朱穎異

摘 要：為了建立能簡易、準確測定保健食品中總黃酮、總皂苷、總蒽醌含量的方法，筆者對紫外分光光度法的應用進行了研究分析，分別采用紫外分光光度法、香草醛-高氯酸分光光度法、酸解處理后分光光度法對保健食品樣品中的總黃酮、總皂苷、總蒽醌的含量進行了測定，發(fā)現應用紫外分光光度法檢測保健食品具有簡易且重現性好的優(yōu)點。

關鍵詞：紫外分光光度法 保健食品 黃酮 皂苷 蒽醌

1.紫外分光光度法概述

紫外分光光度法是一種用于定性、定量、結構分析的方法，方法原理是不同物質分子對波長在200至760納米范圍內電磁波的吸收特性不同。該方法具有操作方便、成本低、重現性好、準確度高的優(yōu)點，目前保健食品檢測中普遍應用紫外分光光度法進行檢測。紫外分光光度法在保健食品檢測中的應用主要是檢測有效成分含量，如總黃酮、總皂苷、總蒽醌等。黃酮類化合物是自然界中廣泛存在的一類化合物，大多數的黃酮類化合物都具有顏色，該類化合物具有抗氧化、抗突變、抗腫瘤等多項功能，基于此，其被做成藥品、保健品，是藥品、保健品中的重要有效成分。保健食品中總黃酮含量測定的方法主要有硝酸鋁顯色法、紫外分光光度法，前者的專屬性不強，為此結果可靠性不足，用紫外分光光度法檢測則具有較高的準確性。得到廣泛應用的總皂苷的含量測定方法是香草醛-高氯酸法，同時，顯色法在總皂苷的含量測定中也得到了一定的應用，顯色法的原理是皂苷中的糖基會與蒽醌顯藍綠色。顯色法和香草醛-高氯酸法在皂苷含量測定中都具有良好的重現性和較高的準確性。蒽醌類化合物的含量測定方法如下：甲醇提取，酸解氧化，醋酸鎂或混合堿顯色。

2.檢測材料與方法

用紫外分光光度法檢測總黃酮、總皂苷、總蒽醌在樣品中的含量所用的材料如下：儀器方面是UV-1800紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、電子天平;試劑方面，蘆丁、人參皂苷、蒽醌的標準品，分析純的乙醇、甲醇、苯、香草醛、冰乙酸、高氯酸、醋酸鎂、鹽酸等。試驗方法主要包括配置標準品溶液、制備樣品檢測液、制備標準曲線，表1概括了上述幾種液體制備所用的試劑。

標準品溶液的配置過程如下：精密稱取一定量的蘆丁、人參皂苷、1，8-二羥基蒽醌，分別溶解在甲醇中制備成濃度為一毫升五十微克的蘆丁標準品溶液和濃度為一毫升一百微克的人參皂苷標準品溶液，以及濃度為一毫升一百微克的蒽醌標準品溶液。樣品測試液的制備過程如下：總黃酮測試液，準確稱取定量樣品溶于95%乙醇，搖勻后超聲提取、靜置，取一毫升上清液于十毫升的層析柱中在六十攝氏度的烘箱中揮發(fā)干乙醇，用20毫升苯洗后用甲醇洗脫，洗脫液定容至二十五毫升，而后在360納米出測定吸光度;總皂苷測試液，準確稱取定量樣品溶于水中，超聲提取，定容，搖勻，靜置，在十毫升的注射器中裝脫脂棉、大孔樹脂以作為層析管，取上清液于層析管中，用二十五毫升水洗，再用二十五毫升70%乙醇洗脫，洗脫液在蒸發(fā)皿中先六十度水浴揮干乙醇，而后用5%香草醛冰乙酸溶解，再加高氯酸，而后六十度水浴加熱十分鐘，冷卻后加入冰乙酸，在560納米處測吸光度;總蒽醌測試液，稱取定量樣品加甲醇溶解，水浴回流兩小時后冷卻過濾，濾液先蒸干而后用水溶解，加過氧化氫和鹽酸，沸水浴回流半小時，冷卻，轉移至分液漏斗用乙醚萃取，乙醚液合并水洗，揮干，用醋酸鎂甲醇溶解，510納米處測吸光度。標準品溶液和測試液制備好后，利用標準品溶液制備總黃酮、總皂苷、總蒽醌的標準曲線，得到不同濃度總黃酮的甲醇溶液在360納米處的吸光度曲線，不同濃度總皂苷標準品溶液在560納米處的吸光度曲線，以及不同濃度總蒽醌標準品溶液在510納米處的吸光度曲線。

3.檢測結果

當總黃酮、總皂苷、總蒽醌的標準曲線得到后，則可得出這三者的工作曲線，確定三者標準溶液質量濃度與吸光度之間的線性回歸方程，從而根據樣品的吸光度值確定樣品中黃酮、皂苷、蒽醌的質量濃度，計算出樣品中有效成分的含量。利用此測定方法應進行精密度試驗、回收率試驗、以及不同樣品有效成分含量測定，其中精密度試驗分別平行測定六次總黃酮、總皂苷、總蒽醌的樣品含量，三者的RSD分別為3.1%、2.3%、4.2%，表明紫外分光光度法在保健食品檢測中具有良好的精密度。不同樣品有效成分含量測定試驗中，硬膠囊的試驗結果如表2所示。

4.小結

應用紫外分光光度法測定保健食品中的總黃酮、總皂苷、總蒽醌等有效成分，測定結果準確，同時還具有操作簡便、成本低、重現性好的優(yōu)點。但目前我國尚未制定保健食品中總黃酮、總皂苷測定方法的國家標準，為了更好的發(fā)揮紫外分光光度法在檢測中的價值，應完善相關標準和規(guī)范。

參考文獻

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