點。因此，這一階段的理論學(xué)習(xí)將明顯有助于選手繪圖水平的迅速提高。

（三）培訓(xùn)后期

經(jīng)過前期的基礎(chǔ)培訓(xùn)、中期的提高培訓(xùn)后，選手們對每味中藥粉末基本上可以說是相當(dāng)熟悉了。因此，這一階段主要是選手對顯微內(nèi)容的進(jìn)一步鞏固和查漏補(bǔ)缺階段了，選手可根據(jù)自身掌握情況，自由安排顯微培訓(xùn)內(nèi)容?；蛑攸c攻克一般很難觀察到而又具有專屬性的具有鑒別意義的顯微特征，或加強(qiáng)對顯微繪圖技巧的訓(xùn)練，如繪圖線條的粗細(xì)、繪圖整體的流暢性與美觀性，尤其是不同中藥粉末中相同組織特征的繪圖區(qū)別點。比如人參和大黃粉末中均含有草酸鈣簇晶，但二者的晶形有差異，人參簇晶直徑20～68μm，棱角銳尖;大黃簇晶直徑20～160μm，有的達(dá)190μm，棱角大多短鈍。那么在繪圖時就要注意體現(xiàn)這兩種簇晶在大小和晶形上的區(qū)別，人參的簇晶宜繪的小些且棱角尖銳些，而大黃的簇晶宜繪的大些且棱角要短鈍些。

三、其他方面

技能競賽不僅考核選手對知識技能的掌握能力，同時也是對學(xué)生心理素質(zhì)和臨場應(yīng)變能力的挑戰(zhàn)。因此培訓(xùn)過程中也需要適當(dāng)給予選手心理素質(zhì)方面的鍛煉。如在中期訓(xùn)練一段時間后可進(jìn)行仿真的模擬考核，多安排幾位老師當(dāng)裁判在現(xiàn)場進(jìn)行監(jiān)考;平常訓(xùn)練時可偶爾有一兩次在混合粉末中再摻入一味非競賽范圍內(nèi)的中藥粉末作為干擾，以此來訓(xùn)練選手對正式賽場的適應(yīng)能力和對超出常規(guī)情況時的即時處理能力。另外也要提醒選手注意勞逸結(jié)合，不要長時間對著顯微鏡的目鏡觀察，否則，很容易導(dǎo)致雙眼干澀疲勞而引發(fā)不適。另外還有一個要注意的是競賽范圍內(nèi)的兩味全草類中藥：薄荷與穿心蓮。按《中國藥典》規(guī)定這兩種藥材都是在莖葉茂盛時期采收地上部分，并且規(guī)定了含葉不得少于30%。但現(xiàn)在市場上的薄荷和穿心蓮藥材基本上都是用的地上部分的莖，含葉很少，而這兩味藥的顯微特征又是以葉作為主要觀察對象進(jìn)行描述的，顯微鏡下很難觀察到腺鱗或小腺毛等這類具有鑒別意義的特征。因此，對于這兩味中藥在打粉前除了要剔除外來雜質(zhì)外，還需要盡量挑選出帶有葉的莖和葉作為粉碎對象，這樣才能保證顯微鏡下可觀察到兩味藥應(yīng)有的專屬性鑒別特征。

總之，全國的中藥技能大賽不僅是檢驗全國中醫(yī)藥職業(yè)院校專業(yè)建設(shè)和教學(xué)改革的成果，同時也是引領(lǐng)和促進(jìn)職業(yè)院校進(jìn)行中藥專業(yè)教學(xué)改革，促進(jìn)中藥技能的傳承與創(chuàng)新。因此，在顯微項目培訓(xùn)過程中，需要指導(dǎo)老師多觀察、多思考、勤總結(jié)，真正發(fā)揮職業(yè)院校技能大賽以賽促教，以教促學(xué)，達(dá)到共同學(xué)習(xí)、交流、提高的目的。

參考文獻(xiàn)：

[1]毛雯雯，萬曉婧，劉惠娟，等.顯微鑒定在中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的應(yīng)用及進(jìn)展[J].世界科學(xué)技術(shù)（中醫(yī)藥現(xiàn)代化），2014，16（03）：538-542.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2015版一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[3]閻文玟.中藥材真?zhèn)舞b定[M].北京：人民衛(wèi)生出版社.1994.

編輯 趙瑞峰